河北科技大学药物检验工第06讲 典型药物检验

第一部分维生素类药物的分析维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物资。人体不能合成维生素。第一节概述1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A。1922年-维E被发现。1928年-科学家发现维B至少有两种类型。1933年-维E首次用于治疗。1948年-大剂量维C用于治疗炎症。1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症。1954年-自由基与人体老化的关系被揭开。1957年-Q10多酶被发现。1969年-体内超级抗氧化酶被发现。1970年-维C被用于治疗感冒。1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。返回人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。例如：VA——夜盲症VB1——脚气病VD缺乏——佝偻病VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。分类按溶解性分654321OOHHOOCOHHCH2OHL－抗坏血酸第二节维生素C维生素C的分析结构特点二烯醇结构，有强还原性C3显酸性，可成钠盐具共轭双键，有紫外吸收两个手性碳，有旋光性水中易溶，有糖类性质一、结构与性质（一）溶解性1、易溶于水O二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构（二）还原性OHOHCCOOCCCH2OHOOOOCOHHCH2OHCHHOCHOHCOCOCOONaHH+OH-有活性有活性无活性OHOOCOHHCH2OHHO[O]显色糠醛衍生物糠醛酚类脱水H△糖类的显色反应蓝色糠醛吡咯脱水HVitC50℃结构与糖类相似（三）具糖的性质OOHHOOCOHHCH2OH123456C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.57（四）酸性（一元酸）OOHHOOCOHHCH2OH123456L(+)－抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）（五）光学活性**与碱反应单钠盐32CONa酮酸盐水解NaOH（六）水解性OHOOCOHHCH2OHHOOHOOCOHHCH2OHNaOCOONaOCOCCHOHHOCHCH2OHNa2CO3NaOH单钠盐酮酸盐（一）与氧化剂的反应二、鉴别试验OHOOCOHHCH2OHHOCH2OHOOOOCOHH]O[去氢抗坏血酸]O[VitC（银镜）黑AgAgNOVitC1、与AgNO3反应(ChP2005)维生素C被氧化，硝酸银被还原成黑色银沉淀2、与2，6-二氯靛酚反应(ChP2005)二氯靛酚被还原成无色无色二氯靛酚，VitC62氧化型玫瑰红色H还原型蓝色OHˉNClHOClONClHOClOHH（玫瑰色：酸性）（无色）3、使高锰酸钾褪色4、与碱性酒石酸铜作用，产生红色氧化亚铜沉淀（二）利用糖类性质或盐酸50℃吡咯蓝色糠醛戊糖脱水三氯醋酸VitC（三）UV法（BP）溶于0.01mol/LHClnmmax243585~545%11cmE（四）IR法（ChP2005）三、杂质检查1、澄清度与颜色——控制氧化变色产物，以测定一定波长下吸光度控制有色杂质原料——溶液应澄清无色，若有色，在420nm处测定吸光度，不得过0.03片剂——在440nm处测定吸光度，不得过0.07注射剂——在420nm处测定吸光度，不得过0.062、铁、铜离子——采用原子吸收分光光度法测定IIVitCH去氢抗坏血酸2指示剂：淀粉指示液1、原理维生素C分子中的烯二醇基具有还原性，能被I2定量的氧化成二酮基（一）碘量法四、含量测定OOCOHHOOCH2OHHI2+OHOOCOHHCH2OHHOH+I取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O62、操作方法（1）酸性环境：HCl（2）新沸冷H2O：赶走水中O2减慢VitC被O2氧化速度3、讨论（3）立即滴定：减少O2的干扰（二）2，6-二氯靛酚钠滴定法法（USP、JP）原理酚亚胺2，6-二氯靛酚VitC1、碘量法测定维生素C的含量是利用维生素C的(D)A．碱性B．酸性C．氧化性D．还原性E．水溶性Vc与氧化剂的典型鉴别反应碘量法测定维生素C要点（1）酸性环境：HCl，减慢VitC被O2氧化速度（2）新沸冷H2O：赶走水中O2（3）立即滴定：减少O2的干扰第二部分芳酸类药物的分析RCOOH羧酸COOH芳酸常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类COOHOH水杨酸（pKa2.98）COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?双水杨酯?COOHOOOH贝诺酯OCOCH3COONHCOCH3苯甲酸类苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONaCH2H2NCOOH氨甲苯酸HOCOOC2H5羟苯乙酯COOHSO2(CH3CH2CH2)2N丙磺舒（pKa3.4）NH(CH2)3CH3H2NO2SCOOHO布美他尼其他芳酸类药物ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯SO3HOHHOHNC2H5C2H5·酚磺乙胺阿司匹林AcetylSalicylicAcidONaCO2加压，ONaCOONaOHCOOHH+OH-CO2副产物SACOOHOCOCH3(CH3CO)2OH2SO4,70~75C。ASA一、Aspirin生产工艺二、结构与性质1、结构COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）2、性质（1）物理性质为固体，具有一定的熔点分子结构中具有苯环和特征官能团，均具有紫外和红外特征吸收光谱溶解性：微溶或几乎不溶于水，而溶于有机溶剂。（2）化学性质酸性：具游离羧基，属中等强度的酸或弱酸；（酚羟基：与FeCl3显色反应）酯键：阿司匹林有酯键，可在碱性条件下水解，产生对人体有害的水杨酸二、鉴别试验（一）FeCl3反应具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物紫堇色铁配位化合物～6pH43FeClOHArOHR直接：水杨酸间接（碱水解后）：阿司匹林（二）水解反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸CONa32（四）UV、IR苯环和特征官能团三、特殊杂质检查1、阿司匹林中特殊杂质检查（1）溶液的澄清度：检查碳酸钠试液中不溶物，主要是生产过程可能引入的苯酚类和酯类。