自身免疫性肝病及抗体检测

自身免疫性肝病相关自身抗体检测及其临床意义自身免疫性疾病（AID）临床经验积累和实验诊断技术进步,发病率↑疑难病？累及各系统、组织和器官临床渉及多专业学科临床表现复杂诊断水平的局限误诊误治发生率高慢火煮青蛙冰山原理特征性临床表现相关实验室检查疾病分类标准﹑诊断标准﹑专家共识自身免疫性疾病(AID)诊断体外诊断实验-实验室检查临床检验常规检查临床免疫学常规检查特殊实验室检查影像学检查组织病理学检查相关实验室检查自身免疫性疾病(AID)诊断自身免疫性疾病(AID)诊断证据叠加自身抗体:是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原成分的免疫球蛋白是自身免疫应答和AID最重要特征之一某些AID伴有特征性的自身抗体(谱)自身抗体检测对AID诊断和鉴别诊断至关重要自身抗体检测已成为诊断AID的重要手段自身抗体（autoantibidies）国外临床常规自身抗体检测项目已达百种以上主要包括：抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体谱、抗磷脂抗体谱、类风湿因子、类风湿关节炎早期诊断自身抗体谱自身免疫性肝病自身抗体谱、自身免疫性甲状腺疾病自身抗体谱、1型自身免疫性糖尿病自身抗体谱、不孕/不育自身抗体谱、炎症性肠病自身抗体谱、自身免疫性胃炎/恶性贫血自身抗体谱、麦胶（麸质）敏感性肠病自身抗体谱、副肿瘤综合征自身抗体谱和重症肌无力自身抗体谱等国内:临床常规项目少，普及性低自身抗体临床检测及应用AID诊断与鉴别诊断:特征性自身抗体谱，标志性抗体或特异性抗体AID病情评估与治疗监测:判断疾病的活动性，观察治疗反应，指导临床治疗anti-dsDNAanti-PR3anti-MPOAID病程转归与预后判断SSc:ACAanti-Scl-70AID预警:3P医学-预测、预防和个体化医疗PREDICTION、PREVENTION、PERSONAILIZATION自身抗体临床应用价值疾病标记（志）性自身抗体：非常少见AIH：anti-SLAanti-LKM-1anti-LC-1疾病特异性自身抗体PBC：AMA-M2疾病相关性自身抗体AIH：SMA疾病非特异性自身抗体ANA生理性自身抗体：低滴度、非特异性根据自身抗体临床意义分类抗核抗体谱抗磷脂抗体谱抗中性粒细胞胞浆抗体谱类风湿关节炎自身抗体谱自身免疫性肝病自身抗体谱风湿免疫病常见自身抗体谱器官特异性自身免疫病自身抗体谱自身抗体常用检测方法营养性免疫性药物性酒精性其它？感染性肿瘤性代谢性肝脏疾病肝病是危害我国人民健康常见疾病和主要死亡疾病之一肝脏疾病分类感染性：HAV、HBV、HCV、HDV、HEV、CMV、EBV、肝吸虫、阿米巴、包虫…药物和毒物：异烟肼、甲基多巴、双醋酚汀、苯妥英钠…自身免疫性：AIH、PBC、PSC酒精性：大量饮酒肿瘤性：原发性肝癌、继发性肝癌代谢障碍性：肝豆状核变性、α1-抗胰蛋白酶缺乏其它：胆汁淤积、遗传性、病因不明性…自身免疫性肝病（AILD）autoimmuneliverdiseases自身免疫性肝炎（AIH）autoimmunehepatitis原发性胆汁性肝硬化（PBC）primarybiliarycirrhosis原发性硬化性胆管炎（PSC）primarysclerosingcholangitis重叠综合征（OverlapSyndrome）2010年IAIHG:重叠综合征不是独立的疾病自身免疫性肝病（AILD）其诊断和治疗完全不同于一般慢性病毒性肝炎PBCAIHPSC与自身免疫密切相关以肝、胆损伤为主三种疾病协和内科大查房：自身免疫性肝病临床病例讨论“淋巴节肿大、发热、肝功能异常”中国医学论坛报2002年4月11日6版.自身免疫性肝炎？药物性肝损伤？临床病例讨论“发热、黄疸、心包积液”。中国医学论坛报2003年1月2日12版.自身免疫性肝炎？病毒性肝炎？临床病例讨论：“第12例─呕血、口干、眼干、粒细胞缺乏”。