BSL-2实验室安全要求2017

BSL-2实验室安全要求江苏省疾病预防控制中心史智扬：025-83759371:[e-mail]二Ｏ一七年一月十二日南京提纲实验室获得性感染法规标准概要生物安全知识要点设施设备要求主要防护装备管理要求简介良好工作行为实验室获得性感染实验室相关感染1951,1965,1976-SulkinandPike开展了一项关于实验室相关感染的调查调查了至少5,000家实验室共计3,921例大多数报告为以下感染:•肝炎•委内瑞拉马脑炎病毒•结核•布鲁菌病•伤寒•土拉菌病实验室相关感染1951,1965,1976-SulkinandPike20%的感染明确是源于事故。在报告的例子中，80%可能是因为暴露于具有感染性的气溶胶（没有被证实）。军团菌病，2003年，瑞典皮肤性炭疽病，2002年，美国德克萨斯州西尼罗病毒，2002年，2个病例,美国布病，2001年,2个病例,2006年,2个病例,美国流脑,2002年，英国,2个病例2006年，瑞典，1个病例牛痘2002年，巴西类鼻疽，2000年，美国近年来实验室相关感染微生物实验室感染原因—操作事故或违反操作规程引起占所有实验室感染的34%。—其次是动物实验和接触污染物引起。临床检验相关生物危险等级分布020406080100120140160180200病毒细菌真菌寄生虫一级二级三级四级生物安全管理法规标准概要病原微生物实验室生物安全管理条例2004年11月12日，国务院颁布，2005年5月12日实施第四条国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理。规定国家对病原微生物按危害严重程度分类管理根据不同的生物安全水平要求对实验室分级管理明确各部门职责原卫生部、农业部、质检总局加大了对实验室负责人的责任实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人（第三十二条）撤职、刑事责任（第六章，第五十六至六十九条）病原微生物实验室生物安全管理条例WS233（待发布）管理体系对责任的描述实验室设立单位的法定代表人负责本单位实验室的生物安全管理建立生物安全管理体系，落实生物安全管理责任部门或责任人定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项做出决策批准和发布实验室生物安全管理体系文件实验室生物安全管理责任部门负责……实验室负责人为实验室生物安全第一责任人，全面负责实验室生物安全工作……病原微生物实验室生物安全管理条例有关工作以国家标准为依据强制认可国家认可委第二十五条新建、改建或者扩建一级、二级实验室，应当向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门应当每年将备案情况汇总后报省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门配套文件《病原微生物名录》《高致病性病原微生物实验室（活动）管理办法》《高致病性病原微生物菌毒种运输管理规定》《病原微生物菌毒种保藏机构管理办法》《实验室生物安全通用要求》中华人民共和国国家标准（GB19489-2008）《生物安全实验室建筑技术规范》中华人民共和国国家标准（GB50346-2011）2012.5.1《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》中华人民共和国卫生行业标准（WS233－2002）2003.8.1《II级生物安全柜》中华人民共和国医药行业标准（YY0569-2011）2013.6.1《生物安全柜》中华人民共和国建筑工业行业标准（JG170—2005）2005.6.1国家标准及行业标准微生物危害程度分类第七条国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物微生物危害程度分类四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物实验室生物安全水平分级第十八条国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级、二级、三级、四级根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平（biosafetylevel，BSL）分为4级，I级防护水平最低，IV级防护水平最高以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物安全防护水平实验室生物安全水平分级WS233定义（待发布）关于实验室分级4.1.3生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物按照实验室是否具备机械通风系统，将BSL-2实验室分为普通型BSL-2实验室、加强型BSL-2实验室4实验室生物安全防护水平分级4.4实验室分类4.4.1操作通常认为非经空气传播致病性生物因子的实验室（如HIV实验室）4.4.2可有效利用安全隔离装置操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室（如生物安全柜内操作或采用通风笼、隔离器饲养动物）4实验室生物安全防护水平分级4.4实验室分类4.4.3不能有效利用安全隔离装置操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室（半开放式、开放式饲养动物）4实验室生物安全防护水平分级4.4实验室分类4.4.4利用具有生命支持系统的正压服操作常规量经空气传播致病性生物因子的实验室生物安全知识要点生物安全知识要点生物安全实验室三项技术措施一级屏障和二级屏障P3实验室与BSL-3实验室生物安全柜与超净台生物安全实验室与洁净实验室定义通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