自身抗体实验室检测及意义

1常见自身抗体检测及意义TheCommonAutoantibodiesExaminationandClinicalSignificance————《诊断学》免疫学检验TheFirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversityQingshuiHuang(黄清水)Teachingoutline理解几个概念AutoimmunityAutoimmunediseasesAutoantibodiesandcharacteristics掌握常见自身抗体及其临床意义ANA、RF、ENA、ANCA、autoimmuneliverdiseasesClinicalsignificance1学时Caseone患者女，30岁，因面部红斑、胸闷、发热1个月加重7天入院。查体：体温38.5℃，脉搏102次/分，呼吸28次/分，面部红斑，左胸胁部饱满，呼吸活动度减弱，局部叩诊呈浊音，语颤、呼吸音消失，抗生素治疗无效。诊断考虑？鉴别诊断？需要完善哪些检查？Autoimmunity自身免疫是指机体免疫系统受某些内外因或遗传等因素作用产生针对自身抗原发生免疫应答反应，出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象。Autoimmunediseases自身免疫性疾病一类由自身免疫反应导致对机体造成免疫性病理损伤或功能障碍的疾病，可分为器官特异性（慢性甲状腺炎）和非器官特异性（SLE、RA）两大类。Thepathogenesyofautoimmunedisease自身组织免疫耐受自身免疫细胞免疫体液免疫自身反应性T细胞自身抗体自身免疫性疾病器官特异性非器官特异性myastheniagravisGravesdiseaseAIHA1typeDMmultiplesclerosisRheumatoidarthritisSystemiclupuserythematosusSjogren’ssyndromeSystemicsclerosisPolymyositis/dermatomyositisWegener’sgranulomatosis消化系统眼抗磷脂抗体综合征血液系统神经系统肺脏心血管肌肉骨骼皮肤粘膜浆膜炎肾脏全身症状干燥综合征AutoimmunediseasesAutoimmunediseasescharacteristics病程长，女性患者居多，病因不清，有遗传倾向，临床症状多样病理特征为免疫炎症免疫抑制剂治疗有一定疗效可检出高滴度的自身抗体和（或）自身致敏淋巴细胞Autoantibodies自身抗体是针对自身组织成分产生的抗体，与自身组织成分的抗原决定簇发生反应，通过各种途径造成自身免疫损伤，如：变态反应、免疫复合物、ADCC、炎症反应及干扰细胞功能等。Autoantibodiescharacteristics自身抗体特性产生在遗传背景下，隐蔽抗原的释放或移位，自身组织抗原的改变或修饰，交叉抗原，免疫系统的调节异常等。作用自身抗体参与免疫病理损伤，对某些自身免疫性疾病的诊断具高度特异性，血清滴度与疾病的活动性密切相关。自身免疫=自身免疫性疾病？Autoantibodiessignificance自身抗体肯定诊断提示诊断评估预后指导用药斑点法印迹法MethodesofcommonexaminationWestblotIIFELISACommonexaminationitemsANAds-DNAENAANCAAnti-CCPGBMACLautoimmuneliverdiseasesAntinuclearantibodiesANA：是指存在与血液和体液中，能与真核细胞核抗原起反应的自身抗体的总称。狭义的ANA是指用间接免疫荧光法检出的抗细胞核成分的抗体；广义的是指用各种方法能检出的核物质，包括核酸、酸或碱性核组织蛋白和非组织蛋白等的抗体。AntinuclearantibodiesANA的性质主要是IgG，无器官特异性和种属特异性，可与所有动物的细胞核发生反应。核抗原成分复杂，已经发现有几十种，高滴度ANA对多种自身免疫免疫性疾病具有重要的诊断意义，有的已成为某些自身免疫性疾病的诊断标志物。ANA筛查及亚类ANA抗体的检测对明确诊断、临床分型、病情观察、预后等具有重要意义。IndirectimmunofluorescenceThecommonANAphotofluorogram荧光型相关抗体临床意义均质型抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体SLE、RA、SS斑点型抗ENA抗体MCTD、多种自身免疫性疾病核膜型抗dsDNA抗体SLE核仁型抗核仁核糖核酸抗体硬皮病着丝点型抗着丝点抗体硬皮病胞浆型抗细胞浆成分抗体原发性胆汁性肝硬化ANAclinicalsignificance多种风湿性疾病可出现阳性正常人可有5%的阳性率，并随年龄增加有上升趋势，5%SLE病人的ANA为阴性ANA对诊断风湿病敏感，但特异性差，不能提示发生免疫反应的是抗细胞核那种成分抗体，只能根据荧光型大致估计，临床作为诊断风湿病的筛选实验。