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复习题目第一章绪论1、食品的卫生标准内容包括哪些？感官指标.理化指标.微生物指标2对食品进行微生物检验具有何意义？（一）有害微生物对人类和生产的影响：1）.引起食品变质.2）.引起食物中毒.3）导致人体患病(二)食品微生物检验的意义1）.是衡量食品卫生质量的重要指标,也是判定被检食品能否食用的科学依据品能否食用的科学依据.2）.可以判断食品加工环境及食品卫生的情况,为卫生管理工作提供科学依据管理工作提供科学依据.3）.可以有效地防止或减少食物中毒和人畜共患病发生4）.保证产品的质量,避免不必要的损失.3、食品微生物检验的范围包括哪些？范围：1).生产环境的检验2).原辅料的检验3).食品加工、储藏、销售储环节的检验4).食品的检验（重点）4、食品卫生标准中的微生物指标有哪些？1.菌落总数2.大肠菌群3.致病菌4.霉菌及其毒素5.其他指标1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题?培养箱的配置和使用培养箱的配置和使用配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个使用注意事项：(1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。(2)内放一杯水，以保持湿度。(3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。(4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。(5)不得当烘箱使用。2在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题?使用注意事项：（1）37℃和42℃水浴锅24小时工作;（2）其余水涡锅用后关掉电源；（3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。配置：37℃、42℃、56℃各一个3如何正确使用超净台?1）、使用前先打开紫外灯照射紫外线照射时间40~60分钟；2）、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭,请用含水棉布檫拭；3）、请保持超净台整洁，不要堆积杂物；4）、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯；5）、请做好使用记录。6）、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。7）、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?（1)将培养皿吸管等玻璃器皿洗净干燥后用报纸(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160℃—165℃保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。（4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除蒸气缓慢排除。（6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。（7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌(一)、新购的玻璃器皿1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。2、再浸泡于１～２％的盐酸中数小时，最后用流水冲净。(二)、用过的玻璃器皿1含油脂器材的清洗（1）、单独高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100℃烘箱中烤0.5h;（4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。2、含菌试管的清洗高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。3、含菌平皿的灭菌（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。4、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌；（2）、用肥皂水洗涤一次；（3）、最后用清水冲洗干净即可。5、载玻片及盖玻片的清洗（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5%的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；（2）盖片用软布擦干即可；（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。（三）、玻璃器材的灭菌：（1）清洗后烘干；（2）加塞包扎；（3）灭菌:干热灭菌:160~165℃烘箱中烤2h湿热灭菌:121℃20min7、干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何?方法要求适用范围1．干热灭菌法焚烧法直接燃烧或焚烧废弃的污染物或死于传染病的人及动物尸体烧灼法火焰中直接烧灼接菌环、试管口或瓶口等干烤法干烤箱内160～170℃2h耐高温物品如玻璃试管、瓷器等2．湿热灭菌法巴氏消毒法61．1～62．8℃30min牛奶或啤酒的消毒或71．7℃15～30s煮沸法l00℃5min可杀死繁殖体、外科手术器械、注射器、胶管等杀死芽胞需1～3h流通蒸气法用蒸笼或蒸气灭菌器常用于不耐高温的营养品间歇灭菌法反复三次流通蒸气达到彻底灭菌不耐热物品或特殊条件下的灭菌高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌器内1．05kg／cm2耐高温并不怕潮湿的物品的灭菌如手术衣、121．3℃t5--30min敷料、手术器械等3．紫外线消毒法紫外线灯照射30～60min空气或物品表面消毒4．电寓辐射法包括X射线γ射线和阴极射线一次性注射器、敷料、内镜插管、导管、中成药等5．超声波20kHZ的声波仅用于菌体破碎以及提取细胞组分6．滤过除菌法细菌滤器不耐热的血清、抗毒素、生物药品8、电热烘箱和高压锅如何操作?各有哪些使用注意事项?1）装料：灭菌前先将玻璃器皿、金属用具用包扎纸（不用油纸）包好，培养皿也可装入金属盒内，然后均匀放入干烤箱内。物品不能摆放过挤，不能紧靠箱壁，使空气流通，温度均匀。