13大豆抗营养因子---马永喜.

大豆抗营养因子马永喜中国农业大学农业部饲料工业中心2004.10成都研究队伍博士生20,硕士生12副教授12教授4专业架构动物营养饲料分析微生物学发酵工程生物技术免疫学试验猪舍动物营养代谢室科研大楼与中试车间主要研究领域猪营养与饲料研究方向：大豆抗营养因子分子营养学营养与免疫营养代谢与需要量饲料营养价值评定饲料添加剂营养与畜产品品质大豆抗营养因子热稳定性：抗原蛋白(球蛋白和-聚球蛋白)大豆寡糖热不稳定性：胰蛋白酶抑制因子糜蛋白酶抑制因子凝集素用酶联免疫法检测大豆饼、粕中抗胰蛋白酶因子浓度（39170557）仔猪利用膨化全脂大豆机理的研究（39470523）大豆寡糖对仔猪抗营养作用机理的研究（39770549）大豆凝集素受体结构及其类似物作用机理研究（30070561）2002年国家自然科学基金研究成果专著出版基金(30224001)2003年《大豆抗营养因子》2004年大豆中主要抗原蛋白的免疫生物学特性及其致敏机理的研究（30430520）大豆抗原蛋白与仔猪断奶综合征大豆抗原蛋白生产性能免疫机能肠道形态增重采食量淋巴细胞转化血清抗体IgG绒毛高度隐窝深度大豆抗原蛋白与生长性能大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P0.05)050100150200250300350400450500ADG4ADG8ADFI4ADFI8豆粕组奶粉组大豆抗原蛋白与上皮淋巴细胞转化05101520PHAPWMPSP1PSP2SBM4SBM8ML4ML8仔猪断奶后5wk的上皮淋巴细胞转化率高于断奶后1wk，说明断奶抑制仔猪免疫机能大豆抗原蛋白与血清特异抗体IgG024684wk8wk豆粕组奶粉组大豆抗原蛋白使血浆特异IgG滴度升高，表明大豆蛋白大分子穿过肠道黏膜屏障大豆抗原蛋白与绒毛形态左上(4周龄豆粕组)左下(8周龄豆粕组)右上(4周龄奶粉组)右下(8周龄奶粉组)大豆抗原蛋白与绒毛高度01002003004wk8wk豆粕组奶粉组大豆抗原蛋白降低了断奶后一周仔猪的肠道绒毛高度，对断奶后5周仔猪没有影响大豆抗原蛋白与隐窝深度1902002102202302402504wk8wk豆粕组奶粉组大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后1周和5周的隐窝深度增加大豆抗原蛋白血清特异IgG滴度升高肠道绒毛萎缩,表面粗糙,隐窝增生迟发性过敏反应生长性能下降J.Anim.Sci.,68:1790-1799；69:3299-3307；69:4062-4069肠上皮循环系统膨化全脂大豆与生产性能膨化全脂大豆显著改善仔猪的生产性能(P0.05)豆粕膨化全脂大豆ADG,克/天242307ADFI,克/天420451F/G1.741.47大豆抗原蛋白造成肠道损伤是断奶后腹泻的原发性因素大肠杆菌血清型(株)奶粉组豆粕组O149:K9152O141:K85332O138:K8131致病菌/总数4.7917.78腹泻头数/总头数0/64/6Qiao等，2003，AJAS,16(1):63-69.膨化全脂大豆与仔猪肠道形态膨化全脂大豆显著改善肠道吸收状况(P0.05)空肠豆粕膨化全脂大豆绒毛高度450523隐窝深度235218绒毛宽度11892μm膨化全脂大豆与肠道细胞周转膨化全脂大豆减少肠黏膜细胞周转速度，节约肠道维持能量需要AJAS.,11(2):201-207；16(1):63-69豆粕膨化全脂大豆迁移速度(um/小时)十二指肠29.6021.55空肠21.8515.93细胞更新率(小时)十二指肠28.8634.73空肠25.1340.42膨化全脂大豆改善肠道形态，降低细胞周转速度和肠道的维持能量需要，综合表现为提高仔猪的生长性能。