自身抗体温晓宏

常用自身抗体的临床解读风湿免疫科温晓宏•骨质疏松•类风湿关节炎•结缔组织病骨强度受损导致骨折危险性升高正常骨骨质疏松骨NIHConsensusDevelopmentPanelonOsteoporosis.JAMA285(2001):785-95骨密度骨质量结构的完整性与强度10%骨密度的丢失10%骨密度的丢失骨小梁变细水平骨小梁的丧失20%强度降低70%强度降低正常的骨小梁骨小梁的减少使骨强度降低骨转换生化指标骨形成指标骨吸收指标骨特异性碱性磷酸酶抗酒石酸酸性磷酸酶骨钙素尿羟脯氨酸I型前胶原羧基端前肽吡啶啉I型前胶原氨基端前肽脱氧吡啶啉I型胶原交联羧基末端肽I型胶原交联氨基末端肽尿钙/肌酐无创、灵敏、快速骨特异性碱性磷酸酶（BAP）•骨形成特异性指标•BAP的活性在室温下大约为1～2天，且不受饮食和时间影响•血清BAP是骨折后检测血清的灵敏和精确指标•在骨代谢异常的各种病症中血清BAP有诊断意义（如癌症骨转移、骨营养不良、骨质疏松等症状）•实验证明BAP在长期检测骨质疏松中有极高意义•预防儿童缺乏维他命D佝偻病及监测佝偻病的治疗进程•BAP、Ca、P联合检测可有效监测糖尿病骨质疏松症的发生和发展,可提高糖尿病骨质疏松症的早期诊断。血清I型胶原C端肽酶（CTX-1）•评价妇女绝经后骨质疏松症•预测抗骨质吸收药物治疗的长期疗效，例如激素替代疗法，二磷酸盐疗法•监测骨吸收•骨质疏松•类风湿关节炎•结缔组织病1.类风湿因子（RF）2.抗核周因子（APF）3.抗角蛋白抗体（AKA）4.抗环瓜氨酸肽抗体（a-CCP）类风湿因子•抗人或动物的IgG的FC片段抗体。•其本身是免疫球蛋白，因此，RF有IgG、IgM、IgA型等。RF无种族和种属特异性。•与自身抗原亲合力强，形成免疫复合物，故敏感性差。•见于许多疾病中，故特异性不高。如何评价类风湿因子是诊断RA的标准之一，不是唯一标准，并非RA特有作为血清阴性脊柱关节病区分标准正常人可达5%阳性RF与其他蛋白、半抗原有交叉反应多种结缔组织病（SLE，SD，SS，PM/DM）感染疾病、肝硬化，弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性病后半年才产生，有关节外表现者，滴度高。持续高滴度RF预示疾病严重，预后差。其滴度与疾病活动性、严重性相关。抗核周因子(anti-perinuclearfactor,APF)1.人颊粘膜细胞为抗原底物2.间接免疫荧光检测3.观察同一反应孔5个视野（约100个细胞），大于5个APF阳性细胞判为APF抗体阳性，5个以下为可疑，少于2个为阴性。4.敏感性45－80，特异性56－99。（敏感性19.8~59.3，特异性87.9~100）抗角蛋白抗体(anti-kerratinantibodies,AKA)Wistor大白鼠，6周雄性食道中段切片为抗原底物间接免疫荧光法检测以典型板层状荧光为阳性敏感性：36.15%特异性：90.20%（敏感性19.8~59.3，特异性87.9~100）环瓜氨酸肽(CCP)1983年证实profilaggrin降解成filaggrin伴随精氨酸脱亚氨基成瓜氨酸1989年构建Filaggrin(filamentaggregatingprotein)基因文库(cDNA)1998年证实瓜氨酸是AFA的抗原决定簇的组成性成分2000年根据filaggrincDNA合成瓜氨酸肽，修饰后形成含二硫键的环瓜氨酸肽(cycliccitrullinatedpeptide，CCP)抗CCP抗体（a-CCP）用ELISA方法检测对RA具有很高的敏感性特异性诊断（分类）标准之一抗环瓜氨酸肽抗体•实验方法：ELISA抗CCP抗体的阳性率(%)46.65.31.481.1105101520253035404550RA非RA非结缔组织病正常人Anti-CCP与APF&AKA文献报道各检查敏感性和特异性688050989698020406080100Anti-CCPAPFAKA敏感性特异性•骨质疏松•类风湿关节炎•结缔组织病结缔组织病3.1系统性红斑狼疮3.2系统性硬化症3.3炎性肌病3.4系统性血管炎3.5其它3.5.1干燥综合征3.5.2抗磷脂综合征3.5.3药物性狼疮ANA阳性：传统的结缔组织病多系统/器官受损炎性表现年轻女性皮质激素治疗有效ANA阴性：系统性血管炎多系统/器官受损炎性表现皮质激素治疗有效•抗核抗体•抗中性粒细胞胞浆抗体•其它抗体LE细胞：并非SLE特有，PM、SSc、RA、SS等结缔组织病，药物过敏，慢活肝等亦可阳性。