观赏凤梨组培快繁研究综述生物技术及应用

1江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）SNL/QR7.5.4-3观赏凤梨组培快繁研究综述专业生物工程系学生姓名何林静班级06生物技术及应用（生物制品）学号061402011指导教师宋刚完成日期2009年5月何林静：观赏凤梨组培快繁研究综述2成绩评议学号061402011姓名何林静题目观赏凤梨组培快繁研究综述指导教师建议成绩：评阅教师建议成绩：答辩小组建议成绩：院答辩委员会评阅意见及评定成绩：答辩委员会主任签字（盖章）：年月日附2：3毕业设计（论文）任务书姓名何林静学号061402011班级06生物技术及应用（生物制品）题目观赏凤梨组培快繁研究综述设计(论文)主要内容介绍了观赏凤梨及研其究快繁的意义，观赏凤梨组培快繁研究进展，重点介绍观赏凤梨的组织培养，并对目前研究中存在的问题及今后发展提出建义重点研究问题重点介绍观赏凤梨的组织培养及观赏凤梨组培快繁遇到的问题及解决的办法措施主要技术指标植物组织培养，快速繁殖技术其它要说明的问题指导老师意见指导教师签字：年月日何林静：观赏凤梨组培快繁研究综述4指导教师意见对论文的简短评价：1.指出论文存在的问题及错误2.对创造性工作评价3.建议成绩优良中及格不及格指导教师签字年月日评阅教师意见对论文的简短评价：1.指出论文存在的问题及错误2.对创造性工作评价3.建议成绩优良中及格不及格评阅教师签字年月日附4：5答辩小组评议意见学号061402011姓名何林静题目观赏凤梨组培快繁研究综述答辩小组意见：1、对论文的评价2.建议成绩等级优良中及格不及格3.需要说明的问题答辩小组长签字年月日何林静：观赏凤梨组培快繁研究综述6目录1．观赏凤梨组织培养研究进展……………………………………………………………11.1果子蔓属的组织培养…………………………………………………………………11.2丽穗凤梨属的组织培…………………………………………………………………21.3光萼荷属的组织培养……………………………………………………………………21.4凤梨属的组织培养……………………………………………………………………21.5彩叶凤梨属的组织培养………………………………………………………………21.6其它属的组织培养……………………………………………………………………32、观赏凤梨组培快繁的问题及解决措施………………………………………………32.1无菌系的建立关键是外植体的选择和消毒…………………………………………32.1.1，外植体的选择……………………………………………………………………32.1.2，外植体材料的消毒………………………………………………………………32.2褐化……………………………………………………………………………………43展望………………………………………………………………………………………4参考文献……………………………………………………………………………………5致谢…………………………………………………………………………………………6江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）1观赏凤梨组培快繁研究综述摘要：介绍了观赏凤梨及研其究快繁的意义，观赏凤梨组培快繁研究进展，重点介绍观赏凤梨的组织培养，并对目前研究中存在的问题及今后发展提出建议。关键字：观赏凤梨；组织培养；繁殖TheornamentalpineapplegroupcultivatestheUnlimitedCloningresearchdevelopmentsummaryAbstract：ThispaperdescribedtherecentadvancesonBromeliadsapplicationsandbasicresearches.Theresearchesontissueculture。