正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定

1正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定中国医科大学药学院药理教研室孙也之1.掌握家兔动脉插管的手术过程；2.熟悉磺胺嘧啶钠血药浓度测定原理与测定方法；3.了解药动学参数的计算方法。Ⅰ.实验目的Ⅱ.实验药品:1.20%磺胺嘧啶钠2.30mg%磺胺嘧啶钠（标准液）3.5%三氯醋酸4.0.5%麝香草酚（用20%NaOH溶液配制）5.0.5%亚硝酸钠6.2N盐酸7.1%肝素（1ml/kg）8.20%乌拉坦（5ml/kg）Ⅲ.实验动物家兔，2.0～2.5kg.Ⅳ.实验设备1.家兔操作台2.手术器械手术刀大镊子止血钳弯头小镊子眼科剪刀玻璃钩Ⅳ.实验设备：3.动脉插管4.722型可见光分光光度计Ⅳ.实验设备：5.离心机Ⅴ.实验步骤：1.取家兔，称重，通过耳缘静脉给20%乌拉坦(5ml/kg).耳缘静脉注射如何确定家兔已经被完全麻醉呢?家兔同时出现以下三种体征:1.肌张力减弱；2.呼吸速率逐渐减慢；3.角膜反射消失。2.颈动脉剖开①固定家兔头部、绑四肢；②用弯剪清理颈部毛发；③沿家兔解剖学正中线摸到颈部甲状软骨，用手术刀沿甲状软骨向下切开颈部皮肤5-7cm，血管钳钝性分离，暴露气管；④游离气管一侧的颈总动脉，与周围组织及迷走、交感神经分离；⑤为了防止凝血，由耳缘静脉注射1%肝素（1ml/kg）；⑥颈总动脉下穿过两根手术线，一根线头端结扎，另一根线备用，心端用动脉夹夹住。⑦眼科小剪刀近头侧结扎处下剪小口，插动脉插管，结扎，固定。3.空白血样品收集：从动脉插管放空白血0.5ml，用离心管收集，并摇匀。4.给药：向一侧耳缘静脉内注入20%的磺胺嘧啶钠（1ml/kg）5.血样品收集：在给药后每个时间点收集0.5ml血样。时间点：1、3、5、15、30、60、90、120min。※每次取血前，要先放2滴血再取，以免不同时间点的血样间产生污染。注意事项①动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素（1ml/kg）。②采血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残血放掉。③每吸取一个血样时，必须更换枪头；加样时枪头不要碰到三氯醋酸液面。④将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。⑤加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱。⑥注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配、取药液要准确。⑦离心时要注意离心管的配平。⑧注意严格按照722型分光光度计操作方法进行操作。Ⅵ.试管实验本实验测定磺胺嘧啶钠的原理：显色原理：磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类化合物（-NH3+），进而与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐（-N=N+-）。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸光度，通过与标准品吸光度的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：偶氮染料（橙红色）麝香草酚重氮盐磺胺药NaOHNaNOHCl2度）吸光给药前测定管度吸光（给药后测定管度吸光标准管浓度mg%管标准血浆中磺胺浓度mg%1.脱蛋白①取空白血样与各时间点血样0.2ml，放入各离心管中并标记，每个离心管分别加水1.8ml(※标准管加水1.6ml)；②另取30mg%磺胺嘧啶钠标准液0.2ml加入到标准管中，以配置标准血样品；③各试管分别加入5%三氯醋酸4ml，并摇匀，然后1000rpm离心5min。2.重氮化及偶联呈色从各离心管提取上清2.0ml并转移至玻璃试管中试剂按照如下顺序添加：①0.5ml2NHCl②0.5ml0.5%NaNO2③1.0ml0.5%麝香草酚，然后摇匀。注意：加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒！NH2SO2NHRNaNO3CCl3COOHNNClSO2NHR+H3COHCH(CH3)2NaOHNH3CONaCH(CH3)2N3.分光光度计分析：每个样品的吸光度值由722型分光光度计测定，最大吸收波长设定于480nm.以空白血样品作为空白对照进行分光光度计调零。Ⅶ计算血药浓度偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸光度值，通过与标准品吸光度值的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：度）吸光给药前测定管度吸光（给药后测定管度吸光标准管浓度mg%管标准血浆中磺胺浓度mg%Ⅷ实验结果Table1.结果记录表Ⅷ实验结果1.以时间为横坐标，浓度的对数为纵坐标，在半对数图上绘制磺胺嘧啶钠的药时曲线，以lgC对t做直线回归，得方程:lgC=a+bt。按lgC-t图判断房室数，如果基本上为一条直线则按一室模型处理一室模型图问题：1．测定半衰期有何意义？2．根据Vd=D／Co，当用药剂量400mg／kg（D）你能计算出零时血药浓度Co及表现分布容积Vd吗？