细胞生物学重点串讲

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CellBiology第一节:一、细胞学说•CellTheory是19世纪的重大发现之一,其基本内容有三条:•①有机体是由细胞构成的;•②细胞是构成有机体的基本单位;•③新细胞来源于已存在细胞的分裂。•二、细胞概念新思考•三、细胞的共性第二节:病毒及与细胞的联系•1、结构•2、类型•3、增殖•4、与细胞的关系第三节:原核细胞与古核细胞细菌古细菌真菌2.2细菌的细胞壁细胞壁(cellwall)是位于细胞表面,内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧、略具弹性的结构。占细胞干重的10-25%。*细胞壁的功能维持菌体固有的形态保护细菌抵抗低渗环境参与菌体内外的物质交换菌体表面带有多种抗原分子,可诱发机体的免疫应答。G+和G-的细胞壁比较细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌强度较坚韧较疏松厚度20-80nm10-15nm肽聚糖层数可多达560层1-2层肽聚糖含量占细胞壁干重50%-80%占细胞壁干重5%-20%磷壁酸有无外膜无有革兰氏染色法(Giamstaining)由丹麦医生GhristianGram于1884年创立。通过革兰氏染色法可将所有细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。它是鉴别细菌的重要方法。初染复染脱色媒染结晶紫碘液95%乙醇复红甲菌乙菌ProceduresofGramStainingG+G-显微镜下菌体呈红色者为革兰氏染色阴性细菌(常以G-表示),呈深蓝紫色者为革兰氏染色阳性反应细菌(常以G+表示)。•目前一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分基础上的一种物理原因。•通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫-碘的大分子复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密,故在用乙醇洗脱时,肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩,加上它基本不含类脂,故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙,因此,结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在细胞壁内,使其呈现紫色。而革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散,故遇乙醇后,肽聚糖网孔不易收缩,加上它类脂含量高,所以当乙醇把类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大缝隙,复合物容易溶出细胞壁,因此通过乙醇脱色后,细胞又成无色。这时再用红色染料进行复染,革兰氏阴性细菌获得一层新的颜色-红色,而革兰氏阳性菌则仍呈紫色。革兰氏染色的机制原核细胞与真核细胞真核生物与原核生物的比较比较项目原核生物真核生物细胞大小较小(通常直径小于2um)较大(通常直径大于2um)细胞壁主要成分多数为肽聚糖纤维素、几丁质等细胞器无有鞭毛结构如有,则细而简单如有,则粗而复杂鞭毛运动方式旋转马达式挥鞭式繁殖方式无性繁殖有性、无性等多种核膜无有组蛋白无有DNA含量高(约10%)低(约5%)核仁无有细胞核有丝分裂无有线粒体无有叶绿体无光合自养生物中有高尔基体无有核糖体70S80S(指细胞质核糖体)贮藏物PHB等细胞质间体部分有无第四节:真核细胞•一、基本结构•二、细胞大小•三、形态结构与功能第三章:细胞生物学研究方法(一)显微镜的类型电子显微镜使用电子束作光源的一类显微镜,以特殊的电极和磁极作为透镜代替玻璃透镜,能分辨相距0.2左右的物体放大倍数可80-120万倍光学显微镜以可见光作为光源,用玻璃制作透镜的显微镜.其有效放大倍数可达1250倍,最高分辨力为0.2微米.显微镜可分为光学显微镜和电子显微镜光学显微镜可分为单式显微镜和复式显微镜。单式显微镜结构简单,扩大的是方向一致的虚像。复式显微镜结构比较复杂,放大倍数较高,包括普通生物显微镜,暗视野显微镜,相差显微镜,荧光显微镜等。光学显微镜(二)显微镜的光学原理显微镜的光学系统中,有两组重要的透镜,一组是接物镜,一组是接目镜。这两组透镜虽然结构很复杂,但它们的作用都相当于一个凸透镜。凸镜的成像原理,也就是显微镜放大成像的光学原理。只不过是通过两次放大而已,其成像原理和光路图如图所示。被检物AB放在物镜下方的一倍焦距之间,则在物镜后方形成一个倒立得放大实像,这个实像正好位于目镜的下焦点之内,通过目镜后形成一个放大的虚像,这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛明视距处,即25cm,使所看到的物体最清晰,也就是虚像是在眼睛晶状体的两倍焦距之外,在眼球后的视网膜形成一个倒立的缩小像.(三)显微镜的构造显微镜的基本构造包括两大部分,光学系统和机械系统,机械系统有镜座、镜柱、镜壁、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦螺旋、聚光器调节螺旋。光学系统有物镜、目镜、反光镜、聚光器、虹彩光圈。(四)使用显微镜的主要步骤和方法1、低倍镜观察2、高倍镜的使用3、油镜的使用4、显微镜使用后整理3、油镜的使用(1)先从低倍油镜找到被检部分后,再换高倍镜调整焦点,然后再换用油浸镜头.(2)在换用油镜前在盖玻片上滴加一滴香柏油,在油镜观察标本时,用细调焦螺旋调节焦点。(3)油镜使用完毕,需立即擦净,擦拭方法是用棉棒或擦镜纸蘸少许清洁剂(乙醇或无水酒精的混合物,最好不用二甲苯,以免侵入镜头后使树胶溶化,透镜松散)4、显微镜使用后整理观察完毕升高镜筒取下玻片,再转动物镜转换器,使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧,罩上防尘罩。使用电子束作光源的年一类显微镜,以特殊的电极和磁极作为透镜代替玻璃透镜,能分辨相距0.2左右的物体放大倍数可80-120万倍。透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。扫描电镜是用极细的电子束在样品表面扫描,将产生的二次电子用特制的探测器收集,形成电信号运送到显像管,在荧光屏上显示物体。(细胞、组织)表面的立体构像,可摄制成照片。电子显微镜3细胞膜根据Fluid-mosaicmodel:•细胞膜由流动的双脂层和嵌在其中的蛋白质组成。•磷脂分子以疏水性尾部相对,极性头部朝向水相组成生物膜骨架;•蛋白质或嵌在双脂层表面,或嵌在其内部,或横跨整个双脂层,表现出分布的不对称性。细胞膜的功能:•为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;•选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排出;•提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息的跨膜传递;•为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;•介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接;•参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。4物质的跨膜运输①.脂溶性小分子物质可通过物理扩散透过质膜;②.水溶性小分子物质和带电离子需要借助于一系列相关膜蛋白的介导来完成转运;③.大分子物质和物质颗粒通过细胞膜的整装转运进出细胞;5内质网•rER:•sER:•ER的功能:•蛋白质的合成和修饰加工分泌蛋白和跨膜蛋白的合成蛋白质的加工新生肽的折叠•脂类的合成•脂蛋白的合成•糖类代谢•解读作用•储存和释放钙离子6高尔基体7细胞核8细胞连接

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