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专题14生物技术实践1．(2016届广西南宁高三第一次模拟（适应性测试）考试（理综）生物试卷）薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄荷油，具有疏散风热、清利咽喉、消炎镇痛的作用。请回答下列问题：（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和等。提取薄荷油可以用水蒸气蒸馏法，该方法能利用水蒸气将的薄荷油携带出来。（2）在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后，薄荷油将分布与液体的（填“上层”或“下层”），然后用将这两层分开。分离得到的薄荷油油层中含有一定量的水分，可用吸水。（3）可用植物组织培养的方法对薄荷进行扩大培养，在接种前工作台需用擦拭一遍。之后所有的接种操作都必须在旁进行。培养基中的生长素用量与细胞分裂素用量的比值（填“低”“高”或“相当”）时，有利于芽的分化。【答案】（1）萃取法（2分）挥发性较强（2分）（2）上层（2分）分液漏斗（1分）无水Na2SO4（2分）（3）体积分数70%的酒精（2分）酒精灯火焰（2分）低（2分）【解析】考点：本题考查植物有效成分提取和植物组织培养，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。2．(2016届江西上饶市高三下学期第一次模拟考试生物试卷）在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。（1）如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。（2）分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述________成分，并加入________，以补充________源。（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确。。（4）若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2mL）________。【答案】（1）平板划线稀释（2）NaNO3尿素和葡萄糖氮、碳（3）甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学虽然涂布了三个平板，但其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，实验数据缺乏正确性（3分）（4）1．165×109【解析】（3）甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学虽然涂布了三个平板，但其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，实验数据缺乏正确性。（4）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=233÷0．2×106=1．165×109。考点：本题考查微生物的分离和培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。3．(2016届安徽池州市普通高中高三第一次模拟考试（理综）生物试卷）生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是：土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答：（1）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在环境中采集土样，所选择的培养基应以作为唯一碳源。（2）Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是，在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是。（3）下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答：①先配制好的培养基在接种前都要进行灭菌，在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在条件下进行。②获得图A效果的接种方法是,获得图B效果的接种方法是。【答案】（1）富含纤维素的；纤维素；（2）高温；解旋酶（3）①高压蒸汽（灭菌锅）；无菌②稀释涂布平板法；平板划线法【解析】（3）A培养基中菌落分布均匀，是稀释涂布平板法接种的现象，B组中线条明显，是平板划线法接种的现象。考点：本题考查微生物分离纯化的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。4．(2016届安徽安庆高三第二次模拟考试理综生物试卷）金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度实食盐的致病菌，为探究某天然植物抗菌液对金色葡萄球菌的抑菌作用，某实验小组按照以下实验步骤进行了相关实验。回答下列问题：（1）为防止杂菌污染，常用法对固体培养基进行灭菌处理，为检测灭菌效果可对培养基进行。（2）将配制好的多组培养基均分为甲、乙两组，甲组加入适量的天然植物抗菌液，乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的后，采用法分别接种到甲乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后，观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性，因此严格进行无菌操作，一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染，另一方面也是为了止。（3）在基本培养基中加入可筛选出金黄色葡萄球菌，从功能上讲，该培养基属于培养基。【答案】（1）高压蒸汽灭菌不接种培养（或空白培养）（2）梯度稀释稀释涂布平板操作者本身被致病菌感染（3）高浓度NaCl溶液选择【解析】考点：本题考查微生物的分离、纯化的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。5．(2016届宁夏石嘴山市第三中学高三下第一次模拟考试生物试卷）生活中有许多微生物技术的应用，请分析回答：（1）家庭酿酒时先将米煮熟，其目的是__________。冷却到30℃后才能加酒药的原因是_________。如果时常开坛盖取酒，不久酒就会变酸，其原因是______。（2）腐乳制作过程中，豆腐相当于微生物生长的______。