中华风湿病学杂志，2001，5：266-267.PBC、pSS肝损伤内科大查房：“发热待查”协和内科临床2004年3月第5卷第3期1-11.pSS、PBCAILD发病情况AIH西欧和北美地区患病率0.1-1.9/10万人占所有慢性肝炎的20%左右PBC西方国家患病率为10-20/10万人PSC欧美地区患病率至少为2-7/10万人，其中70%左右合并有溃疡性结肠炎一般认为,AILD好发于欧美白人，亚洲黄种人较少遗传背景：主要易感基因与HLADR2、DR3、DR4、DRw8、DR8相关近年的调查结果环境因素的恶化自身抗体谱筛查普及医生认识能力的提高在各个国家的诊断不断增加AILD临床诊断存在的困难AILD患者发病隐匿重叠综合征大量存在“金标准”组织病理的局限性缺乏诊断特异性自身抗体对疾病的认识有限?Theepidemiologyofprimarybiliarycirrhosis.ClinLiverDis.2003自身免疫性肝炎Autoimmunehepatitis，AIH自身免疫性肝炎（AIH）伴循环自身抗体和高免疫球蛋白血症，病因未明，呈慢性炎性坏死的肝脏疾病Waldenstrom1950年发现一种特殊类型慢性肝女性多见，伴有黄疸、丙种球蛋白明显升高和闭经后期常发展成肝硬化以往称之为“狼疮样肝炎”（lupoidhepatitis）：常伴有ANA及SMA阳性，部分病人可见LE细胞慢性进行性发展，病理变化呈慢性活动性肝炎改变1992年国际自身免疫性肝炎工作组（IAIHG）命名自身免疫性肝炎（AIH）自身免疫引起的肝细胞损伤的慢性肝脏疾病血清转氨酶↑，IgG↑，自身抗体阳性“界面性肝炎”,伴有淋巴细胞和浆细胞浸润坏死发病率:0.1-1.9/10万女性多发(75-85%)可发生于任何年龄~50%伴有其他自身免疫性并发症自身免疫性肝炎（AIH）肝活检：肝内胆小管显示散在肝细胞坏死自身免疫性肝炎（AIH）0510152025300-1010-2020-3030-4040-5050-6060-7070-8080-90age(years)number120名AIH患者的年龄分布C.Schrammetal.,AmJGastroenterol,2001自身免疫性肝炎（AIH）分型Ⅰ型AIH即经典型，最为常见，约占AIH的60-80%；ANA、ASMA为特征,抗SLA/LP抗体,pANCAⅡ型AIH主要发生余儿童，以抗LKM1、抗LC1阳性为特征,抗SLA/LP抗体根据自身抗体分型没有任何临床或治疗意义自身免疫性肝炎自身抗体谱AIH类型相关自身抗体阳性率(AIH)TypeIASMAANApANCAAnti-SLA/LP40-90%5-70%10-30%TypeIIAnti-LKM-1Anti-LC-1Anti-SLA/LP2-4%1-2%10-30%自身免疫性肝炎自身抗体谱抗核抗体（ANA）抗组蛋白抗体抗DNA抗体抗平滑肌抗体（SMA）抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM1）抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA）抗肝细胞质抗原I型（抗LC1）抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）抗去唾液酸受体抗体（抗ASGPR）抗肝膜抗原抗体（抗LMA抗体）抗肝特异性蛋白抗体（抗LSP抗体）抗胆管、胆小管抗体抗胃壁细胞抗体（PCA）抗线粒体抗体（AMA）抗板层素抗体（A/C）抗核抗体（ANA）anti-nuclearantibodies,ANA检测:IIF阳性率:5-70%靶抗原:多种(dsDNA20%)以DNA（单链和双链）和组蛋白（H3及核小体）为主AIH最常见自身抗体，Ⅰ型AIH75%阳性不具有诊断特异性常与ASMA同时出现（85%-90%）抗双链DNA抗体常见于AIH与PBC的重叠征AmJGastroenterol2009抗平滑肌抗体（SMA/ASMA）anti-smoothmuscleantibodiesASMA(ratstomach)Actin(HEp-2cells)检测:IIF阳性率:40-90%靶抗原:多种(F-actin)高滴度抗F-actin和ANA提示AIHSMA的靶抗原靶抗原种类丰富，主要为多种细胞骨架成分,可分为肌动蛋白（actin）和非肌动蛋白两大类Actin：单体/G及聚合体/F微丝(mirofilaments)抗F-actin（46KDa）F－actin与AIH关系密切，G－actin与酒精性肝硬化有关nonactin：vimentin结蛋白微管蛋白原肌球蛋白肌球蛋白肌钙蛋白—与感染性疾病、系统性自身免疫性疾病等有关检测方法：临床常规检测方法为IIF抗平滑肌抗体（SMA）临床意义见于多种肝脏疾病及非肝脏疾病，无诊断特异性对I型AIH诊断有重要意义高滴度SMA（1:160）诊断敏感性高达90％以F－肌动蛋白为靶抗原的SMA为AIH特异性抗体，在AIH中阳性率高达97％低滴度的靶抗原为非肌动蛋白的SMA（以IgM为主）可非特异性出现于多种疾病中（1:80）抗肝/肾微粒体抗体（抗LKM1抗体）检测:IIF，ELISA,Immunoblot阳性率:2~4%，儿童AIH靶抗原:细胞色素p4502D6丙型肝炎也会出现阳性(2-10%)anti-liver/kindreymicrosomaltype1antihodiesLKM(ratkidney)LKM(ratliver)抗LKM抗体与HCV感染的PBC相关AmJGastroenterol.2003Dec;98(12):2757-62.抗肝细胞胞浆抗原1型（LC1）抗体anti-livertytosolantigentype1antibodiesLC-1(liverrat)检测:IIFT，ELISA,Immunoblot阳性率:1-2%靶抗原:58-62KD的肝细胞胞液多肽蛋白，FTCD（亚胺甲基转移酶-环化脱氨酶）2型AIH,疾病活动性具有相关性抗可溶性肝抗原(SLA)抗体靶抗原：肝胰抗原,LP(Berg,1981)可溶性肝抗原,SLA(Manns,1987)SLA/LP(Wies,2000)UGA-抑制剂-丝氨酸-tRNA相关蛋白(Costa,2000)检测方法：IB、ELISA，IIF检测效果不佳临床意义：AIH血清学标志（约11-25%），原因不明肝炎约14%,无法解释的转氨酶升高仅出现于AIH,高特异性，100%预测值anti-solubleliversantigenantibodies血清n抗SLA/LP抗体阳性率自身免疫性肝炎,巴西13223(17.4%)自身免疫性肝炎,日本302(6.7%)自身免疫性肝炎,德国10821(19.4%)自身免疫性肝炎,美国14923(15.4%)AIH(竞争抑制性实验阳性)2823(82.1%)AIH(抗LKM-1抗体阳性)180原发性胆汁性肝硬化(PBC)321(3.1%)乙型肝炎病毒感染400丙型肝炎病毒感染390肝中毒损伤140非酒精性脂肪肝240健康的献血者2000抗SLA/LP抗体的阳性率抗SLA/LP抗体在中国AIH人群中阳性率低抗SLA/LP抗体在亚洲人群中阳性率低JournalofAutoimmunity21(2003)77–82抗去非唾液糖蛋白受体（ASGPR）抗体抗原特征：肝细胞膜表面肝特异性蛋白成分，一种跨膜蛋白检测方法：ELISA、RIA临床意义：AIH（50-88%），但也见于HBV和HCV，酒精性肝病，PBC等，阳性率10%左右。抗体与炎症活动性密切相关，可用于疗效观察anti-asialoglycoproteinrecceptorantihodies其它AIH相关抗体LSP(猴肝)LMA(猴肝)自身免疫性肝炎诊断的评分系统1992年国际自身免疫性肝炎研究组建立自身抗体阳性，高丙球蛋白血症，遗传标志，无病毒感染，免疫抑制剂治疗有效和女性等是最为重要的诊断指标总分评价:治疗前15，治疗后17可确定AIH治疗前为10-15，治疗后为12-17可能是AI