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1专题十六生物技术实践考点1微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用（2015年江苏，13)血细胞计数板是对细胞进行计数的重要工具,下列叙述正确的是A.每块血细胞计数板的正中央有1个计数室B.计数室的容积为1mm伊1mm伊0.1mmC.盖盖玻片之前,应用吸管直接向计数室滴加样液D.计数时,不应统计压在小方格角上的细胞（2015年江苏，17）关于“腐乳的制作”实验,下列叙述错误．．的是A.将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高,影响毛霉生长B.腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会出现黏性物C.勤向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长D.装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染（2015年江苏，19）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是A.高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上（2015年江苏，24多选）右图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是（）A.发酵过程中酒精的产生速率越来越快B.集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的CO2C.发酵过程中酵母种群呈“J冶型增长D.若发酵液表面出现菌膜,最可能原因是发酵瓶漏气（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]2已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕℃设计后续实验。【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）4540【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。（3）可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。（4）在45℃时，降解10g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶的数量最少。应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适活性。（2015年广东，29.16分）3泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，某兴趣小组准备参加“科技创新大赛一”，查阅资料得到图11.（l）制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是隔绝空气，形成无氧环境，有利于乳酸菌发酵．乳酸菌发酵第一阶段的产物有[H]、丙酮酸和ATP.（2）据图日11，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者亚硝酸盐的含量很低，对人体危害小；PH值呈下降趋势，原因是乳酸菌发酵产物乳酸含量增加＿。（3）该小组得到一株“优选”乳酸菌（亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍），拟参考资料的实验方案和食盐浓度（4%-10%），探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件，请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结果。比较普通乳酸菌与优先乳酸菌在不同食盐浓度下制作泡菜过程中亚硝酸盐含量变化记录表亚硝酸盐含量（mg/kg）食盐浓度4%5%6%7%8%9%10%普通乳酸菌优先乳酸菌注：均在接种量、温度等适宜条件下发酵8天。预测实验结果：优先乳酸菌发酵液中亚硝酸盐含量明显低于普通乳酸菌，且在6%的食盐浓度下，亚硝酸盐含量最低。考点2酶的应用和生物技术在其他方面的应用（2015年江苏，11)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,错误．．的是A.固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用B.溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素C.固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物4D.凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合（2015新课标卷Ⅱ，39，15分）39.【生物——选修1：生物技术实践】（15分）回答与胡萝卜素有关的问题：⑴胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是（填“α-胡萝卜素”，“β-胡萝卜素”或“γ-胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该病疾称为，胡萝卜素是（填“挥发性”或“非挥发性”）物质。⑵工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，（填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。⑶现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是。【答案】⑴β-胡萝卜素维生素A夜盲症非挥发性（每空2分，共8分）⑵需要（2分）⑶乙酸乙酯（2分）萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果（3分，其他答案合理也给分）【解析】该题考查胡萝卜素的相关知识及与其萃取有关的知识，难度较小。⑴胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类，β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分；一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A；由于饮食中缺乏维生素A或因某些消化系统疾病影响维生素A的吸收，致使视网膜杆状细胞没有合成视紫红质的原料而造成夜盲(暂时性夜盲症可由补充维生素A得以痊愈)。⑵提取胡萝卜素时新鲜的岩藻具有大量的水份需要进行干燥。⑶乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂与水不互溶，能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它们作萃取剂。（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。5（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用直接计数；若要测定其活菌数量，可选用法进行计数。（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕℃设计后续实验。【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）4540【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。（3）可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。（4）在45℃时，降解10g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶的数量最少。应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适活性。(2015年山东,35.12分)【生物—生物技术实践】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：6（1）筛选产乳糖酶的微生物L是，宜用作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是。从功能上讲，这种培养基属于。（2）培养微生物L前，宜采用方法对接种环进行灭菌。（3）纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越。（4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固化乳糖酶的确定起应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括、、离子吸附法及交联法等。答案：（1）乳糖凝固剂选择培养基（2）灼烧（3）小（4）（酶）活性[或：（酶）活力]包埋法物理吸附法解析：本题以产乳糖酶的微生物L的筛选及提纯固定的流程图为情景，主要考查微生物的培养、电泳法、固定化酶技术等相关知识，注重生物技术应用于生产的理念。考查的面广，但以识记的知识点应用分析为主，相对简单。（2015年海南，30．【生物－选修1：生物技术实践】（15分）生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：（1）某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有＿＿＿和＿＿＿＿。（3）某同学取5组试管（A～E）分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计＿＿＿（填“能”或“不能”）达到目的，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。7【答案】（1）探究不同来源果胶酶的活性（2）4组的温度设置不合适各组的酶促反应受两个不同温度影响（3）不能E组加入蒸馏水而不是缓冲液违背了单一变量原则【解析】（1）根据题意，用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较，可见实验的自变量是果胶酶的来源不同，因变量是果胶酶的活性，所以该实验目的是探究不同来源果胶酶的活性。（2）根据实验设计可知，该实验是探究果胶酶的最适温度，所以自变量是温度，因变量是果胶酶的活性，用出汁量进行衡量，出汁量越多则果胶酶活性越高。该实验方案中，温度应该在常温范围内设置系列温度梯度且梯度差值相等，所以4组的温度应分别设置为15℃、20℃、25℃、30℃；另外探究温度对酶活性的影响时，应保证酶促反应只能在设定的温度下进行，同一实验组的反应温度只能是一个，所以实验操作应该是将各组盛有果胶酶的试管与盛有果泥的试管分别在设定温度下处理一定时间后再将两只试管混合，才能保证实验在设定的温度下进行。（3）根据题意，本实验的自变量是果胶酶的量，因变量是出汁量，对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则，根据实验设置，通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，则E组应加入缓冲液而不是蒸馏水，使试管中液体体积与实验组相同，才符合实验设计应遵循的单一变量原则。（2015年江苏31.8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可