携氧载体---聚合血红蛋白心脏保护作用的研究

携氧载体---聚合血红蛋白心脏保护作用的研究汇报人：周荣华研究背景心肌缺血再灌注损伤是影响心脏移植术后心脏功能以及病人预后的重要因素现有器官保存液均不含有可以携氧的递质虽然已经有含血保存液的研究，具有局限性：在4℃低温下携氧释氧功能急剧下降；而且低温时全血中红细胞对微循环的灌注也不甚理想血液代用品：研究及应用前景血红蛋白类携氧载体Hemoglobin-basedoxygencarriers(HBOCs)无血型良好的携氧释氧能力粘滞度低体积远小于正常红细胞优点血液代用品HBOCs现有问题：肾毒性，冠状动脉和脑血管痉挛，胃肠道副反应，胸痛腹痛等PolyHb的优点：分子量在64～600KDa磷酸吡哆醛（PLP）进行分子内修饰戊二醛（GDA）进行分子间交联实验方案目的：探讨含有PolyHb（0.5gHb/dL）的St.Thomas液对8小时冷藏保存心脏的保护作用，观察其对复灌期心脏功能的改善情况随机对照实验研究研究对象及分组：成年雄性SD大鼠80只(250～350g)，随机分为sham组、PolyHb组、自体血（Self-blood）组和St.Thomas液（STS）组，每组20只离体心脏灌注与保存实验流程LangendorffLangendorff心脏功能LVDP+dp/dt-dp/dtComplianceCF心肌酶学CKLDH心肌梗死面积病理学TTC染色HE染色检测指标统计分析数据以均数±SEM表示各组间LVDP、±dp/dt、CF和HR恢复率,CK、LDH及TTC染色结果比较用重复测量的ANOVA，组间差异用Bonferroni检验，P0.05为有显著性差异左室顺应性曲线比较用线性回归进行分析LVDP恢复率与CF恢复率的相关性，采用线性回归分析实验结果心脏功能LVDP、±dp/dt、CF恢复率左室顺应性LVDP恢复率和CF恢复率进行线性回归分析心肌坏死心肌梗死面积CK和LDH释放量病理学变化各组LVDP比较**P0.01vs.STS组；‡P0.01vs.sham组；δP0.05vs.Self-blood组图2：＋dp/dt、＋dp/dt比较**P0.01vs.STS组；‡P0.01vs.sham组；δP0.05vs.Self-blood组基础状态和复灌30分钟时各组心脏的左室顺应性曲线**P0.01vs.STS组；‡P0.01vs.Baseline；δP0.05vs.Self-blood组CF恢复率比较**P0.01vs.STS组；†P0.05vs.sham组复灌120分钟时各组心脏LVDP恢复率和CF恢复率的线性回归分析基础灌注30分钟和复灌120分钟时各组心脏的CK、LDH释放量**P0.01vs.STS组；‡P0.01vs.sham组复灌120分钟各组心脏的心肌梗死面积。图上部是各组心脏有代表性的TTC染色结果；图下部是各组心脏心肌梗死面积占总面积的百分比。**P0.01vs.STS组；‡P0.01vs.sham组；δP0.05vs.Self-blood组。复灌120分钟后各组心脏有代表性的HE染色图片（n＝5）。箭头所指的是心肌细胞的细胞水肿、脂肪样变性或玻璃样变性。讨论含有PolyHb（0.5gHb/dL）St.Thomas液能减轻8小时冷藏保存心脏的缺血再灌注损伤：增加再灌注期心功能恢复，减少心肌酶的释放和心肌细胞病理学变化HBOCs会吞噬内皮上的NO，从而引起血管痉挛和系统高血压反应，但是PolyHb通过对血红蛋白进行分子间和分子内的交联而增大分子量，降低解聚，减少血红蛋白聚合体通过内皮屏障可能作用机制：PolyHb恢复缺血再灌注损伤引起的氧化硝化失衡结论本研究证实0.5gHb/dL浓度的PolyHb能明显提高冷藏保存和再灌注损伤心脏心功能的恢复，降低心肌梗死面积，减少心肌酶的释放和心肌细胞病理学变化，有明显的心肌保护作用。