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第1页共11页《DNA和蛋白质技术》(满分：100分时间：90分钟)一、选择题（每小题2分，共50分）1.DNA的粗提取与鉴定实验，与下列哪项原理无关A.DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低B.DNA易被龙胆紫溶液染成紫色C.DNA溶液中加入二苯胺试剂，加热后产生蓝色D.加入95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出2.在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是A.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同3.向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是A．加快溶解DNA的速度B．加快溶解杂质的速度C．减少DNA的溶解度，加快DNA析出D．减少杂质的溶解度，加快杂质的析出4.有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是：（）A、它们都是分离蛋白质的重要方法B、它们的原理相同C、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要D、以上说法都正确5.在进行PCR操作时，如果枪头受到污染，则会影响到A.复制循环速度B.DNA分子纯度C.DNA分子大小D.酶催化活性6.下列关于PCR技术的叙述，正确的是（）A.PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B.该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶[C.该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D.该技术应用体内DNA双链复制原理，也需要模板、原料、能量、酶等条件7.下列有关PCR技术的说法，错误的是：A．DNA复制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能从3’端延伸DNA链B．引物与DNA母链的关系是碱基互补配对C．添加缓冲溶液的作用是维持pH基本不变第2页共11页D．DNA聚合酶可以用来合成引物8.多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高9.下列对PCR技术的叙述中不正确的A.遵循的基本原理是DNA双链复制B.聚合酶链反应在常温下就可以迅速进行，所以可用来短时间获得大量目的基因C.扩增仪内必须加入引物、原料和DNA聚合酶D.成指数式扩增，约为2n，n为扩增次数10．凝胶色谱法操作正确的是()A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B．将橡皮塞下部切出凹穴C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片11．在实验室中，做PCR通常使用的微量离心管是一种薄壁塑料管，此过程可以使用玻璃离心管吗？为什么()A．可以，玻璃离心管、塑料微量离心管都可以使用B．不可以，玻璃离心管易碎，使用不安全C．不可以，玻璃离心管一般较大，不适合作为微量离心管D．不可以，玻璃离心管容易吸附DNA12．某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉，他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是()①降低温度，检测处理后的杂合DNA双链②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A．②④③B．②④③①C．③④①D．②④①第3页共11页13．下面说法不．正确的是()A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内14.下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是()A．可采集猪血作为实验材料B．用蒸馏水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液15.对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是()A．利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离C．在溶有DNA的2mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离16.下列对有关实验的叙述，不．正确的是()A．血红蛋白的提取和分离实验中使用的交联葡聚糖凝胶G75，其中“75”表示每克凝胶膨胀时吸水7.5克B．在色素的提取和分离的实验中，叶绿素b在层析液中的溶解度最低，扩散速度最慢C．用洋葱作实验材料进行DNA的粗提取与鉴定实验时，加入一定的食盐的目的是有利于溶解DNAD．制取细胞膜、血红蛋白的提取和分离均以鸡血细胞作为实验材料17.有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，不．正确的是()A．可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构18.聚合酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术叙述不．正确的是()第4页共11页A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C．PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变19.蛋白质的提取和分离分为哪几步()A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定20.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是()A．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色C．在DNA粗提取实验中，往2mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物即止D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等21蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不．正确的是()A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质22.以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是()A．红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水，重复洗涤3次B．将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12小时C．凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢23.下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是()A．用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面杂蛋白B．将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质第5页共11页C．血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构24.下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是()试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl溶液中析出蛋白质D冷却的酒精加入到过滤后含DNA的NaCl溶液中产生特定的颜色反应25.下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置。下列相关叙述正确的是()A．血红蛋白在红细胞中的作用体现了蛋白质具有调节功能B．甲装置中A是蒸馏水，乙装置中C溶液的作用是洗脱血红蛋白C．甲装置的目的是去除样品中分子量较大的杂质D．乙装置分离时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液二、简答题1.在DNA鉴定过程中，需大量的DNA，而PCR技术可以使样品DNA扩增，获得大量DNA分子。下图表示这一过程（图中黑色长方形是引物）。在很短的时间内将DNA扩增几百倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)A过程（交性）表示，细胞内实现该过程的方法第6页共11页是。(2)某样品DNA分子中共含3000个碱基对，碱基数量满足：2/1)/()(CGTA，若经5次循环后，获得与样品相同的DNA分子，至少需要向试管中加入个腺嘌呤脱氧核苷酸（忽略引物所对应的片段）。(3)当温度降低（退火）时,原则保证引物能与模板末端特异性结合。升温至72℃，在酶的作用下，按5’—3’方向延伸子链。2.红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：________、________、________和________。(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①加入柠檬酸钠的目的是__________________________________________________。②在样品处理中包括红细胞的洗涤、______________________________________、分离血红蛋白溶液、透析。③洗涤红细胞的目的是________________，你如何知道红细胞已洗涤干净？________________________________________________________________________④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是______________________________________________________________________________________________________。⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样？_________________________________。(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。①透析的目的是_________________________________________________________。②透析的原理是__________________________________________________________。(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。①样品纯化的目的是_______________________________________________________。②血红蛋白有什么特点？___________________________________________________。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？______________________________________________________________________________________________________________