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第二十章脑脊液标本的细菌学检验概述•正常人体脑脊液是无菌的•细菌性脑膜炎属于临床医学急症•引起脑脊液感染的常见菌有–革兰阴性菌–革兰阳性菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阴性菌•脑膜炎奈瑟菌•卡他布兰汉菌•流感嗜血杆菌•肠杆菌科•非发酵菌•类杆菌属•多杀巴斯德菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌(1)•金黄色葡萄球菌•凝固酶阴性葡萄球菌•肺炎链球菌•B群链球菌•A群链球菌•肠球菌属•消化链球菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌(2)•结核分枝杆菌•产单核李斯特菌•炭疽芽胞杆菌•产气荚膜梭菌引起脑脊液感染的常见菌革兰阳性菌(3)新型隐球菌假丝酵母菌属标本的采集和运送标本采集指征•发热•头痛•恶心•呕吐•颈项强直和反射增强标本的采集和运送采集方法•经腰椎穿刺获得•从Ommaya管采集标本的采集和运送标本的运送•采集标本后在常温下立即送检•不可置冰箱冷藏或低温保存标本的验收、培养、分离和鉴定标本的验收•培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染•培养瓶上是否有标签•培养瓶上的标签与申请单是否相符•脑脊液是否足量，并在申请单上注明标本量革兰染色标本的验收、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（2）•抗酸染色–4000rpm离心30min，沉淀物涂片抗酸染色或金胺“O”染色抗酸染色标本的验收、培养、分离和鉴定标本的显微镜检查（3）•墨汁染色–3000rpm离心10~15min，沉淀物涂片墨汁染色墨汁染色标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（1）•需氧培养–血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯或EMB、营养肉汤–5~10%CO2孵育标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（2）•厌氧培养–血琼脂、PEA或CAN、厌氧肉汤–厌氧气体孵育标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（3）•真菌培养–沙保弱葡萄糖琼脂30ºC孵育标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（4）•选取平板上生长的菌落作革兰染色，根据染色结果作细菌的初步分群–根据初步分群的结果进行种的鉴定标本的验收、培养、分离和鉴定标本的培养、分离和鉴定（5）•也可根据革兰染色结果直接将分离株种入各种商业鉴定板进行鉴定报告及解释阳性结果报告•初级报告–涂片或培养阳性应立即电话报告•最终报告–报告细菌种属名–报告标准抗生素敏感试验结果报告及解释阴性结果报告•普通培养两天–48h培养未见细菌生长•疑特殊致病菌感染时，需延长培养时间