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关爱生命呵护健康第八章血液及血液成分的制备和保存黄冈市中心医院肖华关爱生命呵护健康学习要求•1、血液及血液成分的种类有哪些？•2、全血的采集过程？•3、全血的特点和保存？•4、悬浮红细胞的制备和保存？•5、少白细胞红细胞的制备和保存？•6、洗涤红细胞的制备和保存？•7、血小板的制备和保存？•8、血浆的制备和保存？•9、冷沉淀的制备和保存？关爱生命呵护健康㈠血液常识－血液组成正常人血液容量与体重密切相关，一般为体重的8-9%，其中血浆占55-60%；血细胞占40-45%。血浆中绝大多数为水分，占91-92%，其中固体成分只占8-9%；固体成分中，主要是蛋白质，如白蛋白、球蛋白和各种凝血因子，其他为少量无机盐类和有机物质。血细胞则包括红细胞、白细胞和血小板。一·血液及血液制备的概述关爱生命呵护健康水（91﹪～92﹪）白蛋白血浆血浆蛋白球蛋白（50﹪～60﹪）纤维蛋白原溶质电解质：Na+、K+、Ca2+、Cl—、HCO3—等血液（8﹪～9﹪）气体激素其它有机物代谢终产物红细胞有机营养物血细胞白细胞（40﹪～50﹪）血小板水（91﹪～92﹪）白蛋白血浆血浆蛋白球蛋白（50﹪～60﹪）纤维蛋白原溶质电解质：Na+、K+、Ca2+、Cl—、HCO3—等血液（8﹪～9﹪）气体激素其它有机物代谢终产物红细胞有机营养物血细胞白细胞（40﹪～50﹪）血小板关爱生命呵护健康全血占体重8％50kg：4000ml血浆55-60%血细胞40－45％关爱生命呵护健康㈡血液成分制备将采出来的全血，用物理方法分离成体积小、纯度高、临床疗效好、不良反应少的单一血液成分的技术称为血液成分制备。如红细胞、血小板、血浆等的血液成分的制备。关爱生命呵护健康狭义的血液成分制备血细胞成分、新鲜冰冻血浆、冷沉淀等广义的血液成分制备血浆衍生物（plasmaderivatives)血浆蛋白制品或血液制品白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子浓缩物等关爱生命呵护健康㈢成分输血是现代输血医学发展的重要里程碑关爱生命呵护健康二、全血的制备和保存㈠全血制备全血：将一定量的血液采集到含有保养液的采血袋所制成的血液制剂。即包括血细胞和血浆的所有成分。国际上一般以450毫升全血为1单位，★我国则以200毫升为1单位关爱生命呵护健康全血采集采集前采集中采集后场所工作人员采血器材献血员静脉选择消毒穿刺采集采集结束注意事项致谢留标本标识热合血液保存标本处理及保存献血现场整理关爱生命呵护健康穿刺部位的选择应选择无损伤、炎症、皮疹、皮癣、疤痕的皮肤区域为穿刺部位。上肢肘部清晰可见、粗大、充盈饱满、弹性好、较固定、不易滑动的静脉；☆常选择的静脉主要有肘正中静脉、贵要静脉等；关爱生命呵护健康穿刺部位消毒用无菌棉拭蘸取适量使用浓度消毒剂，以穿刺点为中心，自内向外螺旋式旋转涂拭，消毒面积不小于6cm×8cm。作用1～3min。宜消毒2～3遍。不应触摸已消毒的皮肤，不应靠近已消毒的皮肤讲话。关爱生命呵护健康热合⑴分段热合血袋导管，以供交叉配血、血型复查和血液标本保存使用。血袋应保留注满全血的导管至少20cm。⑵在热合过程中不应用力牵拉或扭转导管，待焊极松开1～2秒后方可取出已封口的导⑶应检查热合部位，如有渗漏，则重新热合，并评估对血液无菌性的影响。⑷热合分离针头，将其放置在利器盒内。关爱生命呵护健康献血后注意事项的告知1应当印制献血后注意事项，并将其发给每位献血者。2献血后注意事项主要有：1）穿刺点上的敷料应保留至少4小时；2）多补充水分，食用易消化的食物和水果，避免饮酒，保证充足的睡眠；3）献血后24小时内不剧烈运动、高空作业和过度疲劳；4）工作人员的联系方式，如果存在献血前没有如实告知的可能影响血液安全的高危行为，或者献血后感觉明显不适或异常，请其及时联系工作人员。关爱生命呵护健康血液保存全血采集后应尽快在合适的温度下保存血站内采血，血液应及时储存至4±2℃在采血车或采血屋，采出的血液要按一定条件进行储存和运输。