第三章细胞生物学研究方法

第三章细胞生物学研究方法-8-第三章细胞生物学研究方法基础篇一、名词解释1.超微结构(supper-microscopicstructure)2.细胞培养(cellculture)3.酵母人工染色体（yeastartificialchromosome,YAC）4.放射自显影技术(autoradiography)5.共聚焦显微镜(confocalmicroscope)6.荧光显微镜（fluorescencemicroscope）7.显微分辨率(microscopicresolution)8．显微结构(microscopicstructure)9．倒置显微镜（invertedmicroscope）10．双向凝胶电泳(two-dimensionalgelelectrophoresis)11.扫描电子显微镜（scanningelectronmicroscope，SEM）12.核磁共振(nuclearmagneticresonance，NMR)13.研究人类疾病的动物模型(animalmodelforhumandisease)14.核酸杂交(nucleicacidhybridization)二、选择题1.哪一种柱层析分离蛋白质是建立在分子重量基础上的?A．离子交换层析B．凝胶过滤层析C．亲和层析D．等电聚焦,而不是决定了颜色的各种波长的光2.在细胞分级抽提方法中，为了溶解膜系统，应选用（）。A．TritonX-100B．Tween40C．脱氧胆酸钠D．0.25mol/L硫酸钠3.提高一般光学显微镜的分辨能力，常用的方法有（）。A．利用高折射率的介质如甘油B．调节聚光镜，加红色滤光片C．用荧光抗体示踪D．将标本染色4.在细胞培养的研究中，已知培养液与未知细胞培养液的主要区别是什么？A．未知培养液是细胞培养研究中昀近才发展起来的技术B．未知培养液完全是人工制造的C．已知培养液包括血清，淋巴因子和其它来自生物体的流质体D．已知培养液不含血清，淋巴因子和其它来自生物体的流质体5.研究DNA在细胞中的代谢，常用的同位素标记物有（）。A．14C-戊糖B．32P-磷酸C．15N-鸟嘌呤D．3H-胸腺嘧啶6.假设你对重建生活细胞的有丝分裂过程中染色体的三维形态感兴趣，你将选择哪种显微技术？A．冰冻一断裂显微术B．共聚焦扫描术C．光学显微术D．扫描电子显微术7.现有匀桨的和已经过各级离心理过的鼠肝细胞溶液，哪一组分含有的线粒体昀少？A．进行离心之前的整个匀桨溶液B．第一次低速离心后的上清液C．经过高速超速离心后的上清液D．以上的任何组分都没有线粒体8.下列关于杂交瘤技术的描述中，昀正确的一第三章细胞生物学研究方法-9-项是（）。A．B淋巴细胞与B淋巴瘤细胞融合，目的是抑制瘤细胞无限生长B．在培养基中加入氨基喋呤可选出杂交细胞C．氨基喋呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成D．氨基喋呤能导致B淋巴细胞无限分裂9.分别使用光镜的低倍镜和高倍镜观察同一细胞标本相，可发现在低倍镜下（）。A．相较小，视野较暗B．相较小，视野较亮C．相较大，视野较暗D．相较大，视野较亮10.在凝胶电泳中，示踪染料的移动速度()。A．比各种不同分子样品移动得慢B．与各种不同分子样品移动速度相同C．比各种不同分子样品移动得快D．以上都不对11.光镜与电镜比较，下列各项中，（）是不正确的。A．电镜用的是电子束，而不是可见光B．电镜样品要在真空中观察，而不是暴露在空气中C．电镜和光镜的样品都需要用化学染料染色D．用于电镜的标本要彻底脱水，光镜则不必12.在递增细胞匀浆液的离心转速过程中昀先沉淀下来的是（）。A．核糖体B．线粒体C．未破碎的细胞核D．微体13.在包埋-去包埋超薄切片电镜技术中，（）项不正确。A．不用重金属染色B．分辨率高C．没有包埋剂存在D．要用Triton去包埋14．下列关于杂交瘤技术的描述中，昀正确的一项是（）。A．B淋巴细胞与B淋巴瘤细胞融合，目的是抑制瘤细胞无限生长B．在培养基中加入氨基喋呤可选出杂交细胞C．氨基喋呤可抑制瘤细胞的蛋白质合成D．氨基喋呤能导致B淋巴细胞无限分裂15.氚的半衰期为12年，那么保存了24年的氚的放射性是昀初的多少？