第二节消毒、灭菌教学目标1、掌握清洁、消毒、灭菌的概念2、掌握消毒灭菌的方法3、熟悉常见的清洁、消毒、灭菌工作一、概念:(一)清洁(cleaning):是指用物理方法清除物体表面的污垢、尘埃和有机物.目的:去除和减少微生物,但并非杀灭微生物。(二)消毒(disinfection):用物理或化学的方法清除或杀灭除芽胞以外的所有病原微生物,使其数量减少到无害程度的过程。(三)灭菌(sterilization):用物理或化学方法杀灭全部微生物,包括致病和非致病的微生物,以及细菌的芽胞的过程。二、消毒灭菌的方法消毒灭菌方法有两大类:物理消毒灭菌法和化学消毒灭菌法消毒灭菌方法物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法热力消毒灭菌光照消毒法微波消毒灭菌浸泡法喷雾法擦拭法熏蒸法干热湿热燃烧法干烤法煮沸消毒法压力蒸汽灭菌手提式压力蒸汽灭菌器卧式压力蒸汽灭菌器预真空压力蒸汽灭菌器日光曝晒紫外线灯管消毒电离辐射灭菌法臭氧灭菌灯灭菌注:每一种消毒灭菌的方法、特点、适用物品、注意事项都是掌握的重点。过滤除菌(一)物理消毒灭菌法(physicaldisinfectionsterilization)是利用物理因素作用于病原微生物,将之清除或杀灭,常用的方法有热力、光照、辐射、过滤除菌等。1.热力消毒灭菌法(heatdisinfectionsterilization)主要利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜,从而导致其死亡,是应用最早、效果可靠、使用最广泛的方法。分类:干热法(燃烧法、干烤法):由空气传导,传热慢。湿热法(煮沸消毒法、压力蒸汽灭菌法):由空气和水蒸气导热,传热快,穿透力强。1、热力消毒灭菌法-----干热法1)燃烧法定义:是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。特点:简单、迅速、彻底适用:1)无保留价值的污染物品,如废弃物、病理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等2)某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃变钝)。1、热力消毒灭菌法-----干热法1)燃烧法方法:1)金属器械可在火焰上烧灼20s;2)瓶塞或试管口在火焰上来回旋转2~3次3)搪瓷类容器可倒入少量95%的乙醇,慢慢转动容器,使其分布均匀,然后点火燃烧直熄灭4)无保留价值的物品可直接在焚烧炉内焚毁1、热力消毒灭菌法-----干热法1)燃烧法注意事项:1)注意安全:操作时远离易燃、易爆物品,如氧气、乙醚、汽油等。2)在燃烧过程中不能添加乙醇。3)贵重物品、锐利刀剪禁用。(2)干烤法定义:利用特制的烤箱,通电升温后进行灭菌。特点:热力传播和穿透主要依靠空气对流和介质传导,灭菌效果可靠。适用:在高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,如油剂、粉剂、玻璃器皿、金属制品等各类物品。灭菌条件为:160℃持续2h,或165℃持续1h或180℃持续30min注意事项:不适于纤维织物、塑料制品等的消毒灭菌1、热力消毒灭菌法-----干热法烤箱对物品的要求:高温下不变质,不损坏、不蒸发的物品,如油剂、金属制品、玻璃器具等。1)煮沸消毒法定义:是一种简单、经济的消毒方法。特点:简单、经济、方便。适用:耐热、耐湿、耐高温的物品,如金属、搪瓷、玻璃和橡胶类等。1、热力消毒灭菌法-----湿热法1)煮沸消毒法方法:将物品刷洗干净,全部浸没在水中,然后加热煮沸,水沸后开始计时。经5~10分钟可杀灭繁殖体,达到消毒效果,多数细菌芽胞需煮沸15分钟可将其杀灭(破伤风杆菌芽孢–60分钟;肉毒杆菌芽孢----3小时).将碳酸氢钠加入水中,配成1%~2%的浓度时,可提高沸点达105℃,增强杀菌作用,还可去污防锈。1、热力消毒灭菌法-----湿热法其温度不能杀灭芽胞,只能作消毒使用。煮沸消毒锅注意事项1、煮沸消毒前,应将物品刷洗干净,空腔导管须先在腔内灌水;2、玻璃器皿应用纱布包裹好后,从冷水或温水中放入,水沸后计时,消毒时间为10-15min;3、橡胶制品用纱布包好,待水沸后放入,消毒时间为5min;4、有轴节的器械或带盖的容器应将轴节或盖打开再放入水中,物品不宜放置过多,大小相同的碗、盆不能重叠,要保证物品各面都与水相接触;注意事项5、如煮沸途中加入物品,则在再次水沸后开始计时。