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阪崎肠杆菌研究进展龙道崎、邹妍、关郁芳、雷丹丹、边伟、胡鹏目录概述检测方法致病性预防和控制生物学特性阪崎肠杆菌概述阪崎肠杆菌(Enterobactersakazakii)属肠杆菌科，是人和动物肠道内寄生的一种周生鞭毛、能运动、无芽孢的革兰氏阴性菌，一直以来被称为黄色阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)，于1980年以日本细菌学家RiichiSakazakii的名字命名。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和败血症，近年来受到了研究者的广泛关注生物学特性阪崎肠杆菌属肠杆菌科肠杆菌属，具备肠杆菌基本形态特征：革兰阴性粗短杆菌，细胞大小为(0.6～1.1)×(1.2～3.0)um，有周身菌毛，无芽胞形态特征生物学特性菌落培养特性不高，能在普通营养琼脂、血平板、麦康凯(MAC)琼脂、伊红美兰(EMB)琼脂、脱氧胆酸琼脂等多种培养基上生长繁殖。在外界环境中比其他肠道杆菌生存率强，培养最佳温度25—36℃，在6～45℃下都能生长营养要求培养温度在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)、脑心浸液琼脂(BHI)及血平板上经25～36℃培养24h后，形成1.5～2.5mm的黄色菌落菌落培养特性菌落特征生物学特性在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)平板上划线分离，生长24h后菌落形态有2种：一种为典型的光滑型菌落，极易被接种环移动;另一种为干燥或粘液样，周边呈放射状，不易被接种环移动，似橡胶状有弹性。生物学特性阪崎肠杆菌与阴沟肠杆菌有31％～49％的DNA序列同源性，G+C含量为57％生理生化特性阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶表现为阳性,并缺少磷酰胺酶活性（区别于其它肠杆菌）具有产生吐温-80酯酶的能力(鉴定依据)阪崎肠杆菌还具有氧化酶阴性、过氧化酶阳性、D-山梨醇阴性和细胞外DNAse阳性等多种特征。抗性生物学特性耐干燥、渗透压耐酸性原因：阪崎肠杆菌细胞内含有大量的海藻糖酶，累积有大量的海藻糖，使得阪崎肠杆菌比其他肠杆菌更耐受渗透压和干燥。实验表明阪崎肠杆菌能在pH0.9～2下存活原因：可能与阪崎肠杆菌周身菌毛结构有关，菌毛结构易使细菌形成共生集合体，粘附在物体表面形成一层生物保护膜检测方法细菌学分离培养方法分子生物学方法经典方法：MPN计数法改良法：XαGLC选择性显色培养基法改良法：荧光选择性鉴别培养基法PCR方法实时荧光定量PCR方法XαGLC选择性显色培养基法α-葡萄糖苷酶水解XαGLC，释放糖苷配基5-溴-4-氯-吲哚，该糖苷配基在氧存在时形成色素溴-氯-吲哚，使菌落呈现特异性蓝绿色。在胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基中加入了5-溴-4-氯-吲哚-α-D-吡喃葡萄苷(XαGLC)作为发色基团，组成显色培养基（称为DFI琼脂）。利用阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶活性的检测方法原理实时荧光定量PCR技术探针可以与目的DNA片段特异地互补结合探针的一端标记荧光基团，另一端标记淬灭基团在探针未被DNA聚合酶破坏时，后者可以吸收前者的荧光；探针被破坏，淬灭基团不能吸收荧光基团所发荧光利用检测器检测荧光强度通过标准曲线进行定量分析基本原理是在PCR反应体系中加入一种探针分布及受污染食品阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，早在1974年从水，土壤、植物根茎、下水道、动物和人类排泄物中分离到阪崎肠杆菌。婴儿配方奶粉是新生儿阪崎肠杆菌感染的主要感染源阪崎肠杆菌的污染调查：分别从饼干巧克力类、方便面类、谷物类、儿童食品类、干果类和其他类食品中检出阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌不仅存在于奶粉中，而且在其它食品也存在阪崎肠杆菌的致病性阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种“条件致病菌”，由其引发的危害人群主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起成人局部感染。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、菌血症和坏死性小肠结肠炎，并可能遗留严重的神经系统后遗症，死亡率20％～50％。致病机制研究不多，尚不清楚。目前所知阪崎肠杆菌致病性可能与肠毒素和内毒素有关细菌内毒素（脂多糖），是构成革兰氏阴性细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性，能增加小肠上皮细胞通透性，促使细菌侵入肠壁中而致病。阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细胞毒效应，且菌株间的毒力作用有差异。阪崎杆菌的致病性预防与控制坚持母乳喂养选择检查合格的奶粉开水冲调婴幼儿配方食品，再次食用前应重新加热。制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则制定有效的环境监测计划建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径等进行调查研究控制预防谢谢！请各位指正与提问