（2）游离水杨酸：杂质来源：原料残存（生产过程中乙酰化不完全）；水解产生（贮存过程中水解产生）检查方法：对照法反应原理：三氯化铁反应限量：原料药：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓剂：1.0%（HPLC法）（3）易炭化物：检查被硫酸炭化呈色的低分子有机杂质。四、含量测定（一）酸碱滴定法1、直接滴定法溶剂：中性乙醇指示剂：酚酞指示剂滴定液：0.1mol/mlNaOH滴定液终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolS中性乙醇COOHOCOCH3NaOH20℃以下COONaOCOCH3H2O中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解本法特点：简单注意点：1、若SA不合格，不宜采用本法2、方法1简单快速，但是终点会不太明确Aspirin丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法2、水解后剩余滴定法USP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4OCOCH3COOH2NaOHH2OOHCOONaCH3COONa2NaOHH2SO4Na2SO42H2O3、两步滴定法Two-steptitration重点适用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂水解产物水杨酸SAHAcHOCCOOHCH2COOHCH2COOH枸橼酸CitricacidHOCHCOOHCHCOOHHO酒石酸Trataricacid为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法两步滴定法适用范围：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、氯贝丁酯反应步骤：第一步中和所有酸酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O第二步水解，滴定（四）HPLC阿司匹林栓剂的RP-HPLCChP（2005）：①色谱条件：固定相——ODS；流动相——甲醇-0.1%二乙胺水溶液-冰醋酸（40：60：4）；检测——280nm；内标——咖啡因；理论塔板数2000以上。4、双相滴定法Titrimetryintwophases（重点）Ch.P2005用于苯甲酸钠的测定苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断。因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法。可在水中加入与水不相容的有机溶剂在分液漏斗中滴定，这样滴定中产生的苯甲酸转入有机相中，使滴定终点明显，清晰苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONaHClHCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙橙红色利用苯甲酸溶于有机溶剂（如乙醚）这一性质，在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂，在滴定过程中将生成的苯甲酸不断萃取入有机相，减小苯甲酸在水相中的浓度，提除反应生成物苯甲酸，并减少苯甲酸的解离，使滴定反应进行完全，同时也避免了苯甲酸在瓶中析出影响终点的观察。终点清晰。苯甲酸钠双相滴定法测定含量：取本品1.4500g，精密称定，置分液漏斗中，加水25ml、乙醚50m1及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5050mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显橙红色。分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中，加乙醚20ml，继续用盐酸滴定液（0.5050mol/L）滴定，边滴定边振摇，至水层显持续的橙红色。消耗盐酸滴定液18.98ml。已知每1ml盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的苯甲酸钠（C7H5NaO2）。计算百分含量？消耗盐酸滴定液（0.5050mol/L）共18．98ml已知每1ml盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的苯甲酸钠（C7H5NaO2），18．98ml0.5050mol/L折合为0.5mol/L相当于：18.98*0.5050/0.5=19.1698ml相当于苯甲酸钠：19.1698*72.06=1381.376mg=1.381376g=1.381本品1.4500g,含量为：1.381/1.4500=95.2%维生素C鉴别阿司匹林两步法测定苯甲酸钠双相测定:原理、步骤、仪器、计算例1.鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾C例4.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（）A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点E.有利于第二步滴定B1、阿司匹林在生产中，由于乙酰化不完全或贮藏中水解产生对人体有害的物质。水杨酸测定阿司匹林片及肠溶片含量时，为了避免枸橼（元）酸、水杨酸、醋酸等干扰应选用（D）。A.直接酸碱滴定法B.水解酸碱滴定法C.双相酸碱滴定法D.二步酸碱滴定法例3.苯甲酸钠的含量测定，中国药典（2005年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（）A.水—乙醇B.水—冰醋酸C.水—氯仿D.水—乙醚E.水—丙酮D例2.双相滴定法可适用的药物为（）A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠例3.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（A）A.防止反应产物的干扰B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化C.消除