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精液品质检测1射精量射精量在采精后用带有刻度的小针筒测量。1-100μL的微量移液枪测定其体积。2精液颜色采集精液后观察精液的颜色。乳白色黏稠的精液为正常精液；粉红色为混入血液的精液；黄褐色为被粪便污染的精液；澄清透明为少精子或无精子的精液。3精液pH采用pH计测量其pH值4精子密度精子的密度采用血细胞计算法，计算每毫升精液中所含精子总数。将新鲜的精液用3%的NaCl溶液稀释200倍(可根据精液密度高低适度调整)，取200μL稀释好的精液滴于血细胞计数板的计数室中，在显微镜中计数5个方格（一般为四个角和正中的方格）精子数量。按照以下公式计算：精子密度（每升精液中所含精子总数）=5个方格中精子总数×5×10000×200。提前预热至37℃,此温度下精子活力最高[1]，吹打均匀。压在计数室边线上的精子计数时计头不计尾、计上不计下、计左不计右。用计数器记录技术室内5个中方格的精子总数。每个样本重复计数3次，每次计数重复3次。精子密度计算：1mL内精子数=5个中方格中精子总数/5×400×1000×50（稀释倍数）5精子活力取一滴37℃预热的0.9%生理盐水于载玻片上，然后加入一滴新鲜精液，混匀，盖上盖玻片，37℃条件下，在显微镜中观察，采用0~1.0的十级评分。按以下评分标准评分：精子呈漩涡翻滚状态可评为0.8~1.0，代表精子活力很高；多数精子呈直线前进，运动速度快可评为0.5~0.7，代表精子活力高；多数精子呈圆周运动，运动速度缓慢可评为0.3~0.5，代表精子活力低；多数精子摆动或漂浮可评为0.1~0.3，代表精子活力很差或死亡。精子活力是指直线运动的精子数与精子总数的比例。方法同精子密度测定，计算方法：精子活力=5个中方格中直线运动精子总数/5×400×1000×50（稀释倍数）6精子活率采用伊红-苯胺黑（eosin-nigrosin）一步法染色试剂盒（GMS14013，GENMED，S.U.A）检测精子活率。取50μL新鲜精液于1.5mL的离心管中，加入50μLGENMED染色液（ReagentA）,混匀，室温下孵育30min，取适量精液滴于载玻片上，用另一载玻片轻轻推开，置于空气中晾干，在光学显微镜中观察并计数，每个视野计数300个精子，粉红或红色染色的精子细胞为死亡的精子，而不染色的精子细胞为活体精子细胞。精子活率是指活精子数占单位总精子数的比值。用移液枪吸10μL精液与490μL的0.9%NaCl（提前预热至37℃）吹打均匀。用移液枪吸取10μL的精液稀释液和10μL的台盼蓝染色液于PCR管中，轻轻吹打混匀，静止3分钟后，用血球计数板计数，重复3次。活的精子细胞细胞膜结构完整，不被着色，而死细胞能够被染成蓝色。计算方法：精子活率（%）=未着色精子数/精子总数×100%。7精子畸形率精子形态采用“瑞氏-姬姆萨染色液”染色。在光学显微镜中观察并计数，每张涂片中观察计数300个精子的形态，分别统计形态正常活的精子数量、巨头精子数量、头部弯曲精子数量、弯尾精子数量和破损精子数量。精子畸形率是指畸形精子占精子总数的比值。畸形精子指头部、体部和尾部的非正常形态的精子（头部畸形包括头部过大或过小、顶体异常或空泡；体畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形包括过短、不规则、断裂或卷曲及多尾等[]）。吸取2μL精液加入到0.9%生理盐水（预热至37℃）中，充分混匀(用枪头吹吸，速度不宜太快，避免精子损伤)。用蜡笔将载玻片两侧密封，然后用移液枪吸取20μL混合液滴在载玻片上，并用盖玻片推片。用胶头滴管滴3-4滴无水乙醇，固定精子2-3min。参照快速瑞氏-吉姆萨复合染色试剂盒说明书，进行染色，观察并计数，计数重复3次。计算方法：精子畸形率(%)=畸形精子数/精子总数×100%。8精液质量因子（SQF）精液质量因子（SQF）计算公式如下：SQF=平均射精量（mL）×精子浓度（×106/mL）×形态正常活得精子率（%）。9数据的统计及分析数据分析采用生物统计软件SPSS16.0。