6、水的沸点受气压影响,海拔高的地区气压低,水的沸点也低,需适当延长消毒时间。海拔每增高300m,消毒时间延长2min;7、较小的物品用纱布包好沉入水中。8、尖锐器械不宜用此方法,以免受热变钝。9、消毒后应用无菌器械将物品及时取出,置于无菌容器内。2)流通蒸汽消毒法方法:在常压下用100℃的左右的蒸汽消毒,从产生蒸汽后开始计时,15~30分钟即可达到消毒效果,常用于食具、便器的消毒。1、热力消毒灭菌法-----湿热法3)低温蒸汽消毒法将蒸汽输入预先抽空的压力蒸汽灭菌器内,并控制其温度在73~80℃,持续10~15分钟进行消毒,主要用于不耐高热的物品,如内镜、塑料制品和麻醉面罩的消毒。可杀灭大多数致病微生物。1、热力消毒灭菌法-----湿热法4)压力蒸汽灭菌法定义:利用高压下的高温饱和蒸汽杀灭所有的微生物及其芽孢。灭菌方法可靠,临床使用最广的一种方法。特点:是热力消毒灭菌中效果最为可靠、是物理灭菌法中最有效的方法。适用:耐高温、高压、耐潮湿物品的灭菌。如各类器械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液、药品、细菌培养等。1、热力消毒灭菌法-----湿热法4)压力蒸汽灭菌法方法:根据排放冷空气的方式和程度的不同,分为1)下排气式压力蒸汽灭菌:2)预真空压力蒸汽灭菌:1、热力消毒灭菌法-----湿热法分类下排气式压力蒸汽灭菌预真空压力蒸汽灭菌原理重力置换原理利用机械抽真空,形成负压压力102.97~137.3kpa205.8kpa温度121~126℃132℃消毒时间15~30min5~10min压力蒸汽灭菌法1)手提式压力蒸汽灭菌器:压力:103kPa,时间:15-30分钟,温度:121~126℃手提式压力蒸汽灭菌器卧式压力蒸汽灭菌器2)卧式压力蒸汽灭菌器:压力:103~137kPa,时间:15~30分钟,温度121~126℃预真空压力蒸汽灭菌器4)压力蒸汽灭菌法注意事项1、器械或物品灭菌前必须清洗干净并擦干或晾干2、灭菌包的体积不宜过大,用下排气式压力蒸汽灭菌器的物品包不大于30cm×30cm×25cm,用预真空压力蒸汽灭菌器的物品包不大于30cm×30cm×50cm。3、灭菌包放置合理,各包之间留有空隙(便于蒸汽流通、渗入包中央,排气时蒸汽迅速排除,保持物品干燥)布类物品放于金属、搪瓷类物品之上,以免蒸汽遇冷凝成水珠,使包布受潮,影响灭菌效果1、热力消毒灭菌法-----湿热法4)压力蒸汽灭菌法注意事项4、盛装物品的容器应有孔,消毒前将容器孔打开,以利于蒸汽进入;消毒完毕,关上蒸汽孔。5、被灭菌物品待干燥后才能取出备用;6、随时观察压力及温度情况;7、定期监测灭菌效果。1、热力消毒灭菌法-----湿热法压力蒸汽灭菌的效果监测1、物理监测法:用150℃或200℃的留点温度计。使用前将温度计汞柱甩至50℃以下,放入包裹内,灭菌后,检查其读数是否达到灭菌温度;2、化学监测法:主要是通过化学指示剂的化学反应,灭菌后呈现的颜色变化来辨别是否达到灭菌要求。化学指示胶带法、化学指示卡,在121℃、20分钟或135℃、4分钟后会改变颜色,根据其颜色及性状的改变来判断灭菌效果;1、热力消毒灭菌法-----湿热法灭菌前灭菌后消毒前消毒后B-D试验前B-D试验后压力蒸汽灭菌的效果监测3、生物监测法:是最可靠的监测方法,利用对热耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽孢指示管,使用时将10片菌片分别放于灭菌器四角及中央,待灭菌完毕,用无菌镊取出,再放入培养基内,在56℃温箱中培养48小时至一周,若全部菌片均无细菌生长则表示灭菌合格。1、热力消毒灭菌法-----湿热法2、光照消毒法又称辐射消毒,主要利用紫外线的杀菌作用,使菌体蛋白光解、变性而导致细菌死亡。(1)日光暴晒法(2)紫外线灯管消毒法2、光照消毒法(1)日光暴晒法日光有热、干燥和紫外线的作用,有一定杀菌力常用于:床垫、毛毯、衣服、书籍等物品的消毒方法:是将物品放在直射阳光下暴晒6h,定时翻动,使物品各面均能受到日光照射,达到消毒的目的2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法紫外线属电磁波辐射,根据波长可分为A波、B波、C波和真空紫外线。