一般毒性实验

1(二)一般毒性试验123急性毒性试验局部毒性试验亚慢性和慢性毒性试验(二)一般毒性试验第一节：急性毒性试验急性毒性参数危险性评估慢性毒性试验毒作用机制试验目的(二)一般毒性试验第一节：急性毒性试验经口急性毒性试验：LD50经呼吸道静式吸入式急性毒性试验：LC50经皮肤急性毒性试验：LD50(二)一般毒性试验乙醇10000氯化钠4000硫酸亚铁1500硫酸吗啡900苯巴比妥钠150印防己毒素（苦味素）5硫酸士的宁（番木鳖碱）2尼古丁1筒箭毒碱0.5密胆碱0.2河豚毒素0.1二噁英0.001肉毒杆菌毒素0.00001(二)一般毒性试验死亡率（%）剂量（mg）010203040506070809010001020304050607080901008单位20格64单位20格20格8单位单位/20格决定了敏感性(二)一般毒性试验死亡率（%）剂量010203040506070809010001020304050607080901008单位64单位8单位LD50(二)一般毒性试验LD50orLC50经典急性毒性试验曲线拟合法Bliss法插值法累积法、改良寇氏法、霍恩法(二)一般毒性试验LD50的测定方法优点缺点霍恩法使用动物数少；计算简便95%可信限范围大，精确度不够改良寇氏法计算简便，准确率高确定最低和最高剂量组序贯法节省动物化学物引起动物快速死亡Bliss法设计要求不太严格最精确计算复杂(二)一般毒性试验死亡率呈正态分布。最小剂量组的死亡率20%，最大剂量组的死亡率80%。剂量按等比级数分组；改良寇氏法适用条件各组动物数应相等；(二)一般毒性试验观察时间毒性反应观察染毒途径与方式剂量与分组选择实验动物某化学物LD50的测定(二)一般毒性试验种属和品系：年龄和体重：数量和性别：啮齿类常用小鼠或大鼠。非啮齿类常用狗或猴。变异不应超过该批平均体重的20％。小鼠：18～22克。大鼠：180-220克。小动物每组10只。雌雄各半。选择试验动物(二)一般毒性试验最大耐受量试验。最大耐受剂量，WHO规定经口5g/kg。不死亡，不做。死亡，继续做。设定1mg/kg为最低剂量组，4、16、64、128mg/kg预实验。无相关资料有相关资料了解结构和性质相似化学物的毒性资料，确定预期毒性中值。以此与其毒性中值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设2个剂量组为预试验剂量。剂量与分组(二)一般毒性试验灌胃、喂食、吞咽胶囊静式吸入、动式吸入经皮肤染毒经注射染毒定性试验、定量试验注射量的规定经口染毒呼吸道染毒染毒方式(二)一般毒性试验中毒症状死亡情况病理变化毒性作用观察(二)一般毒性试验器官或系统观察项目中毒后常见的表现皮肤和被毛眼睛植物神经系统呼吸系统泌尿生殖系统CNS和神经肌肉系统颜色张力眼睑眼球角膜瞳孔大小腺体分泌鼻呼吸表现阴户乳腺阴茎行为运动状态对刺激反应性脑脊髓反射肌肉张力皮肤充血紫绀被毛蓬松污秽眼球突出，充血，角膜混浊，血性分泌物散大或缩小流涎流泪鼻孔溢液鼻翼扇动徐缓过速困难衰竭肿胀分泌物增多会阴部污秽脱出体位异常叫声异常活动异常呆卧少动痉挛抽搐震颤强直麻痹运动失调易兴奋感觉迟钝或过敏反应低下或过高减弱或消失松驰或紧张(二)一般毒性试验一般为14天观察时间C57Kunming(二)一般毒性试验急性毒性分级急性分级大鼠经口LD50(mg/kg)6只大鼠吸入4h，死亡2-4只浓度(ppm)兔经皮LD50(mg/kg体重)对人可能致死的估计量g/kg体重g/60kg体重剧毒11050.050.1高毒11050.053中等毒50100440.530低毒50010003505250微毒5000100002180151000外源化合物的急性毒性分级(WHO，2003)(二)一般毒性试验第二节：局部毒性试验皮肤刺激试验急性眼刺激试验(二)一般毒性试验观察时间：7天，可延长至21天观察指标：结膜、角膜、虹膜染毒方式：一侧眼结膜囊内剂量：一次剂量实验动物：家兔(二)一般毒性试验(二)一般毒性试验观察时间：不超过14天观察指标：红斑、水肿染毒方式：涂抹于动物皮肤上剂量：一次或多次剂量实验动物：家兔、豚鼠(二)一般毒性试验(二)一般毒性试验第三节：亚慢性和慢性毒性试验亚慢性毒性：实验动物或人连续较长期（约相当于生命周期的1/10）接触外源化学物所产生的中毒效应。概念(二)一般毒性试验第三节：亚慢性和慢性毒性试验慢性毒性：实验动物或人长期接触外源化学物所引起的中毒效应。长期对啮齿类动物至少12个月，也可终身染毒。概念(二)一般毒性试验A毒性效应谱、毒作用特点、靶器官B毒作用机制、毒作用可逆性C剂量-反应关系D毒效应差异，确定安全系数，结果外推至人亚慢性和慢性毒性试验主要目的(二)一般毒性试验（一）实验动物选择亚慢性毒性试验年龄：大鼠50~100g狗4~6月数量：小动物≥20大动物≤8性别：雌雄各半慢性毒性试验年龄：大鼠50~70g狗4月小鼠初断乳数量：小动物≥40大动物≥8性别：雌雄各半研究方法(二)一般毒性试验染毒期限3－6个月预期寿命6个月－1年6个月－1年食品毒理学环境毒理学致癌试验工业毒理学（二）染毒期限(二)一般毒性试验经口:鼠常用灌胃、喂饲法。犬用胶囊法。经呼吸道：持续4h。注射染毒：腹腔注射。（三）实验动物染毒方式(二)一般毒性试验（四）剂量选择和分组亚慢性毒性的剂量选择阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组急性毒性的阈剂量1/20~1/5LD50组距：2~4倍慢性毒性的剂量选择阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组亚慢性阈剂量或其1/5~1/21/10LD50组距：2~10倍(二)一般毒性试验一般观察：外观体征、行为活动、体重、摄食眼部检查血生化指标尿常规检查体温、心电图检查病理检查：大体解剖、组织病理学特异性指标（五）观察指标(二)一般毒性试验结果评价剂量依赖性趋势反应重现性相关指标变化性别差异效应的时间变化趋势效应差异的大小历史对照的作用：差异是否由受试物引起参考资源