螺旋体Spirochete螺旋体是一群细长、柔软,弯曲呈螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物。生物学性状介于细菌与原虫之间。特点:基本结构与细菌类似:有细胞壁(含脂多糖和磷壁酸)、细胞膜,无定型核二分裂方式繁殖菌体柔软,能独立活泼运动对抗生素敏感共8个属,能引起人类疾病的主要有3属:菌属致病菌种所致疾病传播方式或媒介疏螺旋体(Borrelia)伯氏疏螺旋体莱姆病硬蜱回归热螺旋体流行性回归热体虱赫姆疏螺旋体地方性回归热软蜱奋森疏螺旋体多种口腔感染机会感染钩端螺旋体(Leptospira)问号钩端螺旋体钩端螺旋体病皮肤粘膜密螺旋体(Treponema)梅毒螺旋体梅毒性传播雅司螺旋体雅司病皮肤损伤品他螺旋体品他病皮肤损伤地方性螺旋体地方性梅毒粘膜损伤一、分类二、密螺旋体属Treponema有8~14个细密而规则的螺旋,菌体硬直,两端尖直。微需氧生长。对人致病的有梅毒螺旋体、雅司螺旋体、地方性螺旋体和品他螺旋体,分别引起人类梅毒、雅司病、地方性梅毒和品他病。梅毒螺旋体(Treponemapallidum,TP)梅毒螺旋体即苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema.pallidumsubspeciespallidum),是引起性传播疾病(STD)梅毒的病原体。(一)细菌特性1.形态与结构菌体细长,螺旋致密而规则,两端尖直。革兰染色阴性,但不易着色;镀银染色呈棕褐色。结构原生质圆柱体细胞壁、细胞膜、细胞质、核质外膜包围在细胞壁外,薄而富有弹性轴丝(周浆鞭毛或内鞭毛)外膜与包质膜之间,与运动有关。2.培养特性目前尚不能在人工培养基上生长繁殖。有毒力的Nichols株能在家兔睾丸和眼前房内繁殖并保持毒力,但繁殖缓慢,且只能维持数代。3.抗原结构1)密螺旋体抗原特异性抗原,刺激机体产生特异性抗体。2)磷脂类抗原非特异性抗原,刺激机体产生反应素,可与牛心肌的心脂质抗原发生反应。所致疾病性传播疾病——梅毒传染源人类是梅毒螺旋体的唯一宿主,梅毒病人及其携带者是惟一的传染源。传播途径主要通过性接触传播,也可通过胎盘垂直传播和输血感染。(二)临床意义1.获得性梅毒性接触为主要传播方式临床分三期:一期梅毒(硬下疳期)出现于感染后2~4周,直接镜检阳性率最高。二期梅毒(梅毒疹期)下疳出现后6~8周。梅毒疹及淋巴结中有大量的螺旋体。传染性最强。三期梅毒(结节性梅毒疹和树胶样囊肿)晚期梅毒,严重者可引起心血管和中枢神经系统受损。病灶中螺旋体少,传染性小,但病程长。2.先天性梅毒胎盘垂直传播流产/死胎梅毒儿早期先天性梅毒2岁以内发病,有传染性。晚期先天性梅毒2岁以后发病先天隐性梅毒(血清阳性)(三)微生物学检验1.标本采集I期梅毒病人取硬下疳渗出液II期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液对I期梅毒末期以后(大约感染3~4周以后)的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。2.检验方法显微镜检查:暗视野显微镜检查染色检查镀银染色、Giemsa染色荧光抗体染色检查血清学试验:①非密螺旋体抗原试验特异性低但敏感性高,筛选试验性病研究实验室玻片试验(VDRL)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)血清不加热反应素试验(USR)甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)②密螺旋体抗原试验特异性高、为确证试验。荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)双染色荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABSDS)抗梅毒螺旋体抗体的微量血凝试验(MHA-TP)ELISA免疫印迹试验(IBT)二、钩端螺旋体属(Leptospira)螺旋细密规则,一端或两端弯曲呈钩状,共两个种:问号钩端螺旋体(L.interrogans)人畜共患病原体,引起人、动物和家畜的钩端螺旋体病双曲钩端螺旋体(L.biflexa)腐生菌,对人不致病(一)细菌特性1.