A．12%B．25%C．75%D．已不存在16.如果您想要在细胞内部寻找一个含高浓度Ca2+的区域，下列哪一种显微技术可以选则?A．荧光显微技术B.偏光显微技术C.相差显微技术D.透射电镜显微技术17.关于放射自显影技术，下列哪项错误？A．利用放射性同位素探测细胞内生物大分子动态变化的一种方法B．包括宏观自显影、光镜自显影和电镜自显影等3种类型C．具有灵敏度高和操作简便、无污染等优点D．自显影时常用的感光材料包括X光胶片和原子核乳胶等18.基因枪是()。A．一种将DNA包被片打入植物细胞的枪B．用”闪电速度”的酶来合成重组DNA的新技术C．一种利用重组DNA技术制造的用于战争的大杀伤性武器D．以上都不对19.下列关于基因敲除实验的表述中，不正确的一项是()。第三章细胞生物学研究方法-10-A.需要胚性干细胞作为转化受体；B.需要体外构建重组体；C.敲除后，靶基因不再存在;D.一般说来，要经多次传代才能表现出敲除基因的缺陷表型。20.观察活细胞的显微结构时，昀好用（）。A．荧光显微镜B．相差显微镜C．扫描电镜D．透射电镜三、填空题1.用荧光显微镜观察细胞时，经吖啶橙染色的细胞中的DNA发荧光，而RNA发荧光。2.相差显微镜与普通显微镜的区别是用替代可变光阑，用代替普通物镜，并带有一个合轴用的望远镜。3.倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其。4.在同位素追踪技术中，用于研究DNA的同位素标记的前体物是。5.在光学显微镜下见到的结构称为，在电子显微镜下见到的结构称为。6.细胞培养的突出特点是：可在。7.细菌细胞、酵母菌细胞和植物细胞的细胞壁的化学组成是不同的，所以在制备原生质体时用不同的酶脱壁。一般说来，细菌可用，酵母可用，植物细胞可用。8.在酵母人工染色体制备过程中，要用酶脱去酵母的细胞壁，使之成为，并且用进行观察和计数。9.动物细胞培养所用合成培养基中除含多种、和外，一般还需加入。10.高压电镜的电压在120kV以上，优点是：、。11.细菌质膜的多功能性主要表现在：具有的呼吸作用、具有的分泌作用，具有的信号传导作用。12.免疫细胞化学技术是用来定位细胞中的物质。13.若用紫外光为光源，光学显微镜的昀大分辨率为，透射电子显微镜的昀大分辨率为，扫描电镜的分辨率为。14.可用技术来研究质膜结构的不对称性。15.分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间昀近距离的能力。人眼为，普通光学显微镜为；透射电子显微镜为，扫描隧道显微镜为；扫描电子显微镜为；以紫外光为光源的光学显微镜为。四、判断题1.氯化铯密度梯度离心又称等密度梯度离心。2.淋巴细胞在体外培养时是以贴壁的方式进行生长。3.以蔗糖为介质的密度梯度离心又叫差速密度梯度离心。4.在光学显微镜下观察到的细胞结构，称为亚显微结构，在电子显微镜下观察到的结构称为超微结构。5.癌细胞的培养，也是单层生长，但没有接触抑制现象。6.细胞匀浆离心时，较小的细胞器经受较小的磨擦，因而比更大的细胞器更快沉淀。第三章细胞生物学研究方法-11-7.为了使光学显微镜或电子显微镜标本的反差增大，可用化学染料对它们进行染色。8.透射或扫描电子显微镜都不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜都可以用于观察活细胞。五、简答题1.电子显微镜为何不能观察活标本？2.比较放大率和分辨率。3.比较透射电子显微镜和扫描电子显微镜。4.单克隆抗体技术的基本原理是什么？六、问答题1.动物体细胞克隆有什么意义？2.何谓原代培养、细胞株和细胞系?提高篇一、填空题1.电子染色是用来增强电子的散射能力。2.乙醇沉淀DNA的主要原理是。3.超薄切片染色常采用和双染法。4.．用蛋白水解酶消化细胞间的结合物，或用金属离子螯合剂如EGTA除去细胞互相黏着所依赖的，分离细胞。5.灭活的仙台病毒之所以能够诱导细胞融合，是因为。6.观察贴壁生长的培养动物细胞可用，而观察脱去细胞壁的植物细胞，则要用。7.显微镜的分辨本领是指能够能力，用来表示。8.细胞内不同组分的分级分离的常用方法有离心法、层析法、电泳法等。