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1专题5DNA和蛋白质技术(时间∶90分钟满分∶100分)一、选择题(本题包括20小题，每小题2.5分，共50分)1．在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是()A．不易破碎B．减少DNA的损失C．增加DNA的含量D．容易刷洗2．在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要用蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂处理除去蛋白质，用蛋白水解酶处理血样的目的是()A．除去血浆中的蛋白质B．除去染色体上的蛋白质C．除去血细胞表面的蛋白质D．除去血细胞中的所有蛋白质，使DNA释放后提纯3．向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入蒸馏水会使()A．DNA的溶解度下降B．DNA的溶解度上升C．蛋白质的溶解度下降D．使DNA和蛋白质充分溶解4．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是()A．防止血红蛋白被氧化B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能5．向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是()A．减少、减少B．增大、增大C．先减小后增大、增大D．减小、增大6．PCR操作过程中，对于温度的控制，应当控制在()A．37℃B．室温C．80℃D．先为95℃，然后降至55℃，最后调至72℃7．下列关于DNA的粗提取和鉴定的有关说法，正确的是()A．DNA在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠溶液浓度的增大而增大B．溶有DNA的NaCl溶液中加入4mL二苯胺试剂即变蓝色C．DNA粗提取和鉴定时，选材最好用鸡血而不用猪血D．提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，食盐有利于DNA从细胞中释放出来8．有关PCR技术，下列叙述不正确的是()A．多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术2B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C．PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸9．下列关于凝胶色谱法的原理及操作的叙述，不正确的是()A．是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B．在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部流速缓慢，最后流出C．凝胶内部有很多微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D．一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来10．使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂()①蒸馏水②生理盐水③20mmol/L的磷酸缓冲液④清水⑤柠檬酸钠A．①③⑤B．①②③C．②①③D．④①③11．用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸，是一小段()A．DNAB．RNAC．单链DNA或RNAD．双链DNA12．关于PCR引物的说法中，不正确的是()A．引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补，并能引导模板DNA的互补链合成的(脱氧)核苷酸序列B．引物常根据需要扩增的目标DNA的碱基序列用化学合成的方法获得C．DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端开始向引物的5′端延伸D．引物的3′端必须具有游离的－OH基团13．将释放出的血红蛋白以2000r/min的速度离心10min后，可以看到试管中的溶液分为4层，其中哪一层是血红蛋白的水溶液()A．第一层无色透明B．第二层白色C．第三层红色透明D．第四层暗红色14．取1mL血红蛋白溶液装入透析袋中进行透析，相关说法不正确的是()A．透析液为300mL20mmol/L的磷酸缓冲液B．透析时间至少为1～2h，时间过长血红蛋白也会渗漏出去C．除去了相对分子质量较小的杂质，实现了样品的粗分离D．透析也可用于更换样品的缓冲液15．下列操作正确的是()A．分离红细胞时采用低速长时间离心B．红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水即可C．分离血红蛋白溶液要低速短时间离心D．透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液，透析12h16．将人红细胞置于盛有下列液体的离心管中，10分钟后离心，得到沉淀物和上清液，则上清液中K3＋含量最高的离心管内盛有()A．10%的氯化钠溶液B．20%的蔗糖溶液C．0.9%的氯化钠溶液D．蒸馏水17．血红蛋白释放时，红细胞膜破裂的原因不包括()A．红细胞吸水膨胀B．磁力搅拌器的充分搅拌C．血红蛋白的变性D．甲苯对细胞膜的溶解18．符合PCR反应条件的一项是()①稳定的缓冲液环境②DNA模板③合成引物④四种脱氧核苷酸⑤DNA聚合酶⑥DNA解旋酶⑦限制酶⑧温控设备A．①②③④⑤⑥B．①②③④⑤⑥⑦⑧C．③④⑤⑥⑦⑧D．①②③④⑤⑧19．下列操作中，对DNA的提取量影响较大的是()①使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质②搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动③在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增多④在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却⑤在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌A．①②④⑤B．①②③④C．①③④⑤D．②③④⑤20．若从植物细胞中提取DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，其可能的原因是()①植物细胞中DNA含量低②研磨不充分③过滤不充分④95%冷酒精的量过多A．①②B．③④C．①④D．②③二、简答题(本题共4小题，共50分)21．(16分)PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种TaqDNA聚合酶。请回答有关问题：(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用____________________。(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②TaqDNA聚合酶的功能是__________________________________________________________________________________________________________________________。③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用________法和__________法进行分离。(3)相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是_________________________________4________________________________________________________________________、________________________________________________________________________。②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在____________________________中才能进行，并且要严格控制____________条件。(5)PCR中加入的引物有____________种，加入引物的作用是______________________。22．(10分)下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入(图Ⅰ)和洗脱(图Ⅱ)示意图。请据图回答下列问题：(1)在加样品示意图中，正确的顺序是_________________________________________________________________。(2)用吸管加样品时，应注意正确操作，分别是：①__________________；②__________________；③________________。(3)等样品______________________后，加入缓冲溶液。待______________________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每________mL收集一管，连续收集。23．(12分)如图为一种核酸分析方法，请据图分析回答有关问题：5(1)被分析的材料应属于一条________链。如果它存在另一条互补链，该互补链的碱基序列是(在下图中标出)：(2)如果选择性断开的位置是碱基G，那么随机出现的被标记片段应有________种，在电泳带上被分离的显示位置应有________处，在泳动方向的最前端的片段是________序列段，与图示泳动位置相比，在同样电泳条件下该片段应位于①的________(填“上方”或“下方”)。(3)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链，结果如图所示，此结果说明，该核酸的此单链含______个核苷酸，其A∶T∶G∶C＝______，同时也可推断其碱基序列是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。24．(12分)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血作实验材料。请据图回答问题：(1)鸡血细胞中红细胞含________，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中________细胞数目较多，可以提供丰富的________。(2)实验前由老师制备血细胞液供同学们作实验材料，而不用鸡全血，主要原因是________________________________________________________________________6________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是________________，这是因为这些动物和人类一样，成熟的红细胞中__________________，但若改用动物肝脏作实验材料，实验能顺利进行，这是因为________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若选用动物肝脏作实验材料，在提取之前，最好增加________程序，使组织细胞更易分离。专题5DNA和蛋白质技术1．B2.A3.A4．D[利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察(红色)和研究(活性)。]5．C[DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度大于或小于此浓度时溶解度都较高。而DNA溶解度低时，蛋白质的溶解度却较高。]6．D[利用PCR技术体