形态染色菌体细长,一端或两端呈钩状,菌体呈C、S或8字形等,运动活泼。革兰染色阴性,但不易着色。常用Fontana镀银染色法,背景为淡棕色,钩体染呈棕褐色。2.培养特性易于人工培养,常用Korthof培养基。需氧生长,最适pH7.2~7.6,最适生长温度为28~30℃。生长缓慢。培养1~2周,在液体培养基中呈半透明云雾状生长。在含1%琼脂的适宜固体培养基上,形成透明、不规则、直径<2mm的扁平细小菌落。3.生化反应生化反应不活泼,不分解糖类和蛋白质,能产生过氧化氢酶,有些菌株能产生溶血。致病性钩体含有两种主要抗原:表面抗原多糖蛋白复合物,具型特异性,分型依据菌体抗原类脂多糖复合物,具属特异性,分群依据目前问号钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型。我国已发现的致病性钩端螺旋体至少有19个血清群、74个血清型,是发现血清型最多的国家。4.抗原构造与分类(二)临床意义1.致病物质(1)内毒素样物质或称脂多糖样物质(2)外毒素样物质溶血素、细胞毒性因子2.所致疾病钩端螺旋体病(钩体病)为自然疫源性疾病主要储存宿主:鼠类和猪。肾脏长期带菌和排菌的鼠和猪是钩体的重要储存宿主和传染源。感染途径钩体→肾脏→随尿排出→污染水源和土壤皮肤感染消化道感染胎盘垂直感染(三)微生物学检验1.标本的采集第一周取血液,第2周起取尿液,有脑膜刺激症状者取脑脊液。2.检验方法(1)显微镜检查直接暗视野镜检简便、快速,但检出率较低。差速离心集菌暗视野镜检染色镜检镀银染色法、免疫荧光染色、免疫酶染色(2)分离培养Korthof培养基(3)动物试验尤其适用于有杂菌污染的标本。常用幼龄豚鼠或金地鼠。(4)鉴定显微镜凝集试验(MAT)(1)显微镜凝集试验应用最广的钩体血清学试验方法。(2)间接凝集试验快速简便,便于基层应用,筛选试验。(3)ELISA3.血清学诊断三、疏螺旋体属Borrelia也称包柔螺旋体属,有3~10个初浅而不规则的螺旋,运动活泼,微需氧或厌氧生长。对人致病的主要有伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体、奋森疏螺旋体等。(一)伯氏疏螺旋体1.细菌特性(1)形态染色菌体细长,两端稍尖,螺旋稀疏不规则革兰染色阴性,但不易着色,Giemsa染色呈紫红色。(2)培养特性营养要求高,常用BSK培养基,微需氧,5%~10%CO2促进生长。适宜温度为35℃,最适pH7.5。生长缓慢,一般2~3周可见生长现象。2.临床意义储存宿主鼠类和驯养的哺乳动物(偶蹄类鹿)传播媒介硬蜱所致疾病莱姆病(Lyme病),为自然疫源性疾病,主要表现为慢性游走性红斑(伴发热头痛颈硬肌痛关节痛神经系统损害)3.微生物学检验(1)标本采集病损皮肤组织、淋巴结抽出液、血液等(2)显微镜检查暗视野显微镜检查染色检查革兰染色、Giemsa染色、Wright染色(3)分离培养BSK培养基增菌培养,暗视野显微镜检查。(4)血清学检查:间接免疫荧光法(IFA)酶联免疫吸附试验(ELISA)免疫印迹试验(IBT)(5)动物接种小白鼠、金地鼠、兔、狗等。(二)回归热螺旋体B.recurrentis1.细菌特性(1)形态染色菌体细长,螺旋稀疏不规则,Giemsa染色呈紫红色,Wright染色呈棕红色(2)培养特性微需氧,可用BSK培养基培养。2.临床意义人类回归热的病原体流行性回归热病原体为回归热螺旋体,传播媒介为体虱,我国流行地方性回归热病原体多达15种,如杜通疏螺旋体、赫姆斯疏螺旋体等,传播媒介为软蜱,我国少见3.微生物学检验(1)标本采集发热期外周血液(2)显微镜检查暗视野显微镜检查染色检查Giemsa染色、Wright染色(3)分离培养BSK培养基增菌培养,暗视野显微镜检查。