豆腐变为味道鲜美的腐乳的原因是_______，制作腐乳的实验流程是_________________。（3）在制作泡菜过程中，主要起作用的微生物是________，检测泡菜中亚硝酸盐的含量时，使用对氨基苯磺酸溶液和________溶液检测，泡菜溶液会出现玫瑰红色。【答案】（1）杀灭其中的杂菌（1分）太高的温度会抑制甚至杀死酵母菌醋酸菌在有氧条件下，将酒精变为醋酸（2）培养基毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶能将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制（3）乳酸菌N－1－萘基乙二胺盐酸盐【解析】【考点定位】传统发酵技术的应用。6．(宁夏银川一中2016届高三第一次模拟生物试卷）农村中泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处，适宜环境温度为28～30℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，据此分析，回答下列问题。（1）用白酒擦拭泡菜坛的目的是。（2）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是。（3）制作过程中，需要加入盐水，其中清水与盐的比例应为，加入“陈泡菜水”的作用是。（4）若要获得优良乳酸菌菌种，应选用培养基培养。培养基中应含有、、水和无机盐，同时需要在培养基中添加。纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有。培养时还需提供条件。【答案】（1）消毒（2）盐过多，抑制了乳酸菌发酵（3）4：1；提供乳酸菌菌种（4）碳源氮源维生素平板划线法或稀释涂布平板法无氧【解析】【考点定位】泡菜的制作学优高考网7．(2016届山东济南高三下3月一模考试（理综）生物试卷）牛等反刍动物的胃中含有大量的分解纤维素的微生物。我们可以利用这些微生物将植物秸秆分解成可溶性糖类，从而实现碳能源的再利用。请回答相关问题：（1）为了从牛胃中分离所需的微生物，可将纤维素作为唯一的加入培养基，依物理性质该培养基属于培养基。（2）常用法统计样品中活菌的数量，统计结果一般用培养基中出现的数表示。（3）酵母菌在条件下可将可溶性糖发酵成酒精。同时我们可以采用法固定酵母菌细胞，以降低生产成本。（4）利用职务秸秆造纸时，常用易溶于有机溶剂的植物色素着色，人们采用法提取植物色素，提取过程中要进行加热，以防止有机溶剂遇明火易引起燃烧、爆炸。【答案】（1）碳源（1分）固体（2）稀释涂布平板菌落（3）无氧包埋（4）萃取水浴【解析】考点：本题考查微生物的纯化和计数、酶和细胞固定化技术、植物芳香油提取的方法等相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。8．(2016届贵州3月普通高等学校招生模拟考试理综生物试卷）近年来，心脑血管疾病发病率呈上升趋势。葡萄醋能软化血管，适量饮用可防治心脑血管疾病。以鲜红葡萄汁为原料制作葡萄酒和葡萄醋的过程简图如下。回答下列问题：（1）甲过程中，酵母菌通过____呼吸方式产生酒精。乙中使用的微生物是醋酸杆菌，制作葡萄醋需要向发酵罐提供____。（2）乙中使用的微生物可以从食醋中分离纯化获得，操作如下：A配制培养基。微生物生长繁殖所需的主要营养物质有水、____和无机盐四类。B．灭菌。C．接种。接种时应在酒精灯附近进行，其目的是____。D培养。某同学用稀释涂布平板法接种培养后，培养基上的菌落连成一片，可能的原因是____。E．挑选菌落。培养微生物实验中，使用过的培养基及其培养物，需灭菌后才能丢弃的原因是____。（3）某研究小组发现一棵葡萄树具有抗虫抗旱的性状，欲用植物组织培养技术大规模繁殖具有该性状的幼苗，从而提高葡萄产量。接种前，需要对外植体进行____。实验过程中，诱导愈伤组织分化成芽时，在培养基中添加的两种植物激素的含量应为____。[来源:学优高考网]【答案】（1）无氧（1分）氧（2）碳源、氮源避免周围环境中微生物的污染菌液浓度过高（涂布不均匀）防止培养的微生物扩散（3）消毒生长素用量比细胞分裂素用量低【解析】考点：本题主要考查微生物的培养、分离和纯化以及植物组织培养等相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。学优高考网9．(2016届山东枣庄高三3月模拟考试理综生物试卷）运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。（1）某科普实验小组欲从石油污染的水域中筛选出能高效降解石油的微生物。请回答：①从水体中分享纯化菌种时，若要获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是＿＿＿，操作时采用＿＿＿灭菌的方法。②在筛选过程中，应将稀释接种于以石油为唯一碳源的固体培养基上，在微生物培养前，需对培养基进行＿＿＿，该培养基从功能上看属于＿＿＿＿（2）进行月季花药离体培养时，选择合适发育时期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是＿＿＿＿＿。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中＿＿＿＿（3）葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮红素和大量葡萄风味物质等，这些物质易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用＿＿＿＿法来分离提取，还可以用＿＿＿＿和蒸馏等提取什物芳香油的方法。[来源:gkstk.Com]【答案】（1）接种环灼烧灭菌选择培养基（2）醋酸洋红法激素的种类及其浓度配比（3）萃取压榨【解析】考点：本题考查微生物培养的操作步骤，花药离体培养。意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。学优高考网10．(2016届四川成都第七中学嘉祥外语高三二次模理科综合生物卷）根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：（1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过来确定最适值。此类实验的观测指标可以是（两点，2分）。用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋。果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在℃的冷冻箱中保存。（2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培