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用物理和化學方法控制微生物大綱7.1常用術語的定義7.2微生物死亡的模式7.3影響抗微生物劑作用效果的條件7.4控制微生物的物理方法7.5控制微生物的化學方法7.6抗微生物劑有效性的評價常用術語的定義滅菌Sterilization拉丁文sterilis是絕育和不孕)所有的活細胞、芽孢和孢子、病毒和類病毒都被殺死或從某物體上消除滅菌物品沒有活的微生物、芽孢和孢子、及其他感染性因子滅菌劑(sterilant)：能夠用來進行滅菌的化學試劑『消毒』(disinfection)：指殺死、抑制或清除病原微生物，主要目標是消滅潛在的病原『消毒劑』(Disinfectant)：通常為化學試劑，一般施用於非生物體。不能殺死芽孢及某些微生物，不能用於滅菌『衛生處理』(sanitization)處理過程中，微生物數量減少到以公共健康標準非生物體一般清潔以及部分消毒，如在餐館裡『消毒劑？』(sanitizer)被用來清洗餐具防腐(antisepsis,anti希臘語為對抗，sepsis為腐敗)利用防腐劑防止感染或腐敗透過殺死或抑制病原微生物，防止其在生物組織上生長，減少微生物總數防腐劑的毒性小於消毒劑，是為了避免殺死過多的組織細胞可透過過字尾來區分抗微生物劑(antimicrobialagent)的類型能殺死生物的物質通常以cide(拉丁文為殺死)為字尾如殺菌劑(germicide)能殺死病原菌(及一些非病原菌)，但不能殺死芽孢殺細菌劑(bactericide)：對特定微生物類群特別有效的消毒劑或防腐劑殺真菌劑(fungicide)、殺藻劑(algieide)、殺病毒劑(viricide)化學物質不能殺死微生物，但能抑制其生長。英文名稱常以static(希臘文Statikos是導致停滯或停止)為字尾抑細菌劑(bacteriostatic)、抑真菌劑(fungistalic)微生物死亡的模式在某些致死因素的作用下，微生物群體並非立即被全部殺死微生物群體死亡通常呈指數或對數方式進行當活菌數大量減少後，微生物死亡速度可能下降，因存活下來的微生物具有較強的抗性研究致死因子的效力，必須能夠判斷微生物何時死亡將細菌接種到在正常情況下可以生長的培養基後，該細菌如果不能生長就認為它已死亡病毒若不能感染其正常宿主就認為其已死亡影響抗微生物劑作用效果的條件微生物群體數量大量微生物的致死時間比少量微生物要長微生物群體組成狀況不同微生物對致死因子的敏感性不同抗微生物劑的強度和濃度化學或物理試劑的濃度或強度越高，微生物死亡速度越快作用時間殺微生物劑的作用時間越長，微生物死亡的數量越多溫度提高溫度能加強化學物質的作用效果微生物所處環境不同的環境因素可能對微生物提供保護作用或加速其死亡表面生物膜中的有機物將保護組成生物膜的微生物控制微生物的物理方法加熱、低溫、過濾、輻射是最常用加熱Heat加熱是最常用的殺滅微生物的方法主要有濕熱法和乾熱法煮沸法可以用來對飲用水和在沸水中不被破壞的物品進行消毒，但不能用於滅菌熱致死點(thermaldeathpoint，TDP)在10分鐘內殺死懸浮液中微生物的最低溫度沒有限定條件，現在一般用熱致死時間(thermaldeathtime，TDT)表示»TDT指在一定溫度、一定條件下殺死懸浮液中所有微生物的最短時間D值和Z值在食品加工業中廣泛應用D值表示在特定溫度下殺死樣品中90%微生物或孢子及芽孢所需之時間Z值是指D值降低至原來數值的1/10時所需升高的溫度度數濕熱滅菌必須在溫度高於100°C的條件下進行才能殺死細菌芽孢蒸汽滅菌一般使用高壓滅菌器autoclave)溫度為121°C、壓力為15磅(1.2atm)10-12分鐘能殺死樣品中所有營養體及芽孢一般將時間延長到15min確保滅菌效果透過降解核酸、使酶和其他必須蛋白質變性、也可能破壞細胞膜，而有效地滅菌巴斯德消毒法(Pasteurization)63℃，加熱處理30分鐘巴斯德瞬間消毒法(flashPasteurization)消毒，也稱為高溫短程巴斯德消毒法(high-temperatureshort-term，pasteurization，HTST)72℃，加熱15秒，然後迅速冷卻在食品工業中有時也用超熱消毒(ultrahightemperature，UHT)（台灣為）140-150℃對牛奶或乳製品加熱1-3秒（台灣大部分牛奶為130℃,1sec）乾熱滅菌(dryheatsterilization)160-170℃條件下，2-3小時微生物的死亡是由於細胞組的氧化和蛋白質變性引起的乾熱法不如溫熱法效果好優勢»不會導致玻璃和金屬製品被腐蝕»對粉狀物質和油等物質進行滅菌等»大多數實驗室用乾熱法對玻璃培養皿和吸管進行滅菌»乾熱法耗時長，不適合塑膠和橡膠等不耐高溫的物品滅菌低溫LowTemperatures最方便的控制技術是用冷凍或冷藏的方法來抑制微生物的生長和繁殖在-20℃或更低的