变性的细胞核LE细胞中性粒细胞+补体+DNP概念•指抗细胞核的各种成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的自身抗体的总称•ANA存在一个谱•ANA新概念：抗核酸（Nucleicacid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称•某些核抗原成分在核仁和胞浆内比核质内更丰富ANAs抗DNA抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗非组蛋白抗体抗核仁抗体抗其他细胞成分抗体线粒体、溶酶体…a-dsDNAa-ssDNA抗着丝点抗（ACA)PM-Scl、RNP-polymerase-1…抗核抗体谱抗ENAANA检测方法•常用检测方法：间接免疫荧光法•筛选试验：无疾病特异性•结果判读：滴度、核型仅报告阳性或阴性×间接免疫荧光法(IIF)ANA核型斑点型（S）：与抗ENA抗体有关。ANA核型均质型（H）：与抗dsDNA抗体，抗组蛋白抗体有关。ANA核型周边型（M）：与抗dsDNA抗体有关。ANA核型核仁型（N）：与SSc有关，阳性率可达40％ANA核型着丝点型（ACA）：ACA+•不同底物因抗原含量不同，同一标本在不同底物片上检测ANA产生不同结果•ANA无器官特异性及种属特异性临床意义•ANA的检测在临床上是一个极其重要的筛选实验，ANA阳性（高滴度）标志了自身免疫疾病存在的可能性。ANA是诊断弥漫性结缔组织病的重要依据。•ANA无疾病特异性，在许多中自身免疫病中都可出现。•ANA滴度不一定与疾病活动性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、肿瘤也可阳性。ANAs抗DNA抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗非组蛋白抗体抗核仁抗体抗其他细胞成分抗体线粒体、溶酶体…a-dsDNAa-ssDNA抗着丝点抗（ACA)PM-Scl、RNP-polymerase-1…抗核抗体谱抗ENA常用检测方法•RIA（Farr法）：检测高亲和力DNA抗体，敏感性高，与病情活动度相关，特别是肾小球肾炎和血管炎；•IIF（CL-IF/TE-IF）：高、低亲和力DNA抗体都可检测，特异性高，与病情活动度相关。•ELISA：高、低亲和力DNA抗体都可检测，敏感性高，与病情活动度相关；假阳性率高。•DIGFA（金标法）：敏感性高，简便、快速；定性检测，不利于监控病情，观察疗效。•其他方法：PEG-RIA，补体固定法，免疫扩散法，血凝法短膜虫间接免疫荧光法抗ds-DNA抗体•SLE特异抗体•滴度可随病情变化•诊断、判断、疗效评估ANAs抗DNA抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗非组蛋白抗体抗核仁抗体抗其他细胞成分抗体线粒体、溶酶体…a-dsDNAa-ssDNA抗着丝点抗（ACA)PM-Scl、RNP-polymerase-1…抗核抗体谱抗ENA•抗dsDNA抗体——抗DNA抗体•核小体抗体——抗核小体抗体•抗组蛋白抗体——抗组蛋白抗体•抗SmD1抗体•抗-U1-snRNP抗体•抗-SSA60KD抗体•抗-SSA52KD抗体•抗-SSB抗体•抗-Scl70抗体——抗核仁成分•抗-Jo1抗体•抗Po抗体•抗着丝点抗体(ACA)——其他自身抗体十一项抗细胞浆成分抗可提取性核抗原（ENA）抗体抗核抗体谱抗单链DNA、组蛋白和核小体抗体•靶抗原为H2A-H2B-DNA复合物•抗核小体抗体可见于SLE、药物性狼疮（异烟肼、甲基多巴、普鲁卡因酰胺等）和其他系统性自身免疫病。