2013年642生物化学满分150分四、名词解释(本大题共6小题:每题5分,共计30分)1、IsoelectricPoint:等电点,使分子处于兼性分子状态,在电场中不迁移的pH值。2、透析:通过小分子经过半透膜扩散到水或缓冲液的原理,将小分子和生物大分子分开的一种分离纯化技术。3、蛋白质四级结构:指多亚基蛋白质的三维结构,实际上是具有三级结构的多肽以适当的方式聚合所呈现的三维结构。4、Chargaff`srules:夏格夫法则,所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等,鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔含量相等。DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性,另外,生长,发育状态,营养状态及环境改变都不影响DNA的碱基组成。5退火(annealing):即DNA由单链复性变成双链的过程。6、限制酶图谱(restrictionmap):同一DNA用不同的限制酶进行切割,从而获得各种限制酶的切割位点,由此建立的位点图谱有助于对DNA的结构进行分析。五、问答题(本大题共6小题,每题10分,共计60分)1、DNA热变形有何特点?Tm值表示什么?DNA热变性时候,核酸双螺旋区的氢键断裂变成单链,不涉及共价键的断裂。Tm表示:DNA变性时,为DNA双螺旋结构失去一半时的温度。2、什么是酶的专一性?酶的专一性分为几类?请举例说明。酶的专一性:酶对催化的底物有高度的选择性。酶蛋白往往只能催化一种或一类反应,作用于一种或一类物质。酶的专一性分为:结构专一性(底物专一)和立体异构专一性(反应专一)。比如:甘油激酶催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸;L-氨基酸氧化酶只作用于L-氨基酸,而不能作用于D-氨基酸。3、原核细胞与真核细胞(细胞质)的蛋白质生物合成有何主要区别?4、某研究生想在原核系统表达得到人白介素2(hIL-2),请帮助他设计实验路线(从获取基因开始至得到蛋白并坚定)(1)获取目的基因扩增,限制性内切酶,载体(2)转入感受态细胞(3)转化(4)表达5、蛋白酶体途径是细胞内蛋白质降解的主要途径之一。经此途径降解的蛋白质需要先怎样的修饰?修饰的主要过程是怎么样的?泛素蛋白酶体途径介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的主要成分包括括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。泛素启动酶系统负责活化泛素,并将其结合到待降解的蛋白上,形成靶蛋白多聚泛素链,即泛素化。6、什么是手性?9在用DL—丙氨酸制备D—丙氨酸时可以用L—丙氨酸脱氢酶将L—丙氨酸转化为丙酮酸,请用两种简单的方法证明L—丙氨酸已被逐渐转化。手性:一个手性分子与其镜像不重合,分子的手性通常是由不对称碳引起,即一个碳上的四个基团互不相同。