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2013级秋季微生物学检验复习大纲名词解释：1.生长曲线:将一定数量的活菌接种于适宜的培养基中，置于适宜环境培养，以培养时间为横坐标，活菌数的对数为纵坐标，可得出一条反映细菌生长繁殖规律的曲线，称生长曲线。2.接合：供体菌通过性菌毛将质粒或部分染色体基因转移至受体菌的过程称为接合。3.肠道杆菌：（肠杆菌科）栖居在人和动物肠道内的一大群形态、生物学性状相似的G-无芽孢杆菌，需氧或兼性厌氧，多数为人肠道的正常菌群，氧化酶：-，O/F为F型，硝酸盐试验：+。4.非发酵菌：非发酵菌是一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧，无芽孢的革兰阴性杆菌。5敏感S：指所分离菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制6耐药R：指分离菌株不被测试药物使用常规剂量可达到的药物浓度所抑制和或证明分离菌株存在某些特定的耐药机制，或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠7中介I：指抗菌药物在生理浓集的部位具有临床效果，还代表敏感与耐药之间的缓冲区，以避免微小的、不能控制的技术因素造成重大的结果解释错误8.ESBLs：产超广谱β-内酰胺酶，是由普通质粒编码的β-内酰胺酶突变而来，或与天然的β-内酰胺酶有较远的关系，能水解青霉素、广谱头孢菌素和单环类抗生素，主要由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌等肠杆菌科细菌产生。9.MRSA：指耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，具有耐受甲氧西林的能力。10.PBP（PBPS)：青霉素结合蛋白,是存在于某些细菌表面的一组蛋白质，是细菌的常见的结构之一，能够和青霉素特异性结合，使青霉素具有完全的抗原性,是β-内酰胺类抗生素的主要作用靶位。11.有菌免疫：人的免疫力随结核分支杆菌或BCG或其成分在体内存在而存在,被称为有菌免疫或感染免疫，一旦体内结核分支杆菌或BCG或其成分全部消失，免疫力也随之消失12.真菌：是一类真核细胞型微生物，具有典型的细胞核，胞浆内有完整的细胞器，不含叶绿素，没有根茎叶的分化，以寄生或腐生方式生存，能进行有性繁殖和（或）无性繁殖。13.假菌丝：类酵母菌进行出芽生殖时，芽管延长不与母细胞分离而以狭小的面积相连，则称这种藕节状的细胞串为假菌丝14.病毒：是一类非细胞型微生物，体积微小、结构简单，由核酸和蛋白质构成，只含有一种类型核酸，必须在活细胞内寄生，并以复制方式繁殖，对抗菌药物不敏感，对干扰素敏感，抵抗力特殊。15.二相性真菌：一些真菌可因寄生环境及培养条件（营养、温度、氧气等）的不同而交替形成两种形态即单细胞的酵母型和霉菌型，这类真菌有双向性，所以称之为双态真菌或二相性真菌。16.核衣壳：病毒蛋白质衣壳和衣壳中心包含的病毒核酸的合称。18.Dane颗粒：乙型肝炎病毒大球形颗粒又称Dane颗粒，具有感染性的完整的HBV颗粒，呈球形，具有双层衣壳。血清中检出dane颗粒是肝内病毒活跃复制的标志。19.IMVC：靛基质（吲哚、I）实验、甲基红（MR）实验、伏-普（VP）实验、枸橼酸盐利用（C）试验的合称缩写，常用于鉴定肠道杆菌。主要用于鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌20.KIA：即克氏双糖铁半固体斜面培养基，可检查4种反应即葡萄糖、乳糖的发酵反应，是否产生H2S，是否产气等21.MIU：动力靛基质尿素酶试验培养基，将半固体观察动力、靛基质试验和尿素酶试验综合到一起。22.溶原性转换：是噬菌体的DNA与细菌染色体重组，使宿主菌遗传物质发生改变而引起的变异，溶源性细菌可获得新的特性23.D试验：克林霉素诱导耐药试验，检测对大环内酯耐药的葡萄球菌是否对克林霉素有诱导性耐药。24.肥达试验：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，以及甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌的H抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验，能辅助诊断伤寒、副伤寒A、B和C引起的伤寒。25.Vi抗原（表面抗原）：为沙门菌属不耐热的多糖抗原，由黏液或荚膜多糖的结构决定表面抗原的特异性，表面抗原存在时可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能消除表面抗原的阻断作用。