食品微生物学考试复习题1.微生物学发展中的几个重要人物的贡献。初创期(1676年——1860)形态学时期代表人物:列文虎克首次观察并描述微生物的存在。奠基期(1861——1896)生理学时期代表人物:巴斯德,建立胚种学说(曲颈瓶试验);乳酸发酵是微生物推动的;氧气对酒精发酵的影响;用弱化的致病菌防治鸡霍乱。科赫,建立了科赫法则,证实了病原菌学说,建立微生物学实验方法体系。发展期(1897-1952)生化、遗传学时期代表人物:Buchner,开创微生物生化研究;Doudoroff建立普通微生物学。成熟期(1953-)分子生物学时期(略)2.什么是微生物?广义的微生物和主要包括哪几大类?微生物的定义微生物是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称微生物主要包括病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类.微生物分类六界(病毒界1977年加上,我国陈世骧)生物界原核细菌界:细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体真菌界:酵母菌、霉菌病毒界:病毒、类病毒原生物界:原生生物、粘菌植物界动物界三元界:真细菌、古细菌、真核生物3.微生物具有哪些主要特性?试简要说明之。一、体积小,比表面积大,二、吸收多,转化快三、生长旺、繁殖快,四、适应性强,易变异,五、分布广,种类多4.细菌有哪几种基本形态?其大小及繁殖方式如何?细菌的基本形态分为:球形或椭圆形、杆状或圆柱状、弧状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、弧菌和螺旋菌。细菌细胞的大小一般用显微测微尺测量,并以多个菌体的平均值或变化范围来表示。细菌的繁殖主要是简单的无性的二均裂殖。5.细菌细胞壁的结构(Gram+、Gram-)与功能?gram染色的原理和步骤?知道常规的几种Gram+、Gram—的菌种结构:在细菌菌体的最外层,为坚韧、略具弹性的结构。其基本骨架是肽聚糖层,由氨基糖(包括N-乙酰葡萄糖胺,NAG和N-乙酰胞壁酸,NAM两种)和氨基酸组成。Gram+的细胞壁具有较厚(30-40nm)而致密的肽聚糖层,多达20层,磷壁酸是革兰氏阳性菌的特有成分,可加强肽聚糖的结构。Gram-的细胞壁薄(15-20nm)、结构较复杂,分为外膜(基本成分是脂多糖LPS)、肽聚糖层和壁膜间隙。功能:(1)保护细胞及维持外形(如果人工去掉细胞壁后,所有菌的原生质均变成圆形)。(2)具有分子筛作用(屏障作用):水及一些简单的化合物可通过,大分子不能通过。(3)具有膨压作用,膨压本身有一定坚韧和弹性,在低渗环境中不会膨胀破裂,在高渗环境中防止原生质过度收缩。(4)某些成分可与高等生物发生作用。革兰氏染色的原理:革兰氏染色的步骤:涂片固定——结晶紫初染1min——碘液媒染1min——95%乙醇脱色0.5min——番红复染min常规的几种Gram+:李斯特菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌常规的几种Gram-:沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌、假单胞杆菌关键步骤是酒精脱色,如脱色过度会将革兰氏阳性菌染成革兰氏阴性菌,如脱色不够会将革兰氏阴性菌染成革兰氏阳性菌。6.细菌细胞的特殊结构包括哪些部分?各有哪些生理功能?(1)荚膜:某些细菌细胞壁外的一层较松厚,而且较固定的粘液性物质,是鉴定细菌的依据之一。生理功能:a.对细菌有保护作用:保护细菌免受干燥的影响,保护不受其它细菌吞噬作用;b.荚膜的黏附作用有助于在特殊环境中定居和生存;c.增强细菌的致病力:具荚膜的致病菌毒力强,失去荚膜的致病力下降;d.提供养料和堆积代谢废物的作用。(2)鞭毛:是从细菌细胞质膜和细胞壁伸出细胞外面的蛋白质组成的丝状结构。生理功能:鞭毛是细菌的运动器官,有利于细菌趋向性的实现(趋利避害)。(3)菌毛:是某些细菌体表生长的短直中空,纤细量多的丝状结构。生理功能:吸附附着作用。(4)性菌毛:某些细菌细胞外生的丝状结构(数量较少),是不同菌株之间发生接合时DNA传递通道。