用（硬件）严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，确保周围环境不受其污染,确保实验因子保持原有本性所采取综合措施的实验室WS233定义（待发布）通过防护屏障和管理措施，达到生物安全要求的病原微生物实验室实验室生物安全（laboratorybiosafety）实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符合相关法规、标准等对实验室生物安全责任的要求（GB19489，WS233）生物安全实验室三项技术措施样品隔离技术（机械、气幕），防止传染因子进入环境接触人体定向流技术（三级负压系统），防止传染因子扩散消毒灭菌技术（物理、化学），灭活传染因子生物安全实验室一级屏障（primarybarrier）是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离如生物安全柜分3级-I、II、III级个体防护装备口罩、面具、眼镜，防护衣、帽、裤、鞋、靴、袜、手套、正压服等一级屏障一级屏障生物安全实验室二级屏障(secondarybarrier)生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离实验室的设施结构通风空调系统给水排水电气和控制系统二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流(过去)一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区实验室防护区（laboratorycontainmentarea）实验室的物理分区，该区域内生物风险相对较大，需对实验室的平面设计、围护结构的密闭性、气流，以及人员进入、个体防护等进行控制的区域（2008版增加的概念）生物安全实验室P3实验室与BSL-3实验室P1-P4(Physicalprotection)BSL1-4(Biosafetylevel)生物安全实验室操作者、合作者、辅助人员操作对象环境生物安全柜与超净台生物安全柜提供了对样品、人、环境的保护超净台仅提供对样品的保护Ⅱ级A2型生物安全柜气流组织½!BSC-II-A2型保护实验人员、实验对象和环境实验区有垂直层流前窗进风气流平均流速≥0.50m/s可向室内排风循环气流比例为70%正压污染区被负压区域包围ContaminatedairundernegativepressureContaminatedairunderpositivepressureHEPA-filteredairRoomair无外接风道有外接风道洁净实验室与生物安全实验室一些健康相关产品的检测标准提出了100级洁净度的要求，100级洁净实验室是必需的洁净实验室不能代替生物安全实验室生物安全实验室不允许正压洁净实验室仅提供了对样品的保护生物安全实验室有洁净度的要求，但要求不高传统无菌室简易型这种传统的无菌室为密闭小间由更衣间、缓冲间、无菌操作间以及相应的准备间所组成，为严密的结构屏障。培养平皿暴露30分钟进行检查，经过24-72h培养后生长的菌落数不超出3个即认为符合要求传统无菌室送风型(乱流洁净室）将经过玻璃纤维之类低阻力过滤器净化的新鲜空气以一定风速送入室内，对原有的空气进行稀释或置换，保持每小时换气15-20次，以达到净化目的外这类无菌室需要维持较高的正压，在严格的控制条件下，仅能接近十万级的净化水平乱流洁净室内可以设置洁净工作台。通常将洁净工作台设计制造成100级的净化水平，当原有室内洁净度达10万级时，空运转20~30min后即可达到100级的水平一般（非层流）洁净室示意图洁净实验室将净化的层流空气对整个房间进行净化处理的设施称为洁净室。空气由房间一侧墙面的通风净化系统沿水平方向通过操作空间，再由相对方向一侧墙面的栅格流出，经过天花板上夹层空隙回流或排放的形式，称为水平层流洁净室由天花板上夹层的通风净化系统将空气按照垂直方向自上而下通过操作空间，再经地板栅格下面的夹层空隙回流排放的形式则称为垂直层流洁净室洁净实验室层流洁净室都需要维持一定的正压进行操作，一般为12.5Pa，最高可为37.4Pa。垂直层流洁净室技术要求比较高微生物无菌操作，可采用装配式洁净室，国内已有产品供应，气流形式均为顶送侧回的垂直层流，有恒温恒湿型和普通型两种结构洁净度的等级分类洁净度的等级系以操作区内尘埃颗粒的大小和数目两项指标作为划分的依据美国联邦标准“洁净室与洁净工作台的环境标准”，以每28.32L空气中含有≥0.5μm的尘埃粒子数102颗、104颗、105颗作为等级的名称，即100级、10000级（7级）、100000级（8级）该等级已换算成国际单位的每升粒子数则为3.5颗、350颗、3500颗国际上常用的洁净等级表①对于浓度很小的测定值，除非有足够的大量取样提供确凿的数据，否则可靠性差设施设备要求6.1BSL-1实验室设施和设备要求6.1.1实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生6.1.12若操作刺激或腐蚀性物质，应在30m内设洗眼装置，必要时应设紧急喷淋装置6.1BSL-1实验室设施和设备要求6.1.13若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜6.1.20应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事故处理器材、急救器材等6.1.22必要时，应配备适当的消毒灭菌设备BSL-1实验室示意图安全设备（一级屏障）防护服装：实验服手套一级生物安全防护BSL-1安全设备（一级屏障）个人防护装备：面部保护,眼睛保护一级生物安全防护BSL-16.2BSL-2实验室设施和设备要求6.2.1适用时，应符合6.1的要求6.2.2实验室主入口的门、放置生物安全柜实验间的门应可自动关闭；实验室主入口的门应有进入控制措施6.2.4应在实验室工作区配备洗眼装