升温：接通电源，打开开关，旋转箱顶部的调气阀，打开通气孔，排除箱内冷空气和水汽。升温，待箱内温度达到80℃时，关闭通气孔，打开鼓风机，使箱内温度均匀。维持恒温：继续加热，待温度达到160-170℃时,保温维持2h。降温：灭菌完毕，切断电源，当箱内温度冷却至60℃时方可开箱取出物品。2）加水：打开灭菌锅盖，加水适量（手提式高压锅加水到与支架圈平行处）装料：将带灭菌物品放于灭菌桶内，物品排放注意彼此间留有一定空隙，使蒸汽在容器内能够流通达到每个物品的部位，以免形成蒸汽死角。物品不要紧靠桶壁，防止冷凝水进入灭菌物品。密封：将盖上的软管插入灭菌桶的槽内，使罐内冷空气自下而上排出，加盖，上下螺栓口对齐，采用对角方式均匀旋转拧紧螺栓，使灭菌锅密闭。加热:打开排气口（放气阀），排气5-10min后（或喷出气体不形成水雾），此时蒸汽已将锅内的冷空气排尽，关闭放气阀。温度随蒸汽压力增高而上升。待压力逐渐上升至所需温度时，控制热源，维持所需压力和温度，并开始计时。到达规定时间，关闭热源，停止加热，压力随之逐渐降低。降压、取料：待压力自然降至“0”后，打开放气阀，松动螺栓，开盖。立即取出灭菌物品，以免凝结在锅盖和器壁上的水滴弄湿包装纸或被灭菌物品，增加染均的概率。斜面培养基自锅内取出后要趁热摆放，灭菌后的空培养皿、试管等要烘干或晾干。清理：灭菌完毕后,除去锅内剩余水，保持锅内干燥。若连续使用则需每次补足水分。1）注意事项：灭菌过程中温度不能上升或下降过急。温度达到60℃以上时，不能随意打开干燥箱门。2）注意事项：高压蒸汽灭菌的技术关键是在压力上升之前先排除锅内的冷空气。若锅内仍有滞留的冷空气，压力表虽达到指定压力但锅内温度却达不到相应的温度，灭菌效果不好。灭菌时人不能离开现场，要严格控制热源维持灭菌时的压力。压力过高不仅培养基的营养成分被破坏，而且高压锅超过耐压范围易发生爆炸造成伤人事故。灭菌完毕后要自然冷却，切忌用凉水浇灭菌锅来降温。压力降至“0”位前不能开盖，以免培养基沸腾喷出或沾湿棉塞。1、加入培养基中的抑制剂有什么作用，常用的抑制剂有哪些？1）、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2）、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素2、在制备培养基时，将各成份溶化时要注意哪些问题？指示剂应在调节好PH值后再加入；煮溶后要补加足水份；不能把培养基煮焦，焦化的不能使用3、在制备培养基时，如何进行培养基pH的初步调正？灭菌后PH值会下降01～02；在做培养基校正PH值时，应比实际值高01～02；PH调整后，还应将培养基煮沸。4、如何选择培养基的灭菌条件？（1）含糖类或明胶的培养基：113℃灭菌15分钟或115℃灭菌10分钟。（2）无糖培养基：121℃灭菌15~20分钟。（3）血液、体液和抗生素等以无菌操作技术抽取后再加入冷却至约50℃左右的培养基中。（4）琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至55℃-60℃时取出，再摆置成适当斜面。5、如何进行培养基的保存（1）基础培养基不能超过两周（2）生化试验培养基不宜超过一周，（3）选择性或鉴别性培养最好当天使用，倾注的平板培养基不宜超过3天。1、什么是无菌技术？指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。2、如何做好无菌室的消毒和防污染工作？每日（使用前）紫外线照射（1~2小时）.每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时）.每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。3、如何做好超净台的使用与保养？（1）风速保持在0.32-0.48米/秒;（2）使用前开启紫外灯照射30分钟以上;（3）让超净台预工作10－15分钟;（4）使用完毕后，用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净.4、无菌操作的目的是什么？（1）是保证待检物品不被环境中微生物的污染；（2）是防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员。5、进入无菌室前要做好哪些准备工作？（1）、定期检查无菌环境的空气是否符合规定；（2）、用紫外线灭菌处理30~60分钟；（3）、检查无菌器材是否完备；（4）、洗手消毒；（5）、手部消毒后，再穿戴无菌工作服。6、实验操作过程的无菌操作要求包括哪些内容（1）、在操作中不应有大幅度或快速的动作；（2）、使用玻璃器皿应轻取轻放。（3）、在正火焰上方操作；（4）、接种用具在使用前、后都必须灼烧灭菌；（5）、在接种培养物时，协作应轻、准。（6）、不能用嘴直接吸吹吸管。（7）、带有菌液的吸管、玻片等器材应及时置于盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒。1.志贺氏菌都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生H2S。在培养基上应该产生什么现象？斜面变红，底部仍保持黄色。2.大肠杆菌，能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产生H2S。在培养基上应该是什么现象？使整个培养基呈现黄色3.沙门氏菌，能分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生H2S，多数产气，在培养基上应该是什么现象？硫化氢和培养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀1、什么是生化试验?指通过利用生物化学的方法来测定微生物的代谢产物、代谢方式和条件等来鉴别细菌的类别、属种的试验。2、做生化试验要注意哪些事项？1）、待检菌应是新鲜培养物。培养18~24h。2）待检菌应是纯种培养物。3）、遵守观察反应的时间。观察结果的时间，多为24或48小时。4)、应做必要的对照试验。5)、提高阳性检出率，至少挑取2~3待检的疑似菌落分别进行试验。3、简述糖酵解试验的原理，写出其试验方法和结果的记录原理：不同的细菌对各种糖醇的分解能力及所产生的代谢产物各不同，有的能分解多种糖醇），有的只能分解1~2种糖醇，有的分解糖醇能产酸产气，有的分解糖醇只产酸不产气，根据这些特点，可鉴别细菌。试验方法：用接种针或环移取纯培养物少许，接种于糖发酵管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。置36±1.0℃培养1~3天，每天观察结果。记