中药质量标准与评价研究进展

中药质量控制与评价研究进展重庆市食品药品检验所秦剑2014.3中药质量控制与评价•1方法学研究进展•2新技术研究进展•3中药质量控制与评价展望重庆市食品药品检验所•1951年建所，国内最早的5家省级所之一•国家口岸药品检验所中药质量控制的特点与难点药材来自天然，成分复杂，并且变数大•独特的中医理论指导•复方药物现有中药质量控制框架•借鉴化学药模式•变化的只是分析技术和指标成分min0510152025303540mAU010203040506070VWD1A,Wavelength=235nm(DYW\09040301.D)min0510152025303540mAU010203040506070VWD1A,Wavelength=235nm(DYW\09040312.D)山栀苷甲酯8-O-乙酰山栀苷甲酯中药质量控制新方法进展•有限成分组合质量标准•选取有限的具有生物活性的单体成分或一类组分，在系统研究其组成比例与功效的关系的基础上，以“指标性成分的绝对含量和组成比例”为参数，建立起能反映成分—药效，甚至量效关系的质量标准—有限成分组合质量标准。不能仅以“具有某种药效”为依据，而应尽可能多地纳入“具有生物活性”的成分中药质量控制新方法进展•化学物质组学•层次化、系统化及逐步优化的研究策略首先强调整体有效将药物分为三个层次：整体化学物质组、有效化学物质组、有效化学成分群从整体到部分(子化学物质组)，弄清楚各部分之间的相互关系中药质量控制新方法进展•指纹图谱模式•采用一定的分析手段，得到的能够表征中药化学特征的色谱图或光谱图•强调的是多个成分以相对稳定的比例关系及位置顺序相互制约的完整的色谱或综合的光谱特征，即在整体性特征和共同特征的基础上个体之间又相互有差异的模糊特征性。1234567S8910茵陈金银花栀子黄芩苷中药质量控制新方法进展•谱效整合指纹谱模式•融化学特征和生物活性评价为一体的综合性评价模式•融化学特征和生物活性评价为一体的综合性评价模式•融化学特征和生物活性评价为一体的综合性评价模式融化学特征和生物活性评价为一体的综合性评价模式•样本的活性检测离线或在线方式•信息处理计算机技术•成分指纹谱—对应活性指纹谱统计分析或计算机处理•化学及生物活性整合指纹谱计算机处理中药质量控制新方法进展•道地药材-生物检定质量控制模式•常规、化学和生物多重角度共同把关中药质量技术关键：找到具备定量药理学和药检分析双重属性的生物检定技术以道地药材和标准制剂为核心生物检测化学检测常规检测中药有效性、安全性评价中药质量控制新方法进展•指纹图谱—多指标定量模式•指纹图谱结合多指标定量测定的中药质量控制模式，同时与中药化学—药理药效学—药代动力学研究相结合有效成分明确者采用指纹图谱技术与多指标成分定量分析相结合的质控模式有效成分尚未明确者化学成分研究、药理药效学研究、药物代谢研究相结合，以药效物质基础研究为指导，指纹图谱与多指标成分定量分析中药质量控制新方法进展•一测多评模式•侧重从量上阐明主要成分或药效成分间的相互关系•中国药典2010版黄连项下采用了这个方法在对照品短缺的情况下，实现多指标成分的含量测定中药质量控制新技术进展计算机辅助显微数码成像技术用于中药材的基原鉴定以及部分中成药的鉴定淀粉粒导管粘液细胞中药质量控制新技术进展•激光共聚焦显微技术可实现对活细胞的显微观察中药质量控制新技术进展•中药材DNA标记鉴定技术非常适合于近缘种、易混淆品种、珍稀品种、动物药材、破碎药材、陈旧药材、腐烂药材及样品量极为有限的植物模式标本、中药出土标本、古化石标本等74种农药混合标准品LC/MS/MS总离子流色谱图•LC-MS联用技术•综合了色谱的强大分离能力，质谱的高灵敏度、宽检测范围、获取结构信息的强大能力。中药化学成分的分离、定性（结构鉴定），以及复杂样品中中药成分的痕量分析中药质量控制新技术进展X中药注射剂中绿原酸及其同系物的高分辨质谱分析[M+H]+m/z355.10236和[M-H]－m/z353.08781提取离子流图200300400500600700m/z020406080100020406080100RelativeAbundance355.10214C16H19O9-0.60360ppm163.03902C9H7O30.31999ppm246.04098372.12894C16H22O9N0.09161ppm353.08777C16H17O9-0.10410ppm191.05547707.18311C32H35O180.30857ppmNL:2.16E7XH01#1542RT:7.05AV:1SB:355.75-6.39,8.08-8.75T:FTMS+pESIFullms[115.00-1000.00]NL:1.25E8XH01#1530RT:6.99AV:1T:FTMS-pESIFullms[115.00-1000.00]二级质谱图二级碎片归属50100150200250300350m/z050100050100050100RelativeAbundance050100191.05551C7H11O6135.04422C8H7O2179.03430C9H7O4353.08783C16H17O985.02837C4H5O2161.02380C9H5O3191.05551C7H11O685.02835C4H5O2353.08792C16H17O9173.04483C7H9O5135.04422C8H7O293.03348C6H5O353.08795C16H17O9161.02364C9H5O3191.05553C7H11O685.02840C4H5O2353.08786C16H17O9161.02368C9H5O3NL:7.00E5XH01#963RT:4.35AV:1F:FTMS-pESIdFullms2353.08@hcd35.00[50.00-380.00]NL:3.95E7XH01#1539RT:7.03AV:1F:FTMS-pESIdFullms2353.08@hcd35.00[50.00-380.00]NL:4.36E6XH01#1635RT:7.48AV:1F:FTMS-pESIdFullms2353.08@hcd35.00[50.00-380.00]NL:9.18E6XH01#2067RT:9.47AV:1F:FTMS-pESIdFullms2353.08@hcd35.00[50.00-380.00]4个同分异构体：3-咖啡酰奎尼酸（氯原酸），5-咖啡酰奎尼酸（新绿原酸），4-咖啡酰奎尼酸（隐绿原酸），和1-咖啡酰奎尼酸肿节风化学成分研究中药质量控制新技术进展•ICP-MS：重金属检测的新技术•ICP-MS：电感藕合等离子体质谱。可以确定金属元素的价态高专属性高灵敏度高准确度用途：重金属铅、砷、汞、镉、铜的精确测定元素PbCdHgAsCu(mg/kg)5.00.30.22.020中药质量控制新技术进展•高效毛细管电泳技术•优点：高效、快速、简便且柱不易受污染•发展出多种接口：CE-MS和CE-NMR中药质量控制新技术进展•X-衍射分析技术•每种药材具有自身专属性X-衍射图形拓扑规律实现药材定性快速鉴别每种药材具有独立的、表示其完整结构特征的X-衍射特征峰值实现对药材中化学成（组）分及含量的控制建立中药材X-衍射傅里叶图谱数据库，实现中药材自动检索、鉴别•X-衍射分析技术南江厚朴，39个衍射峰利川厚朴，35个衍射峰镇坪厚朴，44个衍射峰广西凹叶厚朴，48个衍射峰浙江凹叶厚朴，49个衍射峰江西凹叶厚朴，50个衍射峰中药质量控制新技术进展•红外光谱与拉曼光谱法A:复方磺胺甲恶唑B：泰诺C：阿司匹林D：安乃近中药质量控制新技术进展•核磁共振氢谱黄连药材核磁共振图特征性标准提取物的1H-NMR图谱是其中各种成分1H-NMR的叠加中药质量控制新技术进展•薄层色谱-生物自显影技术DPPH生物显色剂：一种很稳定的以氮为中心的自由基DPPH本身显紫色。具有清除DPPH自由基能力的物质能使其还原成DPPH-H而呈现黄色乌药的薄层色谱-生物自显影中药质量控制新技术进展•超临界流体萃取-超临界流体色谱超临界流体色谱法(SFC)：以超临界流体作为流动相SFC兼具HPLC和GC的优点，能分离分析难挥发、遇热不稳定、HPLC难以检测的物质中药质量控制展望—他山之石QUALITYEVALUATIONOFHERBALDRUGSStandardization&QualityEvaluationofHerbaldrugs中药质量控制与评价展望从“点”到“面”，从“分解”向“综合”，从“局部”到“整体”，从“线性”思维向“非线性”思维发展。中药质量标准要达到真实、完整、全面表征和控制药品质量的目标，首先还是寄望和依赖于方法学的突破。关键问题：药效物质基础与作用机理研究更加重视化学成分-化学成分组（群）-生物效应三个层次在中药质量控制中的地位。任重道远谢谢各位！