大豆寡糖抗营养作用机理大豆寡糖与生长性能大豆寡糖与仔猪断奶后腹泻大豆寡糖的降解率大豆寡糖抗营养作用机理大豆寡糖与生长性能2%大豆寡糖降低了仔猪断奶后3周内的生长性能无豆粕组1%水苏糖2%水苏糖豆粕ADG254.3213.8173.7217.1ADFI447.0416.3374.6404.9F/G1.612.002.171.95大豆寡糖与仔猪断奶后腹泻00.511.522.533.544.55WK1WK2WK1-2Ctrl1%STA2%STASBM大豆蛋白和较高水平的大豆寡糖均可导致仔猪腹泻，大豆蛋白是主要原因大豆寡糖的降解率大豆寡糖在仔猪肠道的降解程度与日粮寡糖含量有关，随含量增加，降解程度降低1%水苏糖2%水苏糖豆粕采食量,克/天2.484.763.17回肠降解率,%16.454.3114.32全肠道降解率,%10078.49100大豆寡糖与肠道微生物菌群高水平大豆寡糖抑制了肠道中有益菌的生长AJAS.,14(11):1598-1604Arch.Anim.Nutr.,57(1):1-10Logcfu/gDM对照1%水苏糖2%水苏糖豆粕乳酸杆菌空肠8.969.457.389.21回肠7.719.116.228.09双歧杆菌空肠8.018.966.577.93回肠6.746.735.586.98大豆寡糖与食糜通过速度00.050.10.150.20.250.3SBMCON1%STA2%STA15h18h21h24h2%水苏糖组的食糜流出高峰较早(15h)，表明食糜的通过速度较快大豆寡糖养分消化率大豆寡糖使仔猪日粮DM、OM、CF消化率降低养分消化率豆粕1%水苏糖2%水苏糖干物质,%86.6984.1983.98有机物,%87.8786.5085.57粗蛋白质,%83.4384.0383.52粗纤维,%62.5652.8750.23小结大豆寡糖的抗营养作用与日粮大豆寡糖水平有关大豆蛋白和大豆寡糖都是引起仔猪腹泻的因素，大豆蛋白是主要原因大豆寡糖在小肠中可部分降解，全消化道的降解率与日粮水平有关大豆寡糖抗营养作用机理为：抑制有益微生物的生长，加快食糜的通过速度，降低日粮养分消化率分离出可生产-半乳糖苷酶的扬奇青霉对葡萄糖具有抗性的-半乳糖苷酶高产菌株扬奇青霉发酵生产-半乳糖苷酶与工艺-射线和亚硝基胍诱变固体发酵生产-半乳糖苷酶工艺参数和粗酶液制备工艺添加-半乳糖苷酶对仔猪生产性能、养分消化率和微生物区系的影响筛选出高产-半乳糖苷酶的扬奇青霉（0.32U/ml发酵液或29.12U/g干基）确定了固体发酵生产-半乳糖苷酶的工艺参数添加该酶可提高仔猪的养分消化率，且对微生物区系有利申请微生物菌株保藏和国家技术发明专利一项Arch.Anim.Nutr.,56（5）:327-337大豆凝集素的检测、纯化和对大鼠抗营养机理的研究建立大豆凝集素的间接抑制ELISA优化大豆凝集素的纯化制备方案不同水平大豆凝集素对大鼠氮代谢的影响不同水平大豆凝集素对大鼠生长、器官增生和血液胰岛素和CCK水平的影响抵抗降解结合于上皮细胞影响内分泌细胞的功能和胃肠道激素的变化内吞进入细胞诱发上皮细胞代谢变化和粘膜增生进入循环系统调控内分泌系统诱导胰腺的增生大豆凝集素的抗营养作用机理Arch.Anim.Nutr.,57(4):267-27757(5):369-380免疫原性致敏作用影响因素（热、离子强度pH值和消化酶）抗原蛋白及其亚基的定量测定单克隆抗体制备肠道细胞机体组织仔猪发育阶段为降低抗原蛋白免疫原性，减轻或消除其对人和动物的危害提供理论基础大豆抗原蛋白免疫生物学特性及致敏机理研究关键问题Glycinin碱性多肽、β-Conglycinin的β亚基特异性单克隆抗体的制备技术Glycinin、β-Conglycinin及其分解产物在消化道、血液、免疫器官等部位分布的时空规律，它们分解代谢和免疫原性的动态变化规律Glycinin、β-Conglycinin及其分解产物进出消化道黏膜上皮细胞的过程和机理ThankYou!!