安图TORCH抗体亲和力检测

TORCH-IgG抗体亲和力检测郑州安图生物工程股份有限公司提纲抗体亲和力定义TORCH抗体亲和力检测的意义TORCH抗体亲和力检测的现状安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒抗体亲和力是整个抗体分子与抗原表位之间结合强度，即抗体的结合部位与相应抗原决定簇之间的非共价引力与斥力之和。抗体亲和力（Avidity）的定义抗体亲和力成熟理论初次感染产生的抗体为低亲和力抗体，随着时间的推移，体内抗体逐渐成熟为高亲和力的抗体，一般需要3-6个月时间。◆模板学说（Templatetheory）◆克隆选择学说（Clonalselectiontheory）模板学说（Templatetheory）免疫系统在按照抗原（模版）来制造更高亲和力的抗体B体细胞高频突变BBBBYYYYYYYYYYBYYYYYYYYYY原发感染克隆选择学说（Clonalselectiontheory）免疫系统对高亲和力抗体的筛选过程TORCH抗体亲和力检测的意义胎儿出生缺陷的风险与原发感染/复发感染、感染发生的时间、孕周密切相关判断原发感染或复发感染判断原发感染发生的时间TORCH规范化检测流程的重要环节对于巨细胞病毒IgM抗体阳性的样本，需要结合IgG抗体亲和力的结果进行分析。IgM抗体阳性，同时IgG抗体低亲和力，有较高风险。美国帕洛艾尔托医疗基金会弓形虫确认实验室，将弓形虫IgG亲和力抗体检测列为确认方法之一，用于排除假阳性及非急性感染。对IgM抗体阳性或可疑的样本，进行IgG抗体亲和力检测很有价值，如果IgG抗体为低亲和力，再进行羊水穿刺PCR检测是合适的选择。对生殖器疱疹患者的单纯疱疹病毒IgG抗体亲和力检测可以区分原发和复发感染。使用敏感方法检测TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期卫生教育无需进一步检测让患者3周后再检测孕期≤20周孕期＞20周IgG亲和力检测IgG亲和力检测高亲和力低亲和力高亲和力无需进一步检测高度传染性回顾性检测前三个月样本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低亲和力IgGIgG+IgM+高亲和力IgG高度传染性复发低传染性高度传染性无需进一步检测可进一步检测母体病毒血症评估：尿液PCR、血液PCR胎儿健康度评估：超声、MRI侵入性检测：羊膜穿刺、定量PCR超声、MRI案例分析1MunroSC,etal.JClinmicrobiol,2005,43:4713-4718使用敏感方法检测TORCHIgG/IgMIgG-IgM-IgG+IgM-IgG+IgM+IgG-IgM+孕期卫生教育无需进一步检测让患者3周后再检测孕期≤20周孕期＞20周IgG亲和力检测IgG亲和力检测高亲和力低亲和力高亲和力无需进一步检测高度传染性回顾性检测前三个月样本IgG-IgM-和IgG-IgM+IgG+IgM-IgG+IgM+低亲和力IgGIgG+IgM+高亲和力IgG高度传染性复发低传染性高度传染性无需进一步检测可进一步检测母体病毒血症评估：尿液PCR、血液PCR胎儿健康度评估：超声、MRI侵入性检测：羊膜穿刺、定量PCR超声、MRI案例分析2MunroSC,etal.JClinmicrobiol,2005,43:4713-4718TORCH抗体亲和力检测现状试剂盒检测原理：解离剂法和抗原中和法，解离剂法是主流方法。试剂盒检测方法：酶联免疫法、自动化化学发光法，酶联免疫法较多。国内，对TORCH亲和力研究较少，仅有少量的文献报道了IgG亲和力检测的临床意义，在临床上还没有得以真正运用。国外，对TORCHIgG亲和力强弱与感染时间的关系做了许多研究工作，雅培，索林和梅里埃等很多厂家的抗体亲和力试剂盒都获得了FDA或CE认证，用于TORCH感染的辅助诊断。巨细胞病毒和弓形虫抗体亲和力检测应用普遍。各厂家试剂盒的检测结果存在差异。抗体亲和力检测方法通过解离剂将低亲和力抗体解离掉。通过中和抗原将高亲和力抗体中和掉。国内获得批准文号的产品及方法厂家及项目名称安图DiaSorinRocheAbbottBiomerieuxCMV-IgGAVIELISA化学发光电化学发光化学发光ELISA荧光RV-IgGAVIELISA////TOX-IgGAVIELISA化学发光电化学发光化学发光ELISA荧光HSV-1IgGELISA////HSV-2IgGELISA//2012年以后批准上市国外批准上市的主要厂家及方法巨细胞病毒亲和力试剂盒检测结果比较安图标杆Radim、Euroimmun与临床的符合率优于其他厂家，安图产品研发以Radim为参比试剂盒。弓形虫亲和力试剂盒检测结果比较各厂家检测结果差异不大低亲和力结果可能不是急性感染高亲和力结果可以排除急性感染第一个国产TORCH五项抗体亲和力检测试剂盒（2013年获得批准文号）国家十二五规划863课题项目之一产品设计兼顾IgG检测灵敏度和高值样本OD值不超限产品原理：解离剂法产品方法：ELISA样本稀释：1/100孔外稀释反应模式：30分钟-10分钟-30分钟-10分钟加样量：稀释后样本、对照缓冲液、解离缓冲液、酶结合物均100ul/孔。波长设置：450/620nm双波长读数，如果样本OD值3.0，用405/620nm双波长读数。结果计算：亲和力指数=解离缓冲液孔OD值/对照缓冲液孔OD值×100%安图TORCH抗体亲和力检测试剂盒123456789101112A○QL○S3○S7AB○QL○S3○S7BC○QH○S4CD○QH○S4DE○S1○S5EF○S1○S5FG○S2○S6GH○S2○S6H加样模式BIOMEX血清转化盘48份样本的亲和力与感染时间的关系BIOMEX48份血清转化盘的感染时间小于80天，其中33份样本为IgG阳性，均为低亲和力，灵敏度为100%。RV血清转化盘安图IgG亲和力与感染时间关系010203040506070020406080100120140感染时间亲和力AbbottIgG亲和力与感染时间关系05101520253035404550020406080100120140感染时间亲和力图1：安图试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化图2：AbbottATCHIT试剂盒CMV-IgG抗体亲和力水平随感染时间的变化CMV血清转化盘安图试剂盒在感染100天后检测基本为高亲和力AbbottATCHIT试剂盒在感染后120天仍为低亲和力。IgG+IgM-既往感染样本评价项目名称总样本数量高亲和力灰区低亲和力特异性CMV-AVI744708171997.4%RV-AVI97896801098.98%TOX-AVI2282149597.7%HSV1-AVI5875766599.1%HSV2-AVI3883765798.2%共同推进TORCH检测的规范化