精液的常规检测精液检查的意义精液的组成精液的检查方法精液报告单的解读精液检查的意义评估男性生育功能,提供不育症诊断和观察疗效的依据辅助诊断男性生殖系统疾病输精管结扎技术计划生育科研法医学鉴定体外受精婚前检查精液的组成精液精子(5%):产于睾丸,熟于附睾精浆(95%)60%来自精囊30%来自前列腺5-10%来自附睾等其它部位标本采集:禁欲3~5天,采集前先排净尿液,摄入量全部排入洁净、干燥的容器。标本运送:保温(20~40℃)送检,时间1小时。采集次数:每隔1~2周检查1次,连续2~3次。精液的检查方法理学检查化学检查免疫学检查微生物检查功能检查显微镜检查计算机辅助精子分析抗精子抗体金葡、大肠埃希菌、淋球菌、支原体、衣原体等。低渗肿胀实验精浆的果糖、α-葡糖苷酶、乳酸脱氢酶同工酶、酸性磷酸酶外观、精液量、液化时间、粘稠度、酸碱度涂片检查CASA理学检查液化前:微浑浊灰白色液化后:半透明乳白色红色血精:前列腺炎、精囊炎、结核、肿瘤等黄色脓性精液:前列腺炎或精囊炎2-6ml1ml或者8ml方法:37℃水浴中,每5min中检查一次。枸橼酸与液化时间长短相关。30min60min,提示前列腺炎方法:直接玻棒法和粘度计法与凝固酶相关增加:影响精子液化、活力、穿透力。下降:先天性无精囊腺、精子浓度低或无精子方法:PH试带或酸度计,1小时内完成PH7.2—7.87.0伴少精症:输精管阻塞、先天性精囊缺如等7.8:急性前列腺炎、精囊炎、附睾炎化学检查精浆的果糖方法:间苯二酚比色法、吲哚显色法意义:先天性精囊腺缺如、精囊炎、精囊阻塞、射精阻塞时果糖减少。α-葡糖苷酶方法:比色法测活性,葡萄糖氧化酶法测生成量意义:阻塞性无精子症时α-葡糖苷酶活性下降具有诊断意义。乳酸脱氢酶同工酶方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳法、酶联染色法、光度计扫描法意义:精子减少时,LD-X的活性下降。酸性磷酸酶方法:速率法β-硝基酚法意义:增高:前列腺癌症和前列腺肥大时减低:前列腺炎免疫学检查抗精子抗体检测混合抗免疫球蛋白实验(MAR)≥50%的精子与颗粒黏附,可能为免疫性不育10%~15%的精子与颗粒黏附,可疑为免疫性不育精子凝集实验(SAT)SAT阳性提示血清、生殖道分泌物中存在AsAb免疫珠实验(IBT)IBT黏附率≥20%为阳性,≥50%有临床意义原理:观察精子在低渗溶液中尾部形态变化,以检测精子膜的完整性。方法:将精子装入低渗溶液中,相差显微镜观察100~200个精子,计算肿胀率。分类:a型—未出现肿胀b型—尾尖c型—尾尖弯曲d型—尾尖伴弯曲e型—尾弯曲f型—尾粗短g型—全尾部参考值:g型精子肿胀率>50%意义:体外精子膜功能和完整性评估指标。不育症患者肿胀率明显降低。精子功能检查显微镜检查精子计数粗略计数法:取1滴液化后的精液于载玻片上,加盖片放置片刻后,高倍镜下5个视野,取平均数×109即精子数。精确计数法:血细胞技术板计数、Makler精子计数板、计算机辅助精液分析。精子涂片检查精子活动率精子活动力精子存活率精子形态学检查:涂片染色检查和相差显微镜检查。涂片检查精子存活率:取1滴液化后的精液于载玻片上,加染色液混匀,放置片刻,计算高倍镜下100个精子中不着色精子的百分率。≥75%精子活动率:取1滴液化后的精液于载玻片上,加盖片放置片刻后,高倍镜下至少观察100个精子,计算有活动能力的精子占全部精子的百分率。≥70%精子活动力:取1滴液化后的精液于载玻片上,加盖片放置片刻后,高倍镜下至少观察100个精子,计算各级活动率的百分率。a级:精子呈前向运动b级:精子运动缓慢的前向运动c级:非前向运动或精子活动呆滞d级:精子不动a级>25%或者a+b>50%计算机辅助精子分析精子活动率精子运动轨迹精子活动力其它精子总数精子运动速度原理:通过计算机视频技术,通过一台与显微镜相连的录像机,确定、跟踪单个精子的活动,计算精子的运动学参数。精液报告单的解读CASA常见概念VSL直线速度:根据精子头在开始检测时的位置与最后所处位置之间的直线运动的时间平均速度。VCL曲线速度:精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。VAP平均路径速度:精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。ALH精子头侧摆幅度:精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。最大值or平均值表示MAD平均移动角度:精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均绝对值。BCF鞭打频率(Hz):精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。WOB摆动性:精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。VAP/VCL。LIN直线性:曲线轨迹的直线性。VSL/VCL。STR前向性:空间平均路径的直线性。VSL/VAP。如何使用CASA出报告CASA分析仪能够识别活动精子(推荐使用相差显微镜),最适宜应用于精子动力学的分析。在使用CASA分析仪检测精子运动参数时,每份标本至少要分析达到5个视野和200条以上活动精子的运动轨迹,最好是10个以上的视野和400条以上活动精子的运动轨迹(目前国内已有自主研发的精子分析仪,一份标本分析两次,每次至少分析200个精子,两次分析结果通过统计学的95%可信区间才可以出报告)。每个标本中分析的精子数目应标准化。CASA分析仪应当链接到那些能进行数据整合和统计学分析的计算机软件。CASA分析仪的影响因素CASA检测浓度的因素:(1)精子体积必须精确测量(称重法);(2)精液要完全液化,取样前要重新充分混匀;(3)计数板的间隙要准确、底板和盖玻片之间的平行度要好,并经常按质控要求定期检查,计数板之间的一致性要达到能够互换的要求。稀释要求:对高精子浓度的精液应该进行稀释。精子浓度过高(50百万个/ml)可能会出现高频度的精子碰撞,被碰撞的精子发生位移,撞击者则可能别仪器重新识别,由此产生的误差,使仪器检测的结果偏高。浓度越高,这种误差越大。