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（2015四川卷）3．下列是以酵母菌为材料进行的实验，有关叙述错误．．的是A．探究酵母菌的呼吸方式，可用溴麝香草酚蓝检测产生的CO2B．用酵母菌发酵酿制果酒，选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精C．探究酵母菌种群数量变化，应设空白对照排除无关变量干扰D．用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板【答案】C（2015上海卷）7．利用枯草杆菌生产分泌性中性蛋白酶，以下符合该酶分离纯化的正确流程是①制成酶制剂②发酵液过滤③冷冻干燥④层析法提纯蛋白酶A．③①④②B．②④③①C．③④②①D．②④①③【答案】B（2015上海卷）9．在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图3。以下判断错误．．的是A．a处抑菌效果小于b处B．b处的滤纸片没有沥干C．c处抗生素无效D．d为对照【答案】A（2015山东卷）35．（12分）【生物—生物技术实践】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是。从功能上讲，这种培养基属于。（2）培养微生物L前，宜采用方法对接种环进行灭菌。（3）纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越。（4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括、、离子吸附法及交联法等。【答案】（1）乳糖；凝固剂；选择培养基（2）灼烧（3）小（4）（酶）活性[或：（酶）活力]包埋法；物理吸附法（注：两空可颠倒）（2015江苏卷）31．（8分）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：（1）在样品稀稀和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是（填序号）。①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是。（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是。（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见右图）。图中降解圈大小与纤维素酶的有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是（填图中序号）。（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株更适合用于人工瘤胃发酵，理由是。【答案】（8分）（1）③（2）培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果（3）避免培养基污染棉塞（4）量与活性①（5）J4发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高（2015江苏卷）24．右图为苹果酒的发酵装置示意图，下列叙述错误．．的是A．发酵过程中酒精的产生速率越来越快B．集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C．发酵过程中酵母种群呈“J”型增长D．若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气【答案】ABC（2015江苏卷）17．关于“腐乳的制作”实验，下列叙述错误．．的是A．将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高，影响毛霉生长B．腐乳坯若被细菌污染，则腐乳坯表面会出现黏性物C．勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长D．装坛阶段加入料酒，可有效防止杂菌污染【答案】C（2015江苏卷）19．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上【答案】D（2015江苏卷）11．下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，错误．．的是A．固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用B．溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素C．固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物D．凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合【答案】B（2015广东卷）29．（16分）泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”查阅资料得到图11。（1）泡制作菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是_____________________。乳酸菌发酵的第一阶段的产物有__________________。（2）据图11，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者___________；pH值呈下降趋势，原因是_________________________________。（3）该小组得到一株“优选”乳酸菌（亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍），拟参照资料的实验方案和食盐浓度（4%—10%），探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。【答案】（1）创造无氧条件丙酮酸、[H]、ATP（2）亚硝酸盐含量已接近最低水平乳酸积累（3）实验结果记录表亚硝酸盐含量（单位：mg/kg）食盐浓度（%）乳酸菌发酵时间（d）123456789104普通优选7普遍优选10普通优选推测实验结论：①用“优选”乳酸菌制作泡菜，亚硝酸盐含量更低②最适条件是亚硝酸盐含量最低时的食盐浓度和发酵时间（2015海南卷）30．[生物－选修1：生物技术实践]（15分）生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：（1）某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶酶活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有＿＿＿和＿＿＿＿。（3）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。【答案】（1）比较不同来源果胶酶的活性（4分，其他合理答案也给分）（2）温度范围设置不合适温度梯度设置不合理（每空3分，其他合理答案也给分）（3）不能（2分）未加入缓冲液（3分，其他合理答案也给分）（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕℃设计后续实验。【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）4540【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。（3）可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。（4）在45℃时，降解10g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶的数量最少。应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适活性。考点2酶的应用和生物技术在其他方面的应用（2015新课标卷Ⅱ，39，15分）39.【生物——选修1：生物技术实践】（15分）回答与胡萝卜素有关的问题：⑴胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是（填“α-胡萝卜素”，“β-胡萝卜素”或“γ-胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该病疾称为，胡萝卜素是（填“挥发性”或“非挥发性”）物质。⑵工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，（填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。⑶现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是。【答案】⑴β-胡萝卜素维生素A夜盲症非挥发性（每空2分，共8分）⑵需要（2分）⑶乙酸乙酯（2分）萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果（3分，其他答案合理也给分）【解析】该题考查胡萝卜素的相关知识及与其萃取有关的知识，难度较小。⑴胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类，β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分；一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A；由于饮食中缺乏维生素A或因某些消化系统疾病影响维生素A的吸收，致使视网膜杆状细胞没有合成视紫红质的原料而造成夜盲(暂时性夜盲症可由补充维生素A得以痊愈)。⑵提取胡萝卜素时新鲜的岩藻具有大量的水份需要进行干燥。⑶乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂与水不互溶，能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它们作萃取剂。（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕℃设计后续实验。【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）4540【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可