一、动物实验的基本操作技术和方法1、小鼠、家兔的抓取与固定;2、小鼠、家兔的给药途径:肌肉注射、腹腔注射、静脉注射;3、小鼠、家兔的麻醉:吸入麻醉、静脉麻醉;4、家兔的采血:耳缘静脉采血;5、小鼠、家兔的处死方法。二、针刺镇痛内阿片肽机制的实验观察1、用苦味酸标记小鼠;2、60只小鼠分为两组,每组30只,A组为热板法测痛,B组为扭体法测痛;3、A组热板测定基础痛阈,分为两组,A1组腹腔注射纳诺酮,A2组腹腔注射生理盐水,20min后随机分组,一组为电针足三里组,另一组为电针非穴组,分别电针10min后热板测痛;4、B组扭体法测痛,分为两组,B1组腹腔注射纳洛酮,B2组腹腔注射生理盐水,20min后随机分组,一组为电针足三里组,另一组为电针非穴组,分别电针10min后腹腔注射冰醋酸,再扭体法测通;5、统计分析结果。三、针刺对小鼠耐缺氧及抗疲劳的影响1、用苦味酸标记小鼠;2、60只小鼠分为两组,每组30只,A组为抗疲劳实验,B组为耐缺氧实验;3、A组分为两组,A1组针刺足三里,A2组不予针刺,10min后负重游泳,记录游泳衰竭时间;(每只小鼠尾部系1个其体重10%的重物;放入水桶中游泳,水深20cm,水温为(20±0.5)℃;以小鼠头部全部入水持续8s不能浮出水面为指标,记录游泳衰竭时间)4、B组分为两组,B1组针刺足三里,B2组不予针刺,10min后常压耐缺氧,记录缺氧死亡时间。(将小鼠分别置于装有5g钠石灰的50ml密闭广口瓶中,加盖密封,(15g/150ml);观察并记录其存活时间,以呼吸停止为死亡指征计算耐缺氧时间相对延长率)四、针刺“足三里”穴对家兔巨噬细胞吞噬功能的影响1、兔称重固定于兔台上,耳郭剪去毛发以备采血,用手术灯照射耳部,使血管扩张以便取血。洗净试管并标号,在每个试管放入3.8%枸橼酸钠冲洗以防止凝血。2、用动脉夹夹住取血静脉的近心端,然后用注射针头刺破静脉血管远心端,使血液自然流出,立即用1ml注射器缓缓吸入血液0.2ml,把采到的血液迅速注入1号试管,摇匀,准备离心。洗净注射器,并以3.8%枸橼酸钠冲洗以备再次采血。3、血样离心5min,转速2000rpm,取出上清液,用分光光度计测定其透光率,并以此血样进光率为100%标定分光光度计,作为针刺前空白对照。4、耳缘静脉注射2%刚果红(1ml/kg),注射5min后依上法取0.2ml血液注入2号试管中,摇匀并离心,测上清液的透光率。5、电针双侧“足三里”15min,电压1.5-2V,频率16Hz,疏密波,强度以下肢微微抽动为度。6、电针后即刻、20分钟、40分钟、60分钟、80分钟分别如前法取血样0.2ml,然后分别注入3、4、5、6、7号试管,摇匀并离心,测上清液的透光率。7、对照家兔除不电针外,其余干预与电针组相同。8、统计分析实验结果。五、针刺内关对家兔心律失常的影响1、将家兔称重后,25%乌拉坦碱溶液麻醉(4ml/kg),仰卧固定于兔台上;2、心电图机调试稳定后,先用5号注射针头平刺入家兔四肢末端皮下,然后将心电图电极夹在注射针头针柄末端,记录正常家兔Ⅱ导联心电图;3、两家兔由耳缘静脉注射0.002%乌头碱生理盐水溶液(1ml/kg),注射速度lmL/min。描记心电图,并记录心律失常出现的具体时间;4、一只家兔针刺双侧“内关”穴5分钟,平补平泻。5、密切观察心电图变化,记录家兔恢复到窦性心律各自的具体时间,并各计算出从出现心律失常至完全恢复到窦性心律所需的时间。6、汇总全部实验结果,进行统计学分析,并写出实验报告。