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第五章环境因子对微生物的影响第一节基本概念微生物杀灭抑制：彻底杀灭灭菌部分杀灭消毒抑制微生物生长防腐灭菌：用强烈的物理、化学因素杀死物体内外各种微生物的营养细胞、芽孢、孢子。消毒：用物理、化学因素杀死物体内外病原微生物的营养细胞。防腐：利用某种物理、化学因素完全抑制微生物生长繁殖。第二节温度对微生物的影响一、高温影响——消毒、灭菌干热灭菌法连续加压灭菌法干燥加热空气灭菌法湿热灭菌法常压下加压下巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法常规加压灭菌法(高压蒸汽灭菌法)火焰灭菌1、干热法（1）干热灭菌法灭菌方法：160～170摄氏度下维持1～2h。适宜对象：金属制品、清洁玻璃器皿等。（2）火焰灭菌法适宜对象：接种环、接种针、棉塞等。烘箱160～170℃2h灭菌2、湿热法（1）高压蒸汽灭菌法灭菌方法：0.105MPa，121摄氏度，15-30min适合对象：培养基注意事项：灭菌前应排尽锅内的冷空气，否则达不到实际灭菌所需的温度。蒸汽灭菌锅121℃20～30min（2）间歇灭菌法灭菌方法：100摄氏度蒸煮15～60min37摄氏度培养24h100摄氏度蒸煮15～60min反复三次适宜对象：含芽孢的微生物（3）高温瞬时灭菌法灭菌方法：135～140摄氏度保持5～15s处理对象：牛奶、饮料。（4）巴氏消毒法灭菌方法：60～85摄氏度处理15s～30min。处理对象：牛奶、饮料。低温维持消毒法（LTH）：63摄氏度保持30min高温瞬时消毒法（HTST）:75摄氏度维持15s具体方法3、影响灭菌效果的因素（1）结构（2）菌龄（3）菌体含水量（4）pH值（5）煮沸消毒法灭菌方法：100摄氏度处理15min。处理对象：饮用水。二、低温的影响低温——细胞结冻～最适温度下限进入休眠状态提问：？酶活性降低，导致代谢、遗传普遍停滞；•冰渣导致细胞膜破裂，失“血”过多一旦获得适宜温度，即可恢复活性•提问：细胞内外冻结易导致死亡，原因何在？•嗜中温菌（耐冷喜温）一般在5℃以下处于休眠状态，因此通常实验室用冰箱的4℃冷藏温度保藏细菌或甘油、石蜡冷冻保存菌种低温的用途菌种保藏液氮的温度（-195℃）、干冰温度（-70℃）、-20℃和4℃（常加大分子保护剂如糊精、血清白蛋白等）食品冷藏冷藏（0-4℃）与冻藏（-18℃）第三节紫外线对微生物的影响1、紫外线杀菌的机理干扰DNA复制（1）诱导DNA形成胸腺嘧啶二聚体，阻止DNA解链（2）引起核甘酸链断裂使空气中的O2变成O3，使H2O氧化生成H2O2,由O3和H2O2发挥杀菌作用。2、紫外线杀菌的特点（1）穿透性差（2）光复活现象（3）暗复活现象3、紫外线的应用（1）空气消毒（2）表面消毒（3）诱变育种第四节水分对微生物的影响细菌基本上是生活在水中的生物。提问：环境中过于干燥细菌如何生存？（在不受热和其它外界因素干扰下）干燥细胞将处于长期休眠状态——用干燥法防止食物腐败（细菌滋生）如方便面、干果、肉干、葡萄干等。——用干燥法来保存细菌，如将细菌放置在干燥的沙土中可以长期保存。一旦提供潮气则会很快复活。一、干燥衡量方法：通常以一定浓度溶液与纯水间形成的渗透压作为该溶液的渗透压提问：水将从渗透压一方流向渗透压的一方？低、高渗透压可影响细菌生存：1.相同渗透压溶液中细菌细胞内水含量稳定，细菌生活得最好。等渗透压溶液——0．85％的食盐(NaCl)溶液（生理盐水）。常作为进行细菌稀释分离的稀释液。二、渗透压2.高渗透压溶液中提问：哪些是高渗透压溶液？细菌会发生什么现象？浓溶液；质壁分离—防腐（细菌滋生）如用5～30%的盐水腌咸菜、咸鱼，用60～80%的糖溶液做蜜饯等。•—海洋对各种病原菌（淡水菌）的杀灭•—高含盐废水（如油田采出水）难于生物处理的原因•提问：如何解决？•冲稀;防垢剂;细菌基因改造；3.低渗透压溶液提问：细菌于其中会如何？如纯水外界大量水流入细菌细胞内，细胞膨胀，甚至破裂。综合以上几点，在微生物实验室中稀释菌液，应该用生理盐水（0.85%）(除非稀释后马上就用的可以用无菌的蒸馏水。)