消毒与灭菌基本概念食用菌栽培是人工创造适宜食用菌生长繁殖的条件,对食用菌进行纯培养的过程,在自然条件下,食用菌的培养原料、生活空间以及栽培所使用的工具都存在着大量的微生物,对于所栽培的食用菌来说,这些微生物都被称为杂菌。它们通过不同的渠道进入培养基内,与食用菌争夺空间和养料,给食用菌生产造成损失,或导致生产失败。对培养料和环境、工具的除菌措施称为消毒和灭菌。但二者是两个不同的概念。杀死一切微生物(包括芽孢)。灭菌分为杀菌:菌体尚存溶菌:菌体消失消毒:只杀死部分病源菌(杀不死芽孢)防腐:暂时抑制微生物生长。使其不生长、不繁殖,但又未死亡的状态。是保证生产成功的重要手段返回本章第二节物理消毒灭菌法一、热力灭菌二、紫外线灭菌返回本章一、热力灭菌(利用高温杀死微生物的方法)(一)原理高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。(二)方法湿热灭菌干热灭菌返回本节(一)干热灭菌热源火焰及热空气特点简单、操作方便、范围有限方法酒精灯烧烘箱烤返回本节器皿包装→160℃~170℃2h干燥箱使用注意70℃以下开箱取物勿超180℃随用随开包返回本节(二)湿热灭菌特点范围广、温度低、效果好、时间短热蒸气或热水热源方法高压蒸汽灭菌常压蒸汽灭菌巴氏消毒返回本节1.高压蒸气灭菌概念利用高压产生的高温蒸汽杀灭微生物的方法适用于原理水沸点随热蒸汽压力的增加而升高密闭锅蒸气多压力高沸点高返回本节培养基、玻璃器皿及用具等物品灭菌杀菌谱广、效果好、时间短,应用范围广,但料成分易分解,PH值易变返回本节步骤:装锅→加热排气→升压→保压灭菌→降压出锅关键:排净冷空气注意灭菌时间和压力因物而异降压要稳灭菌时间从保压时算起压力降至“0”才能开盖使用返回本节排气2.常压蒸汽灭菌(概念利用常压产生的100℃蒸汽温度进行灭菌的方法特点设备简,成本低,灭菌量大,灭菌温度低,培养料养分不易被破坏;但时间长,燃料耗费多。适宜尽快达到100℃达到100℃,锅内冒大气时开始计时灭菌中勿降温,勿干锅返回本节原种、栽培种的培养基和熟料栽培的培养料的灭菌操作方法:用土蒸锅等进行灭菌)返回本节灭菌池返回本节3.巴氏消毒概念利用低于100℃的温度杀灭有害微生物的方法培养料堆积发酵料温60℃~70℃杀死有害微生物方法返回本节(法国微生物学家、化学家路易士、巴斯德首创的低温消毒法。加热到62℃,经过30分钟,以杀死不耐高温的物质中的微生物的消毒法。)常压间歇灭菌法•仪器:常用灭菌锅•灭菌方法:锅内水沸腾,产生蒸汽后,蒸1h,停止加热一天,再加热到100℃,保持1h,再停一天,重复3次即可。•原理:维持100℃1h可杀死微生物的营养体,但杀不死芽孢,灭菌后培养基降至室温时,芽孢可萌发形成营养体,24h后再维持100℃1h,再次杀死新的营养体,再降温,再加热灭菌,重复3次便可达到彻底灭菌的目的。二、紫外线灭菌概念利用电子射过水银气体产生的紫外线而杀菌的方法杀菌机理直接:使菌体蛋白质、酶等变性失活间接:空气中产生臭氧或过氧化氢使用有效距离:1.5~2.0m30w紫外灯照30min→避光10min(因可见光对紫外线的作用有光复活现象,因此照射时应遮光,照射后不要马上开日光灯)。