高致病性猪蓝耳病的流行现状与防控

高致病性猪蓝耳病流行现状与免疫防控进展遇秀玲中国动物疫病预防控制中心主要内容我国及周边国家高致病性PRRS流行状况高致病性PRRS疫苗研发和使用情况简介高致病性PRRS的诊断、鉴别诊断和免疫效果评价高致病性PRRS防控措施PRRSV在中国的流行我国流行的PRRSV均属于美洲型JXA12006HB-12002CH-1a1996高致病性PRRSV疫情--2009•2009年分离的14株HP-PRRSV全基因序列与2006年分离的HP-PRRSV代表株JXA1株全基因序列同源性为98%~98.9%，14株分离株之间的同源性达97.1%~99.7%，表明2009年不同地区HP-PRRSV分离株与JXA1株的亲缘关系密切。•2009年分离的14株HP-PRRSV形成一个新的关系紧密的独立分支，说明HP-PRRSV在我国猪群经过几年的遗传进化已逐步趋于稳定。2010年分离的8株HP-PRRSV全基因序列与2006年分离的HP-PRRSV代表株JXA1株全基因序列同源性为97.9%~98.3%，8株分离株之间的同源性达99.0%~100%，表明2010年不同地区HP-PRRSV分离株与JXA1株的亲缘关系密切。遗传进化分析发现2010年分离的8株HP-PRRSV与2009年分离的HP-PRRSV的亲缘关系最近，属于同一个分支。高致病性PRRSV疫情--20102007年越南HP-PRRS疫情分布省份DAH,AUGUST2007TrucksstopforrestingandwashingtransportedpigsPigmovement:North→South高致病性猪蓝耳病病疫情首次在越南北部于2007年3月广泛出现。至2008年3月份，疫情在越南中部暴发，致上万头猪死亡。2009年，尽管疫情稍微开始减弱，但从2010年开始至今，疫情又再度暴发并迅速在南部及北部蔓延。（越南农业暨农村发展部中央兽医诊断中心副主任苏隆成博士）2007年越南HP-PRRS疫情至2010年8月23日，高致病性猪蓝耳病疫情已蔓延至越南全国25个省。越南兽医局称，疫情主要集中在南部。由于现在的气候很适于疫情的传播，加上各地方生猪跨地区运输频繁，增加了疫情检验控制的难度，因此，未来高致病性猪蓝耳病疫情有发展成为大疫的可能。（《西贡解放报》8月23日报道）2010年越南HP-PRRS疫情2010年老挝HP-PRRS疫情2010年6月老挝首都万象发生猪病疫情，发病生猪以发热、皮肤和内脏出血、呼吸困难、神经麻痹以及怀孕母猪流产为特征性临床表现，发病率、死亡率高。对发病的8个养殖场（户）和1个屠宰场进行流行病学调查和样品采集，经实验室检测为HP-PRRSV阳性。对分别采集自不同养殖场的7份病料进行高致病性猪蓝耳病病毒全基因组测序，并与美洲型PRRSV经典代表毒株VR2332和HP-PRRSV代表毒株JXA1进行序列比对。2010年老挝HP-PRRS疫情结果相比于VR2332，7株病毒均为Nsp2基因存在30个氨基酸不连续缺失的HP-PRRSV变异株，相互之间同源性在99.8%以上，与HP-PRRSV代表毒株JXA1株的同源性为98.1%；将7株老挝病毒与中国2006~2010年期间不同年代、不同地点分离的代表毒株的全基因组进行进化树分析，结果表明不同地区分离的高致病猪蓝耳病病毒随着时间的延长，遗传进化逐步趋于稳定，且基因组进化速率相近。老挝代表团介绍猪病疫情现场流行病学调查（一）现场流行病学调查（二）高发病率、高死亡率肺部以实变为主的病理变化调查结果与分析万象省3个区的8个养殖场（其中2个规模场、5个半规模场和1个散养户）和1个屠宰场。生猪存栏量为4498头，其中公猪68头、母猪1448头、育肥猪1838头、仔猪1594头。母猪平均死亡率为31.9%、最高达53.3%；育肥猪平均死亡率为58.7%、最高达64.5%；仔猪平均死亡率为91.3%、最高达100%;公猪平均死亡率为6.3%、最高达50.0%。