核小体抗体(ANuA)与SLE的临床表现临表出现率抗体蛋白尿血尿颧部皮疹关节炎口腔溃疡胸膜炎高滴度ANuA50%38%31%62%42%高滴度Anti-dsDNA23%高滴度Anti-HST11%ANuA为SLE的标志性抗体•ANuA为SLE的标志性抗体•ANuA与SLE的肾脏损害、病情活动有关•对SLE敏感性58%-71%、特异性97%-99%•与抗ds-DNA相互独立，同时检测提高检出率抗组蛋白抗体(A-HST)•主要出现在95％的药物性狼疮患者中•约20～50％的SLE患者中可检测到；另外，约15～20％的类风湿关节炎患者、60％的原发性胆汁性肝硬化、10％的恶性肿瘤患者中亦可检测到。•对于药物诱导的和自发性狼疮的诊断极为重要。ANAs抗DNA抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗非组蛋白抗体抗核仁抗体抗其他细胞成分抗体线粒体、溶酶体…a-dsDNAa-ssDNA抗着丝点抗（ACA)PM-Scl、RNP-polymerase-1…抗核抗体谱抗ENA抗ENA抗体检测方法•对流免疫电泳法(CIE)•免疫双扩散法(IDorDID)•免疫印迹法(IB)•酶联免疫吸附法(ELISA)•蛋白芯片（Proteinchip）抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%-30%）前瞻性和回顾性诊断，常与RNP抗体共存抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗RNP抗体：多种结缔组织病中存在（e.g.SLE35%）MCTD95-100%（高滴度）双手肿胀、雷诺、肌炎、肢端硬化等有关抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗SSA/Ro抗体：pSS70-80%，其它CTD抗SSB/La抗体：pSS50-70%，其它CTD新生儿狼疮、淋巴结肿大、光过敏、皮损等等有关诊断pSS时抗SSA抗体敏感，抗SSB抗体较为特异pSS相关抗体抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗Scl-70抗体：SSc40-70%,标记性抗体CREST10-20%,阳性时肺间质纤维化危险升高抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗Jo-1抗体：PM/DM18-25%，标记性抗体（ANA-）抗Jo-1抗体综合征：发热、关节炎、技工手、雷诺、肺间质病和抗Jo-1抗体阳性。抗可提取性核抗原（ENA）抗体anti-extractablenuclearantigenantibodies抗核糖体抗体：SLE3-15%，特异性抗体（P0、P1、P2）神经精神症状，特别是狼疮性精神病相关，水平可预测疾病复发。皮疹有关。ANAs抗DNA抗体抗组蛋白H1,H2A,H2B,H3,H4抗非组蛋白抗体抗核仁抗体抗其他细胞成分抗体线粒体、溶酶体…a-dsDNAa-ssDNA抗着丝点抗（ACA)PM-Scl、RNP-polymerase-1…抗核抗体谱抗ENA抗着丝点抗体ACA（antibodytocentromereantigen）•SD、CREST•肝病•SS•ACA与抗-Scl-70抗体互斥•抗核抗体•抗中性粒细胞胞浆抗体•其它抗体概述•抗中性粒细胞胞浆抗体Anti-neutrophilcytoplasmic,ANCA•与中性粒细胞及单核细胞的胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。•检测方法：酶联免疫吸附法（ELISA）间接免疫荧光法（IIF）抗中性粒细胞胞浆抗体cANCApANCA抗中性粒细胞胞浆抗体•cANCA——WG、其量指示病情活动可能靶抗原：PR-3(蛋白酶3）•pANCA——其他血管炎、炎性肠病可能靶抗原：MPO(髓过氧化酶)组织蛋白酶、弹性蛋白酶、乳铁蛋白•A-ANCA/X-ANCA可能靶抗原：不详•系统性血管炎：WG、