返回本节穿透力很弱(用于物体表面和空气灭菌)定期更换灯管(3000~4000h);只起辅助作用(对细菌效果好,真菌效果较差)伤眼睛和皮肤(不要在紫外线灯下操作)特点返回本节第三节化学消毒灭菌法一、概念与划分二、气雾消毒灭菌法三、液体消毒灭菌法返回本章一、概念与划分利用化学药剂杀灭或抑制微生物的方法概念抑菌剂消毒剂灭菌剂性质液态:喷雾、浸泡、洗刷等气态:加热、焚烧、氧化等状态划分返回本节二、气雾熏蒸法(常用于环境的空气消毒)(一)要求密闭条件下保持一定时间(二)种类甲醛等气雾盒返回本节机理:结合蛋白质氨基,使其变性。喷:5%熏:10ml/m3+5g/m3KMnO4(密闭24h)用法1.甲醛有刺激性和腐蚀性返回本节2.气雾消毒剂粉末状刺激性小扩散力及渗透性强特点2~6g/m3→点燃(熏30min以上)用法返回本节三、液体消毒法(以浸泡、擦抹、喷雾等使用)固体或液体药品水药液(多现配现用)概念种类氧化剂表面活性剂乙醇酚类新洁尔灭返回本节(一)氧化剂氧化剂放出的游离氧可氧化菌体蛋白质的活性基团,使其变性失活。机理种类高锰酸钾过氧化氢漂白粉过氧乙酸返回本节1.高锰酸钾紫色针状结晶2~5%喷雾;0.1%~0.2%浸泡手、器具等。(水溶液暴露在空气中易分解,应随配随用)返回本节2.过氧化氢无色液体。具有广谱、高效、长效的杀菌特点,易分解为氧气和水,不会产生有毒的残留物,对环境无污染,属环保型消毒剂,3%皮肤、伤口消毒6%浸泡器皿30min返回本节3.漂白粉(白色颗粒状粉末,主成分次氯酸钙)2%~5%浓度洗刷、喷雾、浸泡湿处可干撒作用约30min使用注意原品密封,见空气易分解,随配随用。对衣物有退色和腐蚀性返回本节4.过氧乙酸(用于各种器具、空气、环境消毒)无色至微黄色液体,有刺激性、腐蚀性、挥发性。分解产物是醋酸、过氧化氢、水和氧气,不留有害物质。是高效、广谱、速效杀菌剂熏蒸7ml/m30.2%洗手0.5%浸泡0.5%喷雾使用返回本节(二)表面活性剂(具有降低表面张力效应的物质)脱水剂脂溶剂蛋白质变性剂1.乙醇70%~75%效果最好皮肤、器皿擦拭或浸泡浓度高浓度效果差无水的无杀菌作用不能返回本节3.新洁尔灭0.25%消毒皮肤、浸泡器具0.5%喷雾2.酚类石炭酸:3%~5%浸泡或喷雾来苏尔刺激性小效力比苯酚强4倍3%~5%喷雾、擦洗2%消毒手返回本节(三)熟石灰提高pH、消毒破坏秸草表面的蜡质提供钙素养料作用使用1%~2%拌料5%~10%喷、浸、刷、喷干撒湿环境或霉染处返回本节药品及浓度的选择依据微生物特点物品的性质消毒目的环境影响标准性质稳定易溶于水杀菌力强抗菌谱广作用较快使用浓度低价格低廉没有毒腐性或很小返回本节本章主要内容一、物理消毒灭菌法1.热力灭菌干热(酒精灯、干燥箱)高压(排净冷空气)常压(攻头、控中、保尾)湿热2.紫外线(使用方法、注意事项)二、化学消毒灭菌法常用酒精、甲醛、高锰酸钾来苏、新洁尔灭等返回本节1.高压灭菌与常压灭菌有哪些不同?2.高压灭菌应注意些什么?3.紫外线灭菌应注意些什么?4.为何不使用高浓度的酒精?思考题作业题1.为何湿热灭菌比干热灭菌效果好、时间短?2.来苏尔和石炭酸都是酚类,为何来苏尔的杀菌效力高?返回本节