ANAtestingguidelinesAnti-DNAantibody概述：染色体由dsDNA和组蛋白（H1、H2、H2、H3、H4五种成分）及非组蛋白组成（种类很多如：核酸代谢所需的各种酶等），抗DNA抗体包括两大类：抗dsDNA抗体和抗ssDNA抗体参考值：IFA法为阴性临床意义抗dsDNA抗体阳性：对SLE特异性高，活动期阳性率达70～90%，但敏感性低抗ssDNA抗体阳性：许多自身免疫性疾病都可有阳性，其诊断特异性不如抗dsDNA抗体Anti-ExtractableNuclearantigenAntibodiesENA为用等渗盐水或磷酸盐缓冲液所提取的核内抗原多种相对分之量不同的多肽，成分复杂，达数十种之多，用于检测相应抗体，包括：抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体等参考值：IBT法(免疫印迹)为阴性Thecommonmarkersforautoimmunediseases标志抗体相关疾病抗dsDNA抗体SLE抗Sm抗体SLE抗SS-B抗体SS抗着丝点抗体SSc(局限型)抗Scl-70抗体SSc(弥漫型)抗PM-Scl抗体PM/DM抗Jo-1抗体PM/DM高滴度抗RNP抗体MCTDThecommonmarkersforautoimmunediseases标志抗体相关疾病抗肾小球基底膜抗体肺出血肾炎综合征抗平滑肌抗体Ⅰ型自身免疫性肝炎抗肝肾微粒体抗体Ⅱ型自身免疫性肝炎抗可溶性肝抗原抗体Ⅲ型自身免疫性肝炎抗线粒体抗体２型原发性胆汁性肝硬化抗角蛋白抗体类风湿性关节炎抗桥粒抗体寻常天疱疮抗肌内膜抗体过敏性肠病SpecificautoantibodiesforSLE靶抗原阳性率(%)ssDNA70-95dsDNA30-90组蛋白40-80核小体50-95U1-nRNP15-40Sm5-30SS-A20-60SS-B10-20核糖体P蛋白5-15Ku10PCNA3心磷脂,2-GP120-40SpecificautoantibodiesforpSS靶抗原阳性率(%)SS-A40-95SS-B40-95SpecificautoantibodiesforSSc靶抗原阳性率(%)着丝点80-95Scl-7025-75原纤维蛋白5-10PM-Scl(与多肌炎的重叠综合征）2-5SpecificautoantibodiesforPM/DM靶抗原阳性率(%)ssDNA40-50Jo-125-35PM-Scl(与硬化症的重叠综合征)8Mi-25Ku(与硬化症的重叠综合征)1-7PL-7,PL-12,OJ,EJ,KJ2-3(各种氨基酰rRNA合成酶)antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA中性粒细胞↘↗ANCA是一组针对中性粒细胞胞浆抗原的自身抗体，其靶抗原为中性粒细胞胞浆中的颗粒蛋白酶随着对ANCA的深入研究，ANCA的特异性靶抗原逐渐被发现并得到纯化到目前为止，已有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原ANCAANCAdeterminationcANCA－蛋白酶3(PR3)pANCA－髓过氧化物酶(MPO)aANCAANCAclinicalsignificance与多种疾病相关系统性血管炎诊断与鉴别诊断炎症性肠病诊断与鉴别诊断自身免疫性肝病诊断与鉴别诊断其它疾病诊断与鉴别诊断结缔组织病感染性疾病autoimmuneliverdiseases,AILD自身免疫性肝病是一组免疫介导的肝脏损伤,肝组织改变与慢性病毒性肝炎相一致，但血清病毒标志物阴性。临床上有自身免疫的各种表现，多数自身免疫性肝病伴有特异性自身抗体的出现，自身抗体的检测对临床肝病学具有重要的意义。根据临床表现、生物化学、影像学和组织病理学特点,可简单地分为以肝炎为主型的自身免疫性肝炎(AIH)以胆汁淤积为主型的原发性胆汁性肝硬化(PBC)以胆系损害原发性硬化性胆管炎(PSC)AutoantibodiesforAILD自身免疫性肝炎（AIH）ANA、SMA（抗肌动蛋白抗体）抗LKM1抗体、抗LC1抗体抗SLA/LP原发性胆汁性肝硬化（PBC）AMA/AMA-M2抗核包膜抗体、抗核点抗体、抗着丝点抗体原发性硬化性胆管炎（PSC）抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）AILDdeterminationAILDclinicalsignificance抗平滑肌抗体（ASMA/SMA）见于多种肝脏疾病及非肝脏疾病，无疾病诊断特异性，对I型AIH诊断有重要意义，高滴度的SMA（1:160）对AIH诊断敏感性相当高（至少90％）抗肝/肾微粒体抗体（抗LKM1抗体）II型AIH血清特异性抗体抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA抗体）Ⅲ型AIH的血清特异性标志抗肝细胞胞浆抗原1型抗体（抗LC1抗体）II型AIH的血清特异性标志抗线粒体抗体LateststudyaboutautoantibodiesRA相关抗体抗角蛋白抗体抗丝集蛋白抗体抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体SS相关抗体Anti-alpha-fodrinantibodies慢性炎症性肠病相关抗体抗小肠杯状细胞抗体抗酿酒酵母抗体LateststudyaboutautoantibodiesSLE相关抗体抗核小体抗体抗核糖体P蛋白抗体抗磷脂抗体综合征抗磷脂抗体多肌炎和皮肌炎相关抗体抗Mi-2抗体Howtoreadthereports?ANAds-DNAENA（ANA谱14项）ANCAAILDOthers几个要说明的问题ANA（-）而ANA14项（+）ds-DNA（IIF）与ANA14项中不符合ANCA（IIF+）而确认试验阴性Autoimmunediseaseslaboratorydiagnosis(4-1)实验室及其他辅助检查一般检查自身抗体检测影像学检查病理学检查血常规尿常规血沉免疫球蛋白补体风湿三项X线MRICTANAENAACLANCAGBