预防09分子生物学习题集

分子生物学复习题第十九章分子生物学常用技术一、单选题1.“SourthernBlotting”指的是(A)将DNA转移到膜上，用DNA做探针杂交(B)将RNA转移到膜上，用DNA做探针杂交(C)将DNA转移到膜上，用蛋白质做探针杂交(D)将RNA转移到膜上，用RNA做探针杂交(E)将DNA转移到膜上，用RNA做探针杂交2.分子杂交试验不能用于(A)单链DNA分子之间的杂交(B)单链DNA与RNA分子之间的杂交(C)抗原与抗体分子之间的结合(D)双链DNA与RNA分子之间的杂交(E)RNA与RNA之间的杂交3.探针是经过什么标记的核酸分子(A)用放射性同位素标记(B)用生物素标记(C)用地高辛标记(D)A、B、C都对(E)用抗体标记4.下列哪一条在分子印渍技术中不适用(A)DNA向NC膜转移(B)蛋白质向PVDF膜转移(C)DNA向尼龙膜转移(D)RNA向NC膜转移(E)蛋白质向一号滤纸转移5.用于核酸杂交的探针至少应符合下列哪条(A)必须是双链DNA(B)必须是双链RNA(C)必须是单链DNA(D)必须是100bp以上的大分子DNA(E)必须是蛋白质6.核酸斑点杂交试验中可省略的步骤是(A)电泳(B)核酸样品固定于NC膜(C)杂交信号检测(D)标记探针E)制备样本核酸7.免疫印渍技术中不适合应用的步骤是(A)聚丙烯酸胺凝胶电泳(B)用NC膜或PVDF膜(C)靠毛细管作用进行转移(D)用同位素标记抗体(E)用非同位素标记抗体8.原位杂交是指(A)在NC膜上进行杂交操作(B)在组织切片或细胞涂片上进行杂交操作(C)直接将核酸点在NC膜上的杂交(D)在PVDF膜上进行杂交操作(E)在凝胶电泳中进行的杂交9.有关DNA链末端终止法的不正确说法是A)需要ddNMP(B)需要ddNTP(C)dNTP：ddNTP的比例要合适(D)需要放射性同位素或荧光染料(E)需要dNTP10.有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是(A)用荧光代替了同位素标记(B)激光扫描分析代替人工读序(C)基本原理与手工测序相同(D)不再需要引物(E)需要与手工序列分析相同的模板11.某种遗传性疾病是由一个点突变（无限制性内切酶位点变化）引起，可以(A)用DNA单链构象多态性分析突变(B)用限制性片段长度多态性分析突变C)用WesternBlotting分析突变(D)用电泳分析基因组DNA(E)用电泳分析细胞中的所有蛋白质12.免疫印渍技术指的是(A)结合在膜上的蛋白质分子与抗体分子结合B)结合在膜上的DNA分子与抗体结合(C)结合在膜上的RNA分子与抗体结合(D)结合在膜上的DNA分子与RNA分子结合(E)结合在膜上的免疫分子与DNA的结合13.同位素标记探针检测NC膜上的RNA分子(A)叫做NorthernBlotting(B)叫做SouthernBlotting(C)叫做WesternBlotting(D)蛋白分子杂交(E)免疫印渍杂交14.用做探针的DNA分子必须(A)在杂交前变性(B)在杂交前复性(C)长于30个核着酸(D)短于30个核着酸(E)是双链分子二、填空题1．只要DNA或RNA的单链分子之间存在着一定程度的__________，就可以在不同的分子间形成__________。2．利用__________使胶中的生物大分子或大分子的片段__________，可使之成为固相化分子。3．存在于NC膜上的生物分子可以放到杂交液中，与__________进行__________。4．Southernblotting主要用于__________的分析，也可以用于__________。5．Northernblotting主要用于检测__________的表达水平以及比较__________表达情况。6．蛋白质的印渍分析，也称为__________。7．目前DNA序列的手工测定或自动化测定所基于的技术原理一为__________，二为__________法。8．限制性片段长度多态性分析（RFLP）是利用__________DNA分子再经__________即可检测出突变DNA。9．基因转移技术包括__________水平的基因转移，而且可以进行__________水平的转移。10．在转基因技术中，被导人的目的基因称为__________，目的基因的受体动物称为__________。11．单链构象多态性分析（SSCP）的原理基于DNA单链具有__________特点，这种特点的形成取决于__________。12.就克隆一个基因（DNA片段）来说，最简单的质粒载体必须具备三个部分：、、。一个理想的质粒载体最好分子量。13.为了防止DNA的自身环化，可用脱去双链DNA。14.噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。15.受体细胞的感受态是______。人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA,__________时摄入DNA。16.A/Tcloning是利用Taq酶的性质。17.RNA干扰过程中三个重要组成元件是，，和。18.PCR扩增反应中一个循环的三个步骤依次是，，和。19.用于荧光定量PCR标记的Taqman水解探针是在PCR循环中的阶段中发光。20DNA芯片的原理为，蛋白质芯片的原理为。21.常规PCR技术是对PCR扩增反应的进行定性及定量分析；荧光定量PCR技术对PCR扩增反应中的产物进行定量分析。22.PCR反应体系中除了含有Mg2+的缓冲体系外，还要具备、和等四大要素。23.假定表达一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达载体的三个基本条件：(1)______(2)___________________(3)____________________________。24.较常用的定点诱变方法一般有两种即和。25.基因克隆时，应根据所要分离的外源基因的大小选择合适的载体，这些载体通常包含有λ噬菌体、YAC以及、和等。26.蛋白质双向电泳中的第一向和第二向分别是和27.噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。28.为了防止DNA的自身环化，可用脱去双链DNA。29.载体按照功能可分为载体和载体两类。三、名词解释题1．DNA印渍技术2．RNA印渍技术3．蛋白质印渍技术4．探针（probe）5．基因敲除6．限制性片段长度多态性分析（RFLP）7.DNA芯片8..RT-PCR9.CT值10.感受态细胞11.