一般情况下，在采血后2小时内，应将血液快速冷却到22±2℃，并在此条件运输。库存血发往临床用血等处。温度应在2~10℃最长运输时间不应超过24小时关爱生命呵护健康㈡全血的保存⒈血液保存需要解决的问题需解决的问题血液凝固红细胞溶血放氧能力下降抗凝剂•红细胞营养代谢•抗溶血剂•改善放氧•保存容器关爱生命呵护健康⑴血液抗凝剂枸橼酸钠肝素EDTA·2Na原理Ca抗凝血酶ⅢCa应用实验室检测血液标本的抗凝及外科体外循环手术的抗凝实验室检测血液标本的抗凝全血及血液成分保存的抗凝剂关爱生命呵护健康葡萄糖的在血液中浓度应为0.5%~l%，以0.5%为宜葡萄糖用于维持红细胞代谢，氧化功能，延长红细胞的保存时间。枸橼酸可防止高压灭菌葡萄糖的氧化反应⑵提供红细胞的能量代谢葡萄糖枸橼酸+枸橼酸钠+葡萄糖关爱生命呵护健康提高ATP水平和活性的另一办法就是在保存液中加入少量腺嘌呤，可以促进ATP的生物合成，有利于红细胞活性的维持。腺嘌呤磷酸腺苷（AMP）磷酸化ATP⑶提供红细胞的能量代谢--腺嘌呤关爱生命呵护健康目前国际上使用较多的是甘露醇，它的用量很小，一般在1％以下。蔗糖山梨醇甘露醇具有缓解红细胞溶血的功能和加固细胞膜的作用，而不影响红细胞代谢⑷抗溶血剂关爱生命呵护健康血液保存液ACD保养液（枸櫞酸盐-葡萄糖-枸橼酸）pH5.0321天CPD保养液（枸櫞酸盐-葡萄糖-枸橼酸-磷酸盐）pH5.6321天CPDA保养液(枸櫞酸盐-葡萄糖-枸橼酸-磷酸盐-腺嘌呤)pH5.6335天加入磷酸盐加入腺嘌呤可提高PH使2,3-DPG下降速度减慢可以促进ATP的合成，利于红细胞活性的维持关爱生命呵护健康表1各种血液保存液配方成分关爱生命呵护健康全血保存温度控制在4℃±2℃保存液CPDCPDA-11.血小板4℃保存24小时丧失50%活性,保存48小时更为显著，72小时虽形态正常但已失去止血功能;2.中性粒细胞4℃保存4--8小时丧失大部分功能,24小时丧失全部功能;3.Ⅷ因子4℃保存24小时活性丧失50%。因子Ⅴ保存3天丧失活性可达50%全血并不全，因此国内外把全血作为制备各种血液成分的原料。⒉全血的保存特点关爱生命呵护健康三、血液成分的分离制备㈠原理血液成分制备的原则是采用手工或血细胞分离机方法将全血中的各种血液成分制备成体积小，浓度高，纯度好的统一规格的有效治疗成分。关爱生命呵护健康人体血液经过抗凝处理后称为全血，全血离心后主要分为三层，自上而下依次为血浆层、白膜层和红细胞层。血浆层主要包含血浆、水、蛋白质、盐类和各种离子等；白膜层主要包括富含血小板区、富含淋巴细胞区、富含单核细胞区和富含粒细胞区，这些有形细胞比重接近，因此聚集在白膜层；红细胞层可简单分为年轻红细胞和正常红细胞，由于二者处于红细胞的不同生长时期，因此比重略有差别。关爱生命呵护健康根据全血离心后分层的原理，利用各种血液成分相对密度、体积等不同，通过离心、过滤的方法可以将各层中不同的血液成分分离、制备成成分血，这样就可以合理利用血液资源，满足患者对不同成分血的需求，提高治疗效果。关爱生命呵护健康成分相对密度红细胞1.090~1.111粒细胞1.080~1.095淋巴细胞1.050~1.078血小板1.030~1.060血浆1.025~1.030关爱生命呵护健康㈡手工法制备手工法制备血液成分主要是用单袋或多联袋采集血液，置于大容量冷冻离心机内离心，在无菌条件下进行分浆，获得不同的成分。关爱生命呵护健康不同的血液成分离心时，要通过相对离心力（g)和离心机半径（cm）（从离心机中轴点到离心筒内底部的距离）换算出每分钟离心转数。离心机的每分钟转数，离心时间直接影响各种成分的分离效果，必须定期给与校正。关爱生命呵护健康关爱生命呵护健康关爱生命呵护健康1.应用塑料联袋采集血液，使血液成分可以在密闭无菌的条件下进行分离。血袋依照用途不同，可分为单联袋、二联袋、三联袋、四联袋以及双二联袋等。这些是用三通管并联起来，其规格分为采血200-400ml不等。另一种是上下串联起来的多联袋，称为底-顶式血袋。