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山楂中黄酮的提取研究技术专业班级：生工08级2班指导教师：张名爱目录1引言2实验工艺流程3结果与分析4讨论1引言中国是山楂的世界主产国之一。但受某些客观原因的限制，山楂的应用开发研究比较滞后，随着人们对健康的日益关注，山楂开始逐渐受到人们的重视，尤其是维生素C和黄酮类药品，具有良好的前景。在对山楂黄酮研究中，大都集中在黄酮的药理作用及其保健功能，然而对山楂总黄酮的提取缺乏系统的研究，使得这成为制约其更进一步开发的瓶颈。黄酮传统提取方法主要是溶剂提取法，乙醇和甲醇为常用的黄酮提取溶剂，高浓度醇(90％，95％)适于提取黄酮苷元，中等浓度醇(60％左右)适用于提取黄酮苷。提取次数一般是2-4次。溶剂提取法又分为：浸渍法、索氏提取法、超声波提取法，本文主要是比较一下三种方法。2实验方法1.浸渍法乙醇浓度分别为30％、50％、70％、80％，提取时间分别为1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h，根据这两个条件，比较不同提取条件下黄酮的提取量，浸渍温度分别为室温30℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃。然后采用单因素实验的方法，考察提取时间、提取时溶剂浓度、提取温度这3个因素对山楂中黄酮提取的影响。得出最佳提取条件为4h、70％乙醇和40℃提取，黄酮含量为33．5mg／g。2.索氏提取法根据浸渍法得出最佳乙醇提取浓度的水平，对样品在提取温度(70℃、80℃、90℃)，提取时间(1．5h、3．Oh、6．Oh)，乙醇浓度（60%、70%、80%）进行提取比较。3.超声波提取法根据浸渍法和索氏提取法的结果选择最佳浓度，在超声时间(15min、30min、45min)、提取温度(70℃、80℃、90℃)、乙醇浓度（60%、70%、80%）,条件下进行寻求最佳超声波提取的方法。3结果与分析•3.1浸渍法对山楂中黄酮提取的影响•3.11浸渍时间对山楂提取的影响3.12乙醇浓度对山楂中黄酮提取的影响3.13温度对山楂中黄酮提取的影响3.2索氏提取法对山楂中黄酮提取的影响(1)浓度极差从表中可得浓度极差最小值出现在水平1位置，最大值出现在水平3的位置，水平l到水平3之间差别不大，说明乙醇浓度对山楂中黄酮的索氏提取量影响小。(2)温度极差从图中可得温度极差最小值出现在水平l位置，最大值出现在水平3位置，水平2和水平3之间差别不大，说明当温度升到一定值的时候，温度升高不影响黄酮提取量。(3)时间极差水平2比水平1的增加十分明显，然而水平3只比水平2有一点的增加。提取时间一增长，黄酮提取量就慢慢开始恒定。这说明了各个实验因素与因素水平对山楂中黄酮提取量的影响有一定的差异，由分析结果可以得出：因素BAC(注：A、提取温度B、提取时间C、乙醇浓度)。序号因素factor样品量（g）总提取物含量（g)黄酮含量numberABCDQuantityofsampleContentofextractContentofflavonoid111113.0030.089123.4212223.0250.102127.5313333.0430.125638.5421233.0010.1333.2522313.0100.106235.6623123.0320.11737.5731323.0420.096929.1832133.0050.116338.6933213.0650.110840.5ΣI98.943296.1825109.456108.486ΣII115.889111.476110.824104.567ΣIII118.157125.383112.783120.042均值l10.925310.684212.165412.0571均值II12.865412.344812.315411.6487均值III13.132413.934812.536513.3385极小值10.925310.684212.165411.6487极大值13.132413.934812.536513.3385极差R2.20713.25060.37111.6908调整R’1.930842.31250.350731.57603.3超声波提取法对山楂中黄酮提取的影响(1)浓度极差浓度极差的最小值出现在水平l位置，其最大值出现在水平3的位置，水平2和水平l的位置差别不算大。这说明提取的时候乙醇浓度的升高，超声波提取法提取山楂中黄酮的量就增加。(2)时间极差时间极差最小值在水平1位置，其最大值出现在水平3的位置。这说明随着提取黄酮时间的增大，提取出的黄酮含量也随着增加。(3)液料比极差液料比极差值从水平1到水平3的数值逐渐加高，但是变化幅度不是很大，这说明随着加入的液料比的增加，黄酮提取量也随着增加。各个实验因素与因素水平对山楂中黄酮的提取用超声波法提取的影响表现出一定的差别，从极差的分析结果可以得出：因素ABC(注：A、超声时间B、液料比C、乙醇浓度)序号因素factor样品量（g）总提取物含量（g）黄酮含量（mg/g）numberABCDQuantityofsampleContentofextractContentofflavonoid111103.0220.125423.54212203.0350.106426.54313303.0040.110935.41421203.0650.1434.25522303.0140.096737.25623103.0080.085737084731303.0850.11438.54832103.0060.115436.82933203.0450.105441.59ΣI941657106.074107.005ΣII118.135110.048110.957ΣIII107.008110.945120.6均值l7.85738.84568.9475均值II9.85419.1859.25781均值III10.578110.224610.059极大值7.85738.84568.9475极小值10.578110.224610.075极差R2.69571.38641.167调整R'2.45871.24571.04594讨论在用浸渍法提取山楂中黄酮的研究里面，采用单因素实验的方法，对比了提取时间、提取溶剂浓度、提取温度这3个因素对黄酮提取的影响。得出最佳的浸渍提取条件为4h、70％乙醇和40℃提取温度，黄酮含量为33．5mg／g。在使用浸渍法时，随着提取乙醇的浓度的加大，提取的黄酮含量下降，它的影响在于不同含量的乙醇极性的不同，极性过大或过小会导致提取出的杂物较多，从而会影响黄酮的溶出，70％的乙醇浓度对山楂中黄酮的溶解度最好。随着提取时间的增加山楂中黄酮的提取量也随着增加，一定时间后渐渐趋于稳定，这个时间出现在4h的时候，温度升高，分子运动加快，黄酮提取率也随着增大。浸渍法需要的时间较长。黄酮提取效率较低，而且加温会增加成本，乙醇的回收也是一个大问题，因此并不适宜与工业生产。在用索氏提取法中，使用正交实验设计分析的方法，通过4因素3水平的正交实验得出最佳提取工艺为80℃、70％乙醇、3h、液料比为20的提取。索氏提取法原理与浸渍法类似，都是根据相似相溶的原理，但是它的提取率高于浸渍法。液料比的选择为20,增大液料比，黄酮的提取效果也随之增加，但是当液料比大于20的时候，提取效率增加不大。索氏提取法提取效果比较好，可以在提取后直接在此温度下进行浓缩，减少能量损失，可以用于工业生产。在用超声波提取法中，通过3因素3水平正交实验得到最佳提取工艺。山楂的提取时间为45min，液料比为1：10，浓度为80％，因素ABC(注：A、超声时间B、液料比C、乙醇浓度)。在这些影响因素中超声波时间对山楂中黄酮的提取量影响最大。在考虑成本等因素下，使用超声波提取法，提取时间大大缩短，产率较高，而且在室温下便可进行，操作方便，也是提取山楂中黄酮类物质的一种有效方法，也可应用于工业生产。