溫度下進行冷凍低溫和缺乏液體水等而使微生物的生長停止冰結晶破壞其細胞膜而被殺死但冷凍不能摧毀污染的微生物冷凍是長期儲存微生物樣品的一種良好方法(-30°C或70°C的低溫冰箱)冷藏可大為減緩微生物的生長和繁殖，但是不能完全停止其生長大多數病原菌是嗜中溫性，並且在4°C左右不能良好生長冷藏的物品也可能由於嗜冷和耐冷微生物的生長而被毀壞冷藏僅能作為短期儲存食品及的技術過濾Filtration過濾滅菌只是將微生物從樣品溶液中過濾除去，而不是直接殺死它們深層過濾器(depthfilter)由纖維或顆粒狀物質製成的較厚且具有小孔徑迂回通道的過濾板層薄膜過濾器(membranefilter)醋酸纖維素、硝酸纖維素、聚碳酸醋、或其他合成物質製成的厚約0.1mm的圓形濾膜孔徑為0.2mm的膜可用來過濾大多數細胞，但不能過濾病毒藥劑、眼藥水、培養基、油、抗生素、和其他熱敏感溶液進行除菌可對空氣進行除菌外科口罩和培養微生物所用容器的棉塞，它們可通氣並除菌層流生物安全操作櫃(laminarflombiologicalSafetycabinet)»利用高效微粒空氣過濾器(high-efficiencyParticulateair(HEPA)filter)進行除菌»可以過濾掉99.97%的0.3mm顆粒輻射Radiation波長260nm左右的紫外輻射有很強的致死效應不能有效穿透玻璃、污物薄層、水、以及其他一些物質紫外輻射只在少數場合用於滅菌»房間天花板或無菌操作櫃安置紫外燈，用於對空氣和物體表面進行滅菌»紫外輻射對皮膚和眼睛有害鈷60產生的γ輻射對抗體、激素、醫用縫線、一次性塑膠注射器等物品進行低溫消毒對肉類和其他食品進行滅菌和消毒使用化學藥劑控制微生物THEUSEOFCHEMICALAGENTSINCONTROL許多因素影響化學消毒劑和防腐劑的作用效果微生物種類、消毒劑或防腐劑的濃度和性質、以及作用時間等理想的消毒劑必須是在高稀釋倍數和有機物存在的情況下，能有效作用於各種傳染因子G+細菌、G-細菌、抗酸細菌、芽孢、真菌、及病毒等對人無害，並且不腐蝕一般物品有效和低毒性之間的平衡是很難達到過度使用三氯沙(triclosan)和其他殺菌劑的廣泛使用增長了抗生素抗性細菌的出現頻率酚類Phenolics1867年，JosephLister利用它減少手術過程中微生物感染所造成的危險酚及酚衍生物如甲酚、二甲苯酚、和鄰苯酚等，在醫院和實驗室用作消毒劑市售來舒消毒液(Lysol)是酚類的混合物作用是使蛋白質變性和使細胞膜破裂醇類Alcohols酒精是最廣泛用於消毒劑和殺菌劑的藥品殺死細菌和黴菌但不能殺死袍子乙醇和異丙醇，濃度通常為70到80%蛋白質變性，可能使細胞膜的脂肪溶解10到15分鐘浸泡使溫度計和小型儀器消毒乾淨鹵素Halogens碘和氯是重要的殺菌劑碘藉由氧化細胞構造和碘化細胞中的蛋白質，可做為皮膚殺菌劑在高濃度下可以殺死孢子使用≧2%碘化鉀的酒精水溶液中，可作成碘酒施用優碘：常用於外科手術前的皮膚消毒，以及醫院和實驗室的消毒氯常用於城市給水及游泳池消毒，也應用於乳酪和食品工業能形成次氯酸，然後產生原子態氧使細胞組成分氧化，可以殺死營養細胞和真菌，但不能殺死孢子幾乎所有微生物在30分鐘內死亡氯與有機化合物反應形成致癌的三氯甲烷（用臭氧代替氯的作用）重金屬HeavyMetals鉛、銀、砷、鋅、和銅等重金屬離子(許多金屬主要作為抑菌劑而不是殺菌劑)現在已被毒性小、效果更好的殺菌劑取代例外：如1%的硝酸銀溶液仍作為嬰兒眼藥防止淋病引起的漏眼症在許多醫院，它已被紅徽素取代重金屬與蛋白質(通常以其硫氫基)結合，使蛋白質失活，也可沉澱蛋白質四級銨化物QuaternaryAmmoniumCompounds去污劑是具有極性親水端和非極性疏水端的有機物分子，可作為濕潤劑和乳化劑有效的清洗劑，源自於脂肪的肥皂不同只有陽離子去污劑是有效的消毒劑可以破壞細胞膜，也可以使蛋白質變性作食器和小型用具消毒劑，皮膚抑菌劑醛類Aldehydes甲醛和戌二醛常用來消毒能與核酸和蛋白質結合並使之失去活性，可能是透過交聯和烷基化作用殺菌氣體SterilizingGases不耐熱物品，一次性塑膠培養皿和注射器、心肺機部件、縫線和導管等，現在用環氧乙烷(ethyleneoxide,EtO)氣體滅菌EtO可與細菌蛋白質結合，可殺死微生物細胞和孢子能迅速穿透包裝甚至塑膠，是一種特別有效的消毒劑EtO毒性大，消毒後物品要經過充分通氣，以除去殘餘的EtOb-丙酸內酯(BPL,beta-Propiolactone)用來對疫苗和血清進行消毒，經過幾小時，會降解成無活性產物抗微生物劑有效性的評估EVALUATIONOFANTIMICROBIALAGENTEFFECTIVENESS酚係數試驗(phenolcoefficienttest)將某種消毒劑與酚的消毒效力進行比較酚和該消毒劑分別進行系列稀釋進行實驗酚係數值越高，表示該消毒劑在測試條件下的消毒能力越強酚系數值高於1表示該消毒劑的消毒能力強於酚