在我国很少使用。关爱生命呵护健康2.根据血液成分的不同比重，选择不同的相对离心力进行离心，分离出不同的成分最早的持续性离心装置是在1877年瑞典医生Carl研究的手柄式乳烙分离器，1881年在美国获得专利。后来，运用这种原理制造的离心机用于石油工业清除不纯的润滑油中的颗粒；在核燃料工业中处理铀同位素中的固体和液体废物。1950年美国科学家Cohn在哈佛大学首先发明了持续性血液分离机分离血液成分。这些装置都是根据不同成分的密度来设置的。关爱生命呵护健康3.血液成分手工制备的注意事项★制备新鲜冰冻血浆时，保养液为CPDCP2DCPDA-1的血液应该在8小时之内分离并速冻★保养液为ACD的血液应在6小时之内分离并速冻关爱生命呵护健康第二节红细胞的制备和保存红细胞制剂是由全血去除部分血浆制备而成。从200ML全血制备的各种红细胞制品为1U关爱生命呵护健康一、浓缩红细胞㈠概念浓缩红细胞也称为压积红细胞或少浆血，是将采集的全血大部分的血浆在全封闭的条件下分离后剩余的部分所制成的红细胞成分血。可以在全血有效保存期内任何时间分离出部分血浆制备而成，一般用二联袋采集的全血制备浓缩红细胞关爱生命呵护健康㈡制备（1）用二联袋采集1单位或2单位全血于主袋内；（2）将全血在4℃±2℃离心，离心3400×g,离心7分钟，沉淀红细胞；（3）取出离心后全血，将部分血浆分入空的转移袋内；（4）用热合机切断塑料袋间的连接管，制备成浓缩红细胞。关爱生命呵护健康关爱生命呵护健康㈢浓缩红细胞的保存保存在4℃±2℃保存液CPDACD-B保存期21天CPDA-1保存液为35天关爱生命呵护健康二、悬浮红细胞㈠概念悬浮红细胞又称添加剂红细胞，将全血中的大部分（90%）血浆在全封闭的条件下分离后并向剩余物中加入红细胞添加液制成的红细胞成分关爱生命呵护健康㈡制备⒈单袋制备法用单个塑料袋采集血液，离心后在无菌条件下与空塑料袋相连接，把上层血浆分离移入空袋，将等量的保存液加入红细胞内充分混匀。单袋制备方法要求严格的制备环境，整体环境达万级净化，局部操作空间达百级净化。关爱生命呵护健康⒉联袋制备法全血采集于多联袋的主袋内，与抗凝剂充分混匀后，在6～8小时内制备。1）采血后的多联袋在大容量冷冻离心机内离心，离心力一般为3400×g，温度控制在4℃±2℃，离心7分钟；2）轻轻取出离心后的血袋悬挂于分离支架上或放于分浆夹内，将上层不含血细胞的血浆分入空的转移袋内。注意不可把血细胞分入血浆中；3）把多联袋末袋中的保存液加入主袋浓缩红细胞内，使红细胞与保养液充分混匀，血细胞比容为0.50-0.65；4）用高频热合机切断塑料袋间的连接管，封闭红细胞袋上的所有管道，制成悬浮红细胞。关爱生命呵护健康㈢保存⒈保存在4℃±2℃保存液⒉红细胞添加液SAG(生理盐水-腺嘌呤-葡萄糖)SAGM(生理盐水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇）MAP(甘露醇-腺嘌呤-磷酸盐)可保存35天AS-1AS-3AS-5可保存42天关爱生命呵护健康三、少白细胞的红细胞㈠概念浓缩少白细胞红细胞悬浮少白细胞红细胞关爱生命呵护健康白细胞与输血反应的相关性经研究证实，大多数患者，因输血或受孕，体内产生白细胞抗体，这些抗体大部分属于人类白细胞抗原（HLA)系统的同种抗体，当再度输入含有白细胞的全血或其他血液成分时，有可能产生免疫性发热反应等输血副作用关爱生命呵护健康血制品中白细胞数量与输血副作用的相关性关爱生命呵护健康㈡制备方法从全血和浓缩红细胞内去除白细胞的方法很多，其效果依据方法不同而异关爱生命呵护健康表4去除红细胞中白细胞的方法关爱生命呵护健康⒈离心白膜法简单、经济，易于操作。将全血采集于三联袋主袋内，分离出上层血浆至末袋内，然后挤白膜层和白膜层下1-1.5cm的红细胞至空转移袋内，白膜层及白膜层下含有大部分白细胞、血小板和部分红细胞。为了提高白细胞去除率，可将末袋的血浆注入主袋，重复离心，最后可制成少白细胞的红细胞关爱生命呵护健康⒉滤器过滤法由于高分子工业的发展，促进了输血器材的改革，各种不同功能的