【目的要求】1、掌握阅片步骤、方法2、掌握正常粒系、红系各阶段形态3、熟悉淋巴细胞、单核细胞、巨核细胞等形态实验辨认细胞【实验步骤】1、看片前准备:(1)熟悉病史和体征(2)参阅其它化验结果(3)综合症状、体征、其它化验结果初步估计可能诊断范围,在看片时注意找依据2、骨髓象检查(1)低倍镜观察:①巡视全片:了解标本取材、涂片、染色情况,尽可能选择好的涂片和部位观察。取材涂片正常偏酸偏碱涂片观察部位的选择头体尾头头体体体尾尾②判断有核细胞增生情况:判断依据:有核细胞的密度判断标准:有核细胞与成熟红细胞之比有核细胞占视野细胞的百分比有核细胞均数/HP增生程度五级估计标准A、增生极度减低B、增生减低C、增生活跃D、增生明显活跃D、增生极度活跃增生程度判断注意点:►选择细胞分布均匀处作为判断部位。►对增生减低的标本,应观察全部送检标本►临床上将增生明显活跃又分为二级,以±表示;亦可把介于两者之间的向上提一级。►增生程度的判断是粗略的估计,受取材、涂片、骨髓有无凝固的影响,所以要多部位、多张片子结合。③计数全片巨核细胞数►从片头依次数到片尾,不漏视野►一般病人只需粗略估计巨核细胞数量,用易见、增多、难见、未见表示►出血性疾病要对全片巨核细胞计数和分类计数,分类25~50个巨核细胞,求出各类细胞的百分比④观察涂片边缘、尾部,注意有无体积大和成堆的异常细胞,并用油镜鉴定。低倍镜找目标油镜鉴定(2)骨髓片的油镜检查①骨髓有核细胞分类计数:随机、迂回、依次计数200~500个细胞(巨核细胞、分裂象、破碎细胞除外)。增生活跃以下的计数100~200个细胞。巨核细胞分类计数与低倍镜配合。(示教)②观察各细胞系列的形态,了解形态是否正常。如大小是否均匀,形态有无异常。粒系:核形正常,无分叶过多或过少,无毒性变,无中毒颗粒,无空泡,无包涵体(奥氏小体)原粒早幼粒、N中幼粒、杆状核、分叶核早幼粒、N晚幼粒N晚幼粒、杆状核、分叶核N晚幼粒、涂抹细胞N杆状核E分叶核E分叶核E分叶核红系:无核浆发育不平衡现象如巨幼变、核老浆幼,形态、大小正常,无巨幼红和异常红细胞,无嗜碱性点彩原红早红中红Ⅱ中红Ⅱ晚红Ⅰ晚红Ⅰ晚红Ⅱ巨核细胞系:无成熟障碍,无空泡变性、颗粒减少,无小型巨核细胞,血小板形态正常③注意有无异常细胞和血液寄生虫。如戈谢细胞,海蓝细胞,尼曼-匹克细胞,转移癌细胞,疟原虫,黑热病小体等。(3)结果计算①计算各系统各阶段细胞占有核细胞的百分比。②计算粒系统总比值、红系统总比值,并计算粒红比值。粒红比:即粒细胞百分率总和与有核红细胞百分率总和之比。以红系为1,正常为2~4:1③将计算的各系统的比值填写到骨髓报告单上,不要涂改。3、血片检查步骤及内容(1)制片及染色:(2)计数、分类及形态观察:计数100~200个白细胞。血片观察的内容为:①粒细胞:观察中性杆状核、分叶核粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量及形态(包括胞体、胞核及胞质),注意有无幼稚粒细胞、原粒细胞、棒状小体、粒细胞毒性改变、粒细胞分叶过多或过少、双核、巨幼样变等。②单核细胞:观察成熟单核细胞数量及形态,注意有无原单核细胞、幼单核细胞、棒状小体等。③淋巴细胞:观察成熟淋巴细胞数量及形态,有无原淋巴细胞、幼稚淋巴细胞、异型淋巴细胞等。④红细胞:观察成熟红细胞的大小、形态、淡染区、色泽、内含物,注意有无幼红细胞、大红细胞、环形红细胞、多色性红细胞、嗜碱性点彩红细胞、豪-周(Howell-Jolly)小体、卡波(Cabot)环等。淋巴单核淋巴淋巴、中红⑤巨核细胞:观察血小板数量、大小、形态、聚集性等形态学特点,注意有无大血小板、巨大血小板、畸形血小板和巨核细胞等。正常情况血小板3~5个成群,成小堆分布,约150个红细胞可见到5~6个血小板。(6)浆细胞:观察成熟浆细胞数量及形态,注意有无原浆细胞、幼浆细胞等。(7)其他:有无寄生虫及其他明显异常细胞,例如疟原虫、恶性组织细胞、恶性淋巴瘤细胞、吞噬细胞等。(3)计算结果:计算出各期细胞的百分比,并填入骨髓报告单的血片栏中。(4)血片特征的描述:一般要描述片中有核细胞数量,以何种细胞为主,形态如何,成熟红细胞形态如何,有无幼红细胞。血小板数量及形态如何,有无寄生虫及其他异常细胞等。