疫苗及诊断试剂捐赠仪式万象时报等老挝新闻媒体报道中国政府援助情况周边其他国家的流行情况据2009年OIE官方网站报道，除越南、老挝外，柬埔寨、缅甸、泰国、韩国、俄罗斯等国家也有发生高致病猪蓝耳病的报道。高致病性PRRS活疫苗（JXA1-R株）的安全性试验对仔猪的单剂量、单剂量重复和超剂量安全性试验对临床经典PRRS阳性猪群的单剂量和超剂量安全性试验对临床高致病性猪蓝耳病（变异株）阳性猪群的单剂量和超剂量安全性试验高致病性PRRS活疫苗（JXA1-R株）的效力试验最小免疫剂量试验最小免疫剂量为103.0TCID50/头份；免疫产生期试验免疫后2周部分保护，3周全部保护；免疫持续期试验持续期长达7个月，商品猪只需接种1次；效力试验免疫效力试验对猪瘟疫苗免疫的影响试验--蓝耳疫苗和猪瘟疫苗同时接种；--接种蓝耳疫苗后1周接种猪瘟疫苗。效力试验对临床经典PRRS阳性猪的效力试验对临床高致病性猪蓝耳病（变异株）阳性猪群的效力试验对经典PRRS毒株保护力试验保存期试验稀释后稳定性试验六省普免情况汇总表省份免疫的市(县、区)总数普免猪数（万头）总体评价湖北17个市中8个全部普免(32)1214.99安全性好。副反应低，临床应用效果好，免疫原性好，抗体持续时间长安徽8(32)占全省地市的47%197.58副反应小，免疫原性好江苏全省普免1125安全、有效广东15个地市内的各区县251.94四个厂家的疫苗总体安全，免疫效果比较理想湖南7（12）3.548安全性好，副反应低，试验猪群抗感染性较好，各企业苗之间无明显差异江西11个市的各县区614安全性较好，副反应轻微，能产生免疫效力合计3407.0586省试用结论与建议（一）安全性好，副反应低猪群经1头份和10头份免疫后均没有出现应激反应和过敏反应，个别有反应的猪群也是一过性的，1~3天便恢复正常。猪群的精神、食欲、体温及生长发育状况正常6省试用结论与建议（二）免疫应答好免疫后28天6省的抗体阳性率均在75％以上（77.2%~97.5%），且抗体水平较高。免疫后14、21、28、40、60、90、120天的抗体水平来看，随着免疫后时间的增加，抗体水平呈逐步上升的趋势。6省试用结论与建议（三）可监测疫苗毒并能与其他PRRSV进行鉴别免疫后21、28、40、60、90、120天检测疫苗毒，呈逐步下降趋势，28天检出率为41%，40天检出率为12.5%，60天检出率为零。由于该疫苗毒带有特殊的标记，可应用上述检测方法与其他PRRSV鉴别诊断，易于该疫苗的跟踪评价。6省试用结论与建议（四）临床使用效果好6省总体评价，该疫苗在各试验猪场免疫后，猪群健康状况良好。特别是在周边发生HP-PRRS疫情时，经该疫苗免疫猪群未见发病。基于活疫苗的临床使用效果良好，因此受到当地猪场和养殖户的普遍欢迎，为大范围推广使用奠定了基础。2010年高致病性猪蓝耳病免疫计划要求：对所有猪进行高致病性猪蓝耳病强制免疫疫苗种类：--高致病性猪蓝耳病活疫苗--高致病性猪蓝耳病灭活疫苗紧急免疫：对疫区、受威胁区的所有健康猪使用活疫苗进行一次强化免疫。最近1个月内已免活疫苗的除外。使用活疫苗和灭活疫苗的地区和场子应当适当分开，便于应用效果的评价2009-2010年六省JXA1-R株使用情况省份2009年（万头份）2010年（万头份）合计（万头份）湖北1515.341885.33400.64江苏2385.23213.0045598.204江西67511681843湖南127.21948.042075.24安徽249.5312.5562.5广东457.7110931550.71合计5409.959619.84415030.294备注：2008年年底存栏湖北：2462.4；江苏：1716.2；江西：1508.7湖南：3915.3；安徽：1432.4；广东：2380.4；2010年其他省份JXA1-R株使用情况省份2010年（万头份）省份2010年（万头份）河南4051.5天津2.708辽宁12.6海南35四川1533.6甘肃0.04新疆545河北43.9北京36.2福建411.4宁夏120.05上海92.1875浙江576.08黑龙江0.4内蒙古128.5广西400重庆413.874吉林300.3山东653.83青海省10陕西70.5山西150合计9587.67高致病性猪蓝耳病的诊断、鉴别诊断和免疫效果评价1欧洲型PRRSV与美洲型PRRSV的鉴别诊断PRRS病毒分为欧洲型与美洲型，目前在我国均有检出。