SomeproblemsandperspectivesofthisfieldwerealsodiscussedKeywords:Bromeliad;tissueculture;micropropagation.凤梨科(Bromeliaceae)自然界大约有约68属2500余种,此外还有数千个杂交品种。属多年生草本植物。原产于南美洲热带地区,多数附生于热带丛林的岩石、树干、腐败枝叶上。观赏凤梨主要包括光萼荷属、果子蔓属、丽穗凤梨属、彩叶凤梨属等。其株型秀美,叶色光亮,花型奇特,花序颜色较为丰富,花期持久长达4～9个月,是极为理想的室内观赏植物,经济效益很高，市场前景广阔。但是种苗多从国外进口，价格昂贵；分株或播种繁殖系数有较低，速度慢，遗传性状不稳定，优良性状逐年退化、变劣，既不利于大面积生产，也远远不能满足市场的需求。解决上述的问题的办法就是采用组织快繁技术。1观赏凤梨组织培养研究进展早在20世纪70～80年代，已有研究用组织培养进行凤梨的无性快速繁殖。从20世纪90年代开始,国外观赏凤梨新品种开始进人我国花卉市场,90年代中后期,我国开始从国外进口观赏凤梨种苗进行栽培技术与花期调节和繁殖技术的研究。近年来，观赏凤梨组织培养的研究日渐深入，果子蔓属、丽穗凤梨属、光萼荷属、凤梨属、彩叶凤梨属等均已获得组培苗。1.1果子蔓属的组织培养远凌威等[3]用康泰凤梨(G.continental)侧芽作外植体，接种至MS+6-BA1.5mg/L(以下培养基单位同)培养基上，40d后形成愈伤组织，愈伤组织在MS+6-BA1.0+IBA0.5培养基上诱导丛生芽及继代增殖，40d继代一次,不定芽转入MS+IBA0.5+NAA0.5培养基，50d后平均根数达5.5。桂意云等[4]以擎天凤梨栽培种(G.lingulata‘Amaranth’)短缩茎作外植体，接种在MS+6-BA2.0+NAA0.1培养基上，25d后产生不定芽，转至MS+6-BA1.0+IBA0.1液体培养基上培养30d后，将约3cm的不定芽转入生根培养基MS+6-BA0.1+IBA3.0，20d左右即可长出根。郑淑萍等[5]以星花凤梨(G.spp.)短缩茎作外植体，以不加任何生长调节剂的MS为诱导培养基，以MS+6-BA3.0+NAA0.1为继代培养基，连续继代4次，平均增殖系数为5.0，以MS+IBA0.5+NAA0.5为生根培养基，15～20d即可生何林静：观赏凤梨组培快繁研究综述2根。1.2丽穗凤梨属的组织培养钟红梅等[6]切取八宝剑凤梨(V.poelmannii)母株基部长出的健壮侧芽作为外植体，接种于MS+6-BA2.0+NAA0.2培养基进行液体培养，50d后将新的丛生芽切成块，移至MS+6-BA1.0+NAA1.0培养基进行浅层液体培养，25d继代一次，最后移至1/2MS+NAA0.1～0.2固体培养基生根培养，1个月即可生根。张伟等[7]用虎纹凤梨(V.splanens)侧芽作外植体，接种于培养基MS+6-BA1.5上，40d后形成愈伤组织，转至MS+6-BA1.0+IBA0.5培养基上继代培养，在MS+IBA0.5+NAA0.5上进行生根培养，培养50d后平均根数为5.5。洪燕萍等[8]以八宝剑凤梨的幼株茎段为外植体，以MS+6-BA5.0+NAA0.5为诱导培养基，MS+6-BA1.0+NAA0.1为增殖培养基，可获得较好增殖效果，用1/2MS+NAA0.5生根效果较好。林思诚等[9]取八宝剑凤梨带腋芽茎段作为外植体，在1/2MS+6-BA5.0+NAA1.0培养基上培养43d可诱导出芽；在培养基1/2MS+6-BA1.0+NAA0.5上培养30d，芽的平均增殖倍数为7.4；在1/2MS+IBA1.0+1.0g/L活性炭的培养基上进行生根培养，30d生根率达100%。1.3光萼荷属的组织培养徐立等[10]取在温室培养的蜻蜓凤梨(Aechmeafasciata)短缩茎为外植体，经消毒后，接种在MS培养基上诱导侧芽萌发，在MS+6-BA4.0+NAA1.0+IAA1.0培养基上继代增殖，不定芽在MS+IBA0.1培养基上培养15d即开始生根。刘国民等[11]剥取蜻蜓凤梨盆栽植株的短缩茎作为外植体，在MS+6-BA2.5+NAA0.25培养基上进行初代培养，35d后将获得的无菌材料转至MS+6-BA2.5+NAA0.5培养基中增殖培养，3个月后转入MS+IBA1.0培养基上，180d后，平均根数为10.2。黎建玲等[12]用蜻蜓凤梨试管苗茎的中部作为外植体，在培养基MS+6-BA3.0+IBA0.3上诱导侧芽并进行增殖，最后转入生根培养基1/2MS+NAA0.5上，15d开始生根，40d后平均根数为3～5条。1.4凤梨属的组织培养王安美等[13]以金边艳凤梨（Ananascomosus‘Variegatus’）的无菌芽为外植体，接种至MS培养基，适当提高VB1含量，再附加NaP、AS和IAA、KT，25d左右可分化出丛生小芽，再以此培养基继代培养，以MS+NAA0.2为生根培养基，6d左右即开始生根。Teng[14]采用凤梨（Ananascomosus）的叶片及芽作为外植体，接种至1/2MS+6-BA1.0+NAA0.5~1.0诱导分化，将形成的愈伤组织转入1/2MS+6-BA0.12+NAA0.08，培养2周后达到最大的增殖倍数，继续在相同的培养基中进行生根培养，6周后得到大量生根苗。吴丽君等[15]建立了台农4号凤梨(Ananascomosus‘Tainong’No.4)的组培体系。1.5彩叶凤梨属的组织培养Carneiro等[16]取羞凤梨（Neoregeliacruenta）播种七周后的秧苗叶片作为外植体，直江苏农林职业技术学院毕业设计（论文）3接从叶片诱导出再生芽，在培养基MS+6-BA5.0+NAA0.5上获得最高的再生率，然后转入MS+6-BA1.0～2.0+NAA0.5培养基中获得完整植株。徐立等[17]切取彩叶凤梨（Neoregeliacarolinae）顶芽和侧芽茎尖，将已灭菌的茎尖接种到培养基MS+KT4.0+IAA0.1上，约半个月产生不定芽，经不断切分继代，获得大量丛生状不定芽，将3cm左右的不定芽转入生根培养基1/2MS+NAA0.5，10d后开始生根，生根率100%。洪燕萍等[8]也以彩叶凤梨的幼株茎段为外植体，以MS+6-BA5.0+NAA0.5为诱导培养基，MS+6-BA1.0+NAA0.1为增殖培养基，1/2MS+NAA0.5为生根培养基，均获得品质较好的组培苗。1.6其它属的组织培养王春荣等[18]以水塔花属红藻凤梨（Billbergiapyramidalis）的嫩吸芽作为外植体，以1/3MS+6-BA0.2+IBA0.02为诱导培养基，MS+6-BA1.0+IBA0.2为分化培养基，最后转入1/2MS+IBA0.5培养基上培养10d即开始生根。洪燕萍等[8]建立了姬凤梨属虎斑姬凤梨（Crytanthuszonatus）的组培体系。毕可鹏等[19]建立了铁兰属百剑凤梨（Tillandsiaflabellate）的组培体系。2、观赏凤梨组培快繁的问题及解决措施观赏凤梨的组培的起步较晚但是发展很快，我国已经跟上世界顶尖的水平。尽管如此我们在组培过程中还是存在一定的问题，是主要也是关键的几个问题，一是无菌系的建立，二是褐化现象。2.1无菌系的建立关键是外植体的选择和消毒。2.1.1，外植体的选择。观赏凤梨的老叶鞘、顶芽、侧芽、都可做为组织培养的外植体。何丽烂等人[21]已经研究出：老叶鞘诱导效果最好其次是侧芽和顶芽。从诱导丛生芽情况来看,效果最好的是侧芽,其次为顶芽和老叶鞘。关丽霞等人[20]，已经利用三种观赏凤梨的花蕾成功培养出幼苗，此途径进行观赏凤梨的离体快繁为凤梨科植物的组培研究提供了新的科学依据。2.1.2，外植体材料的消毒。外植体消毒是组培成功与否的第一关键步骤。凤梨叶片基生,呈莲花状紧密排列,叶鞘有蜡质层和绒毛,杀菌困难，为提高消毒效果,在处理外植体过程中要尽可能剥尽其基部叶片,但又不能伤及嫩茎组织,以免影响培养效果。其次选用合适的杀菌剂,是研究工作的第一关,一般采用了化学方法如0.1%的升汞(HgCl2)、次氯酸钙[Ca(ClO