离心技术可将细胞匀浆中的不同细胞器或生物大分子进行有效分离。因为不同形态、大小和密度的细胞器以及不同分子量的生物大分子在离心力作用下各不相同。离心分离法又分和两种。离心是一种较为简便的分离法，常用于细胞核和的分离，因为在密度均一的介质中，颗粒越大沉降越，反之则沉降较。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开，而且所获得的分离组分往往不很纯。而离心则是较为精细的分离手段，这种离心方法的关键是先在离心管中制备出或等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在昀上层，在此条件下离心，细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。呈密度梯度的介质可以稳定沉淀成分、防止对流混合。层析法是分离蛋白质的常用于段，其基本原理是不同的蛋白质分子其和所带不同，当它们通过某种介质（基质）而与其发生相互作用时，会被不同程度地，这样便使不同类型的蛋白质分子移动的快慢不同，从而得以分离。如根据蛋白质的大小、所带电荷或特殊的化学集团选择不同的基质的层析，如凝胶过滤柱层析、离子交换树脂柱层析或亲和层等更可有效地分离不同的蛋白质。法是分离蛋白质、核酸的有效方法，在细胞生物学研究领域有着广泛的应用。其基本原理是，不同种类的蛋白质或核酸所携净电荷的不同，它们在一定强度的电场中会按所带、分子的以不同速度在电场中移动，从而得以分离成不同的。9.适于观察活细胞的光学显微镜有、和等。10.凝胶过滤层析又称或,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的进行分离和纯化。11.显微镜的分辨率约等于光波长的，通常把这一数值看成是光学显微镜分辨力第三章细胞生物学研究方法-12-的。12.酶细胞化学反应包括两个步骤：①，②。13.单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。14.贴壁生长的细胞具有3个特点：①；②；③。15.用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为。16.透射电子显微镜由、、三部分所组成。17.物质在紫外光照射下发出的荧光可分为和两种，其中需要将被照射的物质进行染色。18.用细胞培养法来研究生命活动规律的局限性是。19.通过或形成的细胞叫细胞株。20.电子显微镜使用的是透镜，而光学显微镜使用的是透镜。二、选择题1.光学显微镜有１个放大率为40的物镜和放大倍数为10的目镜，成像的总放大倍数是多少？A．40XB．50XC．400XD．450X2.关于X射线衍射技术，下列哪项有误？A．是测定生物大分子结构的一项适用技术B．可测定蛋白质结晶分子中原子的空间排布C．X射线是波长较短的电磁辐射，比电子的穿透力强D．该技术能检测较薄的含水标本3.流式细胞计或流式细胞分选仪能快速测定细胞的下列哪些参数？A．DNA含量B．RNA含量C．蛋白质含量D．细胞体积4.为什么透射电镜的照片没有颜色?A．细胞内部结构无颜色,都为灰白色的暗影B．彩色显微照片太昂贵了C．彩色胶片尚未发明D．照像的底片接受的是穿过样品的电子5.在电镜下面发现了一种新的细胞器，但却不能肯定是真的还是技术问题造成的人为现象，下列哪一项可证实推测？A．在若干个相同来源的相同制备样品中寻找这一结构B．在若干个不同来源的相同制备样品中找这一结构C．在不同染色方法制备的样品中找相同结构D．在不同的(或无)固定剂条件下制备的样品中找相同结构6.利用不同性质的有机染料可对细胞中不同成分进行选择性染色，下列哪种结果有误？A．碘液可使口腔上皮细胞的细胞质和细胞核呈深浅不同的棕黄色B．吉姆萨染液可使细胞核或染色体呈紫红色或桔红色C．甲基绿可使RNA分子呈蓝绿色D．派洛宁可使RNA分子呈红色7.一般光学显微镜（用蓝色滤光片），当物镜镜口率（N.A）为1.4时，其分辨率极限和放大倍数分别为（）。A．～0.4μ，500倍B．～0.2μ，1000倍C．～0.2μ，500倍第三章细胞生物学研究方法-13-D．～0.4μ，1000倍8.关于共焦