是RNA病毒吸附侵染位点。(5)芽孢:某些细菌在生长后期在细胞内部,部分原生质失水浓缩形成一个圆形、椭圆形或圆柱形高度折光的内生孢子,称为芽孢。对不良环境条件具有较强的抵抗力的休眠体。芽孢对不良环境有很强的抗性:抗干燥(在干燥下可存活几年、几十年),抗紫外线,抗有毒化学物、对化学药品抵抗力强,能耐高温,能使细菌渡过不良环境。7.芽孢的耐热机制?某些细菌在其生长的一定时期,在其细胞内形成的一个厚壁的、抗逆性很强的内生孢子,这个内生的孢子就称为芽孢。耐热机制:1.含水量低,蛋白质和核酸不易变性。2.有厚、致密的壁3、含与抗热性有关的吡啶二羧酸(营养细胞无)4.芽孢内具有抗热性的酶。有多层厚而致密的壁;含水量低;存在有对热稳定的蛋白;含有特殊的物质如:2,6-吡啶二羧酸钙。8.放线菌的形态与结构、繁殖方式?基质菌丝:能产生黄、橙、红、紫、蓝、绿、灰、褐、黑等色素或不产生色素。气生菌丝:有波曲、螺旋、轮生等各种形态孢子:球形、椭圆形或瓜子形等各种形态,孢子表面有不同的纹饰。呈白、黄、淡绿、粉红、蓝、褐、灰等颜色。结构:气生菌丝,孢子丝,基内菌丝(营养菌丝)繁殖:可分为二类:1一般以分生孢子繁殖,如链霉菌等典型的放线菌以此方式增殖。2以短小分支或菌丝片段繁殖,如分支杆菌科放线菌科等初级放线菌以此方式增殖。9.霉菌的形态与结构、繁殖方式?有性孢子和无性孢子?霉菌是一些丝状真菌的总称。他们主要由菌丝和菌丝体组成。其中菌丝的几种特殊形态包括假根,吸器,菌核,子实体。霉菌的繁殖方式:无性繁殖(无性孢子):节孢子,游动孢子,厚亘孢子,孢囊孢子,分生孢子。有性繁殖(有性孢子):卵孢子,接合孢子,子囊孢子,担孢子,10.酵母的形态与结构、繁殖方式?酵母菌是典型的真核微生物,细胞的形态通常有球状.卵圆状.椭圆状.柱状或香肠状等多种,当他们进行一连串的芽殖后,如果长大的子细胞与母细胞并不立即分离,其间仅以极狭小的面积相链,这种藕节状的细胞串就称为假菌丝。酵母细胞一般比细菌个体大得多,为(1~5)um×(5~30)um。酵母菌细胞的典型构造包括(1)细胞壁(2)细胞膜(3)细胞核等构造酵母菌的繁殖方式:1无性繁殖:(1)芽殖:各属酵母均都存在(2)裂殖:在裂殖酵母属中存在(3)产无性孢子:节孢子,由地霉属产生郑孢子,由郑孢酵母属产生厚垣孢子,2有性(产子囊孢子):如酵母属,接合酵母属等11.如何在显微镜下区分上述四大类微生物?细菌相对较小,细菌特有的荚膜或芽孢(折光的)放线菌大量分支发达的菌丝,有螺旋状孢子丝霉菌根霉是有假根,匍匐菌丝,孢子囊或者散开的孢子.青霉明显扫帚状酵母菌是单细胞真菌有细胞器体积大很低倍的显微镜都能看到25.列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的细胞形态、结构、繁殖方式的特点。细胞形态结构繁殖方式基本结构特殊结构细菌球状、杆状、;螺旋状细胞壁、细胞质膜、细胞质、细胞核荚膜、鞭毛、芽孢1.无性的(二均)裂殖为主要繁殖方式2.(芽生细胞)芽殖放线菌-与细菌基本相同分枝发达的菌丝1.形成无性孢子2.菌丝片段酵母菌球形、卵圆形、圆柱、梨形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等细胞壁、细胞质膜、细胞核、(成熟细胞)液泡、(有氧)线粒体、基粒、基质1.无性繁殖①芽殖②裂殖③产无性孢子(节孢子、掷孢子、厚垣孢子)2.有性繁殖(产生子囊孢子)霉菌-菌丝(有/无隔膜)、菌丝体(营养/气生/繁殖)、菌丝特异化(假根、吸器、菌核、子实体)1.无性繁殖(节孢子、游动孢子、厚垣孢子、孢囊孢子、分生孢子)2.有性繁殖(卵孢子、接合孢子子囊孢子、担孢子)13.如何从平板上区分上述四大类微生物?其菌落形态与细胞形态有何联系?根据菌落大小、表面、边缘、色泽、厚薄、透明度、致密度等特征来区分真菌可形成哪些有性孢子,在真菌分类上有何作用。真菌的有性孢子有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子,真菌亚门(或门)的区分真菌可形成哪些无性孢子,说明它们的主要特征。真菌的无性孢子有:孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、厚垣孢子等。孢囊孢子:形成在一个囊状的结构中,可以是游动的,称为游动孢子,如不能游动,称为静孢子。分生孢子:靠菌丝分割或缢缩形成的无性孢子,形态多样。芽孢子:以出芽方式形成的无性孢子。厚垣孢子:即厚壁的孢子。15.病毒感染宿主的过程?1、特点1)不具有细胞结构,具有一般化学大分子的特征。2)一种病毒的毒粒内只含有一种核酸,DNA或者RNA。3)大部分病毒没有酶或酶系极不完全,不含催化能量代谢的酶,不能进行独立的代谢作用。4)严格的活细胞内寄生,没有自身的核糖体,没有个体生长,也不进行二均分裂,必须依赖宿主细胞进行自身的核酸复制,形成子代。5)个体微小,在电子显微镜下才能看见。6)对大多数抗生素不敏感,对干扰素敏感。噬菌体复制(繁殖)的三个阶段:1、吸附期(adsorptionperiod);游离的噬菌体吸附到宿主细胞2、潜伏期(latentperiod);从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期3、裂解期(lysisperiod);随着菌体不断破裂,新噬菌体数目增加,直到最高值平稳期(plateauphase)病毒浸染宿主的过程:1吸附:噬菌体与敏感的寄主细胞接触,在寄主细胞的特异性受点上结合.2侵入:噬菌体吸附在细菌细胞壁的受点上以后,核酸注入细菌细胞中,蛋白质壳体留在外面.3:复制:噬菌体核酸进入寄主细胞后,操纵寄主细胞的代谢机能,大量复制噬菌体核酸,并合成所需的蛋白质,但不形成带壳的粒子.4粒子成熟(装配):寄主细胞合成噬菌体壳体,并组装成完整的噬菌体粒子5寄主细胞的裂解(释放):粒子成熟,引起寄主细胞的裂解,释放出病毒粒子.16.烈性噬菌体、溶源性噬菌体?烈性噬菌体:侵入细菌细胞后,进行营养繁殖,使寄主细胞裂解的噬菌体。温和噬菌体:有些噬菌体侵入寄主细菌后,它们的核酸与宿主细胞同步复制,宿主细胞不裂解,这类噬菌体称为温和噬菌体。含有温和噬菌体的细胞称为溶源性细胞;在溶源性细胞内的噬菌体核酸称为原噬菌体。17、说明用光学显微镜观察细菌的步骤,并指出需特别注意的方面。首先在低倍镜下找到视野,然后转换高倍镜;在玻片上滴加一滴香柏油,将油镜浸入香柏油中,缓慢降低载物台(或提升油镜),找到视野;用细调焦螺旋调节至清晰的视野;观察;观察结束后擦去油镜上的香柏油。注意事项有:油镜观察一定要加香柏油;用油镜观察时应特别小心,以免压碎载玻片;观察完毕后一定要擦去油镜上的香柏油。18.请解释下列名词:菌落、菌苔,菌落特征菌落:微生物细胞个体在固体培养基上不断生长繁殖形成的肉眼可见并具有一定形态特征的细胞群体,是微生物固体培养群体形态。菌苔(lawn)细菌在斜面培养基接种线上有母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落:各种细菌在一定培养条件下形成的菌落具一定的特征,包括菌落的大小、形状、光泽、颜色、硬度、透明程度等等。菌落的特征对菌种识别、鉴定有一定意义。19.微生物生长的测定方法?说明生长曲线对微生物生产有何实践意义?(一)测定单细胞微生物的数量1.细胞总数的测定:显微镜直接计数(总菌数测定),平板菌落计数(活菌数测定),比浊法等;2.活细菌数量的测定:稀释平皿测数法、膜过滤培养法;(二)细胞生物量的测定1.干重法2.生理指标法20.微生物生长曲线并解释之1延滞期(Lagphase)又称停滞期、调整期和适应期。指少量单细胞微生物接种到新鲜培养基后,在开始培养的一段时间内细胞数目不立即增加,或增加很少,生长速度接近于零的一段时期—代谢系统是正在适应新环境。特点:细胞重量增加,体积增大,但不分裂繁殖。时间:几分钟到几小时,据不同菌种和培养基成分及培养条件而异。同一种类,接种物所处的生长发育时期不同,滞留适应期的长短也不一样。2对数生长期(Logarithmicphase)又称指数生长期(Exponentialphase)。指在生长曲线中,紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期。耐热机制:1.含水量低,蛋白质和核酸不易变性。2.有厚、致密的壁3、含与抗热性有关的吡啶二羧酸(营养细胞无)4.芽孢内具有抗热性的酶。3稳定期(stationaryphase)又称恒定期或最高生长期。其特点是生长速