简答题：1、革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的区别细胞壁结构革兰阳性菌革兰阴性菌胞壁厚度厚，20-80mm薄，10-15mm机械强度强，较坚韧弱，较疏松肽聚糖成分聚糖骨架，四肽侧链，五肽交联桥聚糖骨架，四肽侧链肽聚糖层数多，可达50层少，1-3层肽聚糖含量多，占细胞干重的50-80％少，占细胞干重的5-20％磷壁酸有无外膜层无有脂质含量低，1-4％多，11-28％2、革兰染色原理、步骤及影响因素革兰染色原理：（阳性：紫色；阴性：红色）⑴通透性学说：主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有较多类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，溶解了类脂质，增加了细胞的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞脱色，经复染后，染上复染液(复红)的颜色；而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，酒精不易进入菌体脱色，故细胞仍保留初染液(结晶紫)的颜色。⑵化学学说：G+菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的菌体不易脱色。⑶等电点说：G+菌等电点低于G-菌，G+菌带负电荷比G-菌要多，G+菌易与带正电荷的碱性染料（结晶紫）结合牢固，因而不易脱色。革兰氏染色的步骤（方法）如下：初染、媒染、脱色、复染影响因素：1.涂片太厚：可能会使革兰阴性菌也出现紫色，误认为革兰阳性菌。2.脱色时间：阳性菌透性小，不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色；如果延长脱色时间，会使革兰阳性菌染上的结晶紫脱去颜色，最后染上复红的颜色，变成革兰阴性菌。而脱色时间太短的话又会使阴性菌染上的结晶紫不能完全脱色，出现紫色，误认为革兰阳性菌。3.固定方法：如果玻片在火焰上烤的太久、温度过高，改变了细菌原有的通透性，会使细菌的染色性发生变化。影响了染色的结果。4.细菌培养时间：如果细菌培养时间太长，变成了老龄菌，可能会使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。5.染液因素：如果碘液放置时间太长，或经日光照射失效，失去媒染剂的作用，就可能使结晶紫与细菌结合的不牢固，容易被脱色，使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。6.水洗：水流过大可能会使菌膜被冲掉。3、抗酸染色步骤及结果1.涂片2.初染：滴加石炭酸复红染液覆盖涂膜，于玻片下方微火加热至出现蒸汽（期间及时补充染液）持续5min，冷却后水洗3.脱色：加3%盐酸酒精脱色至无红色染液脱下为止，水洗4.复染：加吕氏美蓝染液复染0.5min后水洗5.待干镜检结果：油镜下观察，淡蓝色背景下呈红色细长或带弯曲的杆菌为抗酸染色阳性菌，其他细菌和细胞呈蓝色。5.MRSA的检测方法1.苯唑西林琼脂筛选试验：用MH琼脂平板加6微克每毫升的苯唑西林再加百分之4的氯化钠用1微升环取0.5麦氏比浊的菌悬液涂成直径10-15mm斑点，或棉拭子点钟、画线，然后培养结果判读：有菌落生长：耐药无菌落生长：敏感2.纸片法或稀释法：用MRSA是指用1微克的苯唑西林，抑菌圈直径≦10mm或30微克的头孢西丁的抑菌圈直径≦21或苯唑西林MIC≧4微克每毫升或头孢西丁MIC≧8微克每毫升的MIC法来检测6.金黄色葡萄球菌、A群链球菌、B群链球菌的鉴定依据。金黄色葡萄球菌：革兰阳性球菌触酶试验阳性凝固酶试验阳性耐热核酸酶试验阳性（粉红色）新生霉素抵抗试验敏感（阴性）A群链球菌：革兰阳性球菌触酶试验阴性杆菌肽敏感试验阳性B群链球菌：革兰阳性球菌触酶试验阴性CAMP试验阳性马尿酸钠水解试验阳性D群链球菌：革兰阳性球菌触酶试验阴性胆汁七叶苷试验阳性6.5%氯化钠肉汤生长阴性7.肺炎链球菌的致病因素及鉴定要点是什么？致病因素：致病物质有荚膜，肺炎链球菌溶素O，脂磷壁酸和神经氨酸酶等鉴定要点：革兰阳性球菌，G+c、矛头状、成双排列、有荚膜，血平板上因产生自溶酶而使菌落呈现脐窝状，optochin试验阳性，胆汁溶菌酶试验阳性，荚膜肿胀试验阳性，分解菊糖。8.不动杆菌属主要特征：生物学特性：革兰阴性球杆菌，常呈双排列。无芽孢、无鞭毛、专性需氧，血平板上呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐、灰白色菌落，溶血不动杆菌可形成β溶血。