因此，在检测结果为PRRS病毒阳性时，有必要对样品用能鉴别欧洲型PRRSV与美洲型PRRSV的荧光RT-PCR方法进一步做鉴别诊断。2经典PRRSV与HP-PRRSV的鉴别诊断目前我国主要流行的PRRSV为美洲型，但美洲型毒株又可分为以1996年在我国分离的CH-1a株为代表的经典PRRSV毒株和以2006年分离的HP-PRRSVJXA1株为代表的HP-PRRSV毒株。因此，在检测结果为美洲型PRRSV阳性时，有必要对样品用能鉴别经典PRRSV与HP-PRRSV的荧光RT-PCR鉴别诊断试剂盒进行检测。3HP-PRRSV与JXA1-R株疫苗的鉴别诊断在高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）应用于临床前，采用针对PRRSV（Nsp21594~1680变异株）的RT-PCR方法即可进行高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）的分子流行病学调查，但活疫苗应用于临床后，因疫苗毒也具有Nsp21594~1680变异株的特征，因此只有建立一种能针对疫苗毒的鉴别检验方法，才能将临床流行毒株与疫苗毒区分开来。针对高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）建立的荧光RT-PCR诊断方法可用于该疫苗（JXA1-R株）与包括HP-PRRSV野毒在内的其他所有PRRS病毒的鉴别诊断。4疫苗免疫效果评价—血清抗体检测美国IDEXX公司生产的PRRSVELISA抗体检测试剂盒，检测N蛋白抗体，阳性值出现早，消失快。因此，该试剂盒主要用于PRRSV感染后的早期诊断。法国LSI公司生产的PRRSVELISA试剂盒，检测糖蛋白抗体，阳性值出现较晚，持续时间可达5个月以上。因此，可用于疫苗免疫后的效果评价。高致病性猪蓝耳病的综合防控措施从2009~2010年高致病性猪蓝耳病疫情走势来看，疫情范围显著缩小，流行强度明显减弱，但病毒毒力依然很强，污染面仍然很广；2009~2010分离的30株HP-PRRSV经全基因序列测定和致病性实验证明，与2006年HP-PRRSV分离株JXA1株相比具有很高的同源性，且均为高致病性毒株；2010年高致病性猪蓝耳病疫情在一些地区可能呈点状爆发和散发，因此仍然是防控的重点。实验证明高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）免疫后能抵御2009年流行的HP-PRRSV强毒株的攻击，因此，高致病性猪蓝耳病是可防、可控的。高致病性猪蓝耳病的综合防控措施从目前养猪业的现状来看，可以说高致病性猪蓝耳病是造成我国猪病复杂而严重的罪魁祸首，猪蓝耳病病毒先感染肺部巨噬细胞，进而扩散至全身的单核细胞和组织巨噬细胞，从而破坏了猪的免疫功能，降低了猪的抵抗力，使猪易继发多种致病病原，提高了死亡率，也造成了猪病复杂、严重和难于进行临床诊断等现实问题。从我们在动物实验过程中看到的实验对照组临床症状和剖检病变，最易发生的继发感染主要为副猪嗜血杆菌等病原体，这也是在临床上保育和育肥前期最常见的疾病，因此可以说解决我国猪病复杂而严重的问题，核心是在保证猪瘟等正常免疫的基础上做好高致病性猪蓝耳病的防控。高致病性猪蓝耳病的综合防控措施从文献报道和我们的动物实验结果来看，猪蓝耳病的免疫具有明显的毒株相关特点。也就是说，疫苗毒所诱导的免疫能够抵御与其相对应的强毒的感染，但交叉保护与其同源性差异较大的强毒攻击的能力在有些毒株则较差。面对200