消毒使用的是C波紫外线,其波长范围为200nm~275nm,杀菌作用最强的波段为250nm~270nm。紫外线可杀灭多种微生物,包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体、芽孢等。常用的紫外线灯管15W、20W、30W、40W紫外线灯管:2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法1)作用机制1、破坏菌体蛋白质中的氨基酸,使菌体蛋白光解变性;2、使菌体DNA失去转化能力而死亡;3、降低菌体内氧化酶的活性,使氧化能力丧失4、使空气中的氧电离产生极强杀菌作用的臭氧2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法2)使用方法1、空气消毒:消毒前做好室内清洁卫生工作(紫外线易被灰尘微粒吸收而影响效果),关闭门窗,人员停止走动,每10m2安装30W紫外线灯管一支,有效距离不超过2m,照射时间为30~60分钟;2、物品消毒:消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡(紫外线穿透力差),有效距离为25㎝~60cm,照射时间为20~30分钟。3、液体消毒:可采用水内照射法或水外照射法,水层厚度应小于2cm,并根据紫外线的辐照强度确定水流速度。2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法3)注意事项1、由于紫外线辐照能量低,穿透力弱,应经常保持灯管清洁,灯管表面至少每2周用乙醇棉球擦拭一次2、由于紫外线对人的眼睛和皮肤有刺激作用,直接照射30s可损伤角膜或致皮炎,同时,照射过程中产生的臭氧对人体亦不利,故照射时人应离开房间,必要时戴防护镜,肢体用被单遮盖。2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法3)注意事项3、由于紫外线的穿透力差,消毒物品时应将物品摊开或挂起,并定时翻动,使其表面受到直接照射;4、紫外线消毒的适宜温度为20℃~40℃,适宜湿度为40%~60%;5、紫外线的消毒时间须从灯亮5~7min后开始计时,照射后病室要通风换气。关灯后如需再开启,应间歇3~4min。2、光照消毒法(2)紫外线灯管消毒法3)注意事项•6、紫外线灯使用过程中由于其辐照强度逐渐降低,为保证消毒效果,故应定时检测灯管强度(一般3~6个月一次),如灯管照射强度低于70μW/cm2时应更换,或建立使用登记卡,记录使用时间,凡使用时间超过1000h需更换灯管。•7、定期进行空气培养,以监测灭菌效果。普通移动紫外线灯消毒车C波段移动紫外线灯消毒车家用紫外消毒线灯监测:1)紫外线强度测定仪:将其放置在紫外线灯管1m处中央位置,开灯照射5min,仪表所示数值即为紫外线强度值,若强度低于70μW/cm2时应更换灯管。2)紫外线光敏涂料指示卡:将指示卡置于离紫外线灯管1m处中央位置,照射1min,根据指示卡颜色程度与标准色比较,可测知紫外线照射强度是否达到要求。3)建立使用时间记录卡:凡使用时间超过1000h需更换灯管。紫外线强度分析仪紫外线强度监测仪使用方法:将其放置在灯下照射,观察指针所指刻度,若强度低于70μW/cm2时应更换灯管。3)臭氧灭菌消毒臭氧灭菌灯臭氧发生器2、光照消毒法(3)臭氧灭菌灯消毒法臭氧在常温下为强氧化剂,稳定性极差,易爆炸,主要依靠强大的氧化作用杀菌,可杀灭细菌繁殖体、病毒、芽孢、真菌,并可破坏肉毒杆菌毒素。(补充)灭菌灯内装有臭氧发生管,在电场作用下,可将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、物品表面等的消毒。方法:关闭门窗,人员离开,打开开关20分钟,(杀灭芽孢40分钟)。消毒后30分钟,人方可进入。2、光照消毒法(3)臭氧灭菌灯消毒法注意事项1、为保证消毒效果,使用时需关闭门窗;2、臭氧对人有毒,国家规定大气中允许浓度为0.2mg/m3;3、由于臭氧的强氧化性,对多种物品都有损坏;4、温湿度、有机物、pH等多种因素可影响臭氧的杀菌作用;5、空气消毒时,人员必须离开,待消毒结束后30min可进入。3、微