MAC平板上形成无色或粉红色（氧化乳糖）菌落，部分菌株呈粘液状。生化鉴定：氧化酶阴性、O/F试验为氧化型或产碱型、无动力。9.铜绿假单胞菌的主要生物学特性1.革兰阴性杆菌、菌体直或微弯、无芽孢、无荚膜、有单鞭毛，运动活泼。2.普通平板上形成的菌落扁平湿润、大小不一、边缘不整齐、常呈融合状生长，培养基被染成蓝绿色或黄绿色；血平板上有生姜样气味、扁平湿润、有金属光泽的菌落，常呈β溶血。3.抵抗力强，天然抵抗多种抗生素及消毒剂——多重耐药10.不发酵革兰阴性杆菌的共同特点是什么？试例举出3个临床常见菌属共同特点：不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖、需氧或兼性需氧、无芽孢、革兰阴性杆菌。常见均属：假单胞菌属、不动杆菌属、窄食单胞菌属、军团菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、金黄杆菌属等。11.写出沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属在KIA、MIU培养基上的生化结果。细菌KIAMIU鉴别要点埃希菌属AA+-++-在MAC和SS平板上分解乳糖产生粉红色菌落，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性沙门菌属KA+++--产生硫化氢，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性志贺菌属KA----/+-动力阴性，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性变形菌属KA+++-/++苯丙氨酸脱羧阳性，动力阳性，迁徙生长现象，脲酶阳性12.沙门菌、变形杆菌、志贺菌、埃希菌初步生化结果的相同与不同点，肠道杆菌中需要进行血清学鉴定的主要有哪些？沙门菌、变形杆菌、志贺菌、埃希菌初步生化结果的相同点：氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阳性，革兰染色阴性的短杆菌细菌KIAMIU鉴别要点埃希菌属AA+-++-在MAC和SS平板上分解乳糖产生粉红色菌落，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性沙门菌属KA+++--产生硫化氢，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性志贺菌属KA----/+-动力阴性，苯丙氨酸脱羧阴性、VP试验阴性变形菌属KA+++-/++苯丙氨酸脱羧阳性，动力阳性，迁徙生长现象，脲酶阳性埃希菌属，沙门菌属，志贺菌属，耶尔森菌属需要进行血清学鉴定13.革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的检验程序及方法。14.霍乱弧菌的主要生物学特性、致病物质及常用培养基一、生物学特性1、形态染色：G-弧菌，单鞭毛，穿梭样动力，鱼群状排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞。2、培养特性：兼性厌氧，氧气充分生长良好。营养要求不高，耐碱不耐酸（pH7.4-9.6），故用pH8-9碱性培养基，形成光滑透明湿润的“水滴样”菌落，分离（选择）能在无盐培养基中生长（区别其它弧菌）。3、生化反应：触酶（+）、氧化酶（+），硝酸盐还原（+），靛基质（+）（其他见书P230）4、抗原分型：根据0抗原的不同，有155个血清群，其中O1群、O139群可引起霍乱，其余不致病或仅引起胃肠炎等，O1群包括两个血清型：古典生物型和埃尔托生物型（E1-Tor）。5、抵抗力：较弱，干燥时易死亡，水环境中可存活两周（水源性传播，水性爆发）；怕酸——正常胃酸4min；不耐热——100℃，1-2min；对消毒剂敏感，可用漂白粉处理病人的排泄物或呕吐物。二、致病物质：①霍乱肠毒素——最强烈的致泻毒素②菌毛：使细菌定植于小肠③鞭毛：鞭毛运动有利于细菌穿过黏膜表面黏液④粘液素酶常用培养基：TCBS培养基15.小结：霍乱弧菌、沙门菌、金葡、结核杆菌、病原性真菌的选择性培养基/基础培养基碱性蛋白胨水培养基、SS、高盐胆固醇琼脂平板、罗氏固体培养基、沙保氏培养基16.小结使用酚红、中性红、BTB、溴甲酚紫为指示剂的细菌常用培养基。酚红：尿素酶培养基、KIA、高盐胆固醇琼脂、三糖铁、中性红：SS、MACBTB：枸橼酸盐、TCBS、O/F溴甲酚紫：糖发酵、氨基酸脱羧酶培养基17.以下细菌的主要生化鉴别试验：链球菌属与葡萄球菌：触酶试验（葡萄球菌属阳性；链球菌属阴性）D群链球菌与肠球菌：65g/L（6.5%）NaCL生长试验（肠球菌生长试验阳性；链球菌生长试验阴