双向电泳12．单链多态构象分析（SSCP）13.定点诱变技术14.实时定量PCR15.SiRNA16.TaqMan探针17.DNA指纹图谱五、问答题1．核酸分子杂交的主要实验方法有哪些？主要用途是什么？2．基因转移和基因剔除技术在医学上可能有哪些用途？3．简述RFLP和SSCP检测基因突变的原理。4．简述DNA末端合成终止法测定DNA序列的原理？5.PCR的基本原理是什么?用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息?6.简述将一个基因从mRNA到克隆到表达载体的过程（列出所需关键的酶和注意点）？7.简述用RNAi技术减低目的基因表达水平的机理？8.酵母双杂交的原理是什么？9.引物是PCR反应体系的四大要素之一，PCR的许多应用都是通过引物设计来实现的，请问引物设计的一般原则是什么？10.何为α-互补？如何利用α-互补来筛选插入了外源DNA的重组质粒？11.何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程。第二十章基因重组与基因工程一．选择题1.F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为(A)转导(B)转化(C)转座(D)转染(E)接合2.通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型，称为(A)转化(B)转座(C)接合(D)转导(E)转染3.由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为(A)接合(B)转染(C)转导(D)转座(E)转化4.由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称(A)位点特异的重组(B)同源重组(C)随机重组(D)基本重组(E)人工重组5.限制性核酸内切酶切割DNA后产生(A)5’磷酸基和3’羟基基团的末端(B)5’磷酸基和3’磷酸基团的末端(C)5’羟基和3’羟基基团的末端(D)3’磷酸基和5’羟基基团的末端(E)以上都不是6.可识别并切割特异DNA序列的称(A)非限制性核酸外切酶(B)限制性核酸内切酶(C)限制性核酸外切酶(D)非限制性核酸内切酶(E)DNA酶（DNase）7.在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA(A)解链酶(B)聚合酶(C)连接酶(D)内切酶(E)拓扑酶8.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指(A)建立多克隆抗体(B)建立单克隆抗体(C)有性繁殖DNA(D)无性繁殖DNA(E)构建重组DNA分子9.在下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中不属于完全回纹结构的是(A)GGAATTCC(B)TGAATTCA(C)AGAATTCT(D)CGTTAAGC(E)AGATATCT10.无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是(A)卡那霉素抗性(B)青霉素抗性(C)自我复制能力(D)自我表达能力(E)自我转录能力11.在已知序列的情况下获得目的DNA最常用的是(A)筛选cDNA文库(B)筛选基因组文库(C)化学合成法(D)聚合酶链式反应(E)DNA合成仪合成12.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是(A)T病毒基因组DNA的一部分(B)细菌染色体外的独立遗传单位(C)细菌染色体DNA的一部分(D)真核细胞染色体外的独立遗传单位(E)真核细胞染色体DNA的一部分13.某限制性内切核酸酶按GGG▼CGCCC方式切割产生的末端突出部分含(A)l个核苷酸(B)2个核苷酸(C)3个核苷酸(D)4个核苷酸(E)5个核苷酸14.某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生(A)5’突出末端(B)5’或3’突出末端(C)5’及3’突出末端(D)3’突出末端(E)平末端15.直接针对目的DNA进行筛选的方法是(A)氨苄青霉素抗药性(B)青霉素抗药性(C)分子杂交(D)分子筛(E)电泳16.“克隆”某一目的DNA的过程不包括(A)重组DNA分子导人受体细胞(B)外源基因与载体的拼接(C)基因载体的选择与构建(D)筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞(E)表达目的基因编码的蛋白质17.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是(A)酵母表达体系(B)原核表达体系(C)E．coli表达体系(D)昆虫表达体系(E)哺乳类细胞表达体系18.不能用作克隆载体的DNA是(A)质粒DNA(B)噬菌体DNA(C)细菌基因组DNA(D)腺病毒DNA(E)逆转录病毒DNA19.克隆的基因组DNA可在多种系统表达，例外的是(A)E．coli表达体系(B)昆虫表达体系(C)酵母表达体系(D)哺乳动物细胞表达体系二、填空题1．通过自动获取或人为地供给外源_________，使细胞或培养的受体细胞获得新的_________，这就是转化作用。2．由_________和_________介导的基因移位或重排，称为转座。3．基因重组有两种类型，即_________和_________。6．一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，_________的选择与改造，_________的连接，重组DNA分子导人受体细胞，筛选出含感兴趣基因的重组DNA转化细胞。7．限制性核酸内切酶是一类识别_________的_________核酸酶。8．科学家感兴趣的外源基因又称_________，其来源有几种途径：化学合成，酶促合成cDNA，制备的基因组DNA及_________技术。9．外源DNA离开染色体是不能复制的。将_________与_________连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。10．根据采用的克隆载体性质不同，将重组DNA分子导人细菌的方法有_________、_________及感染。三、名词解释题1．质粒2．限制性内切酶3，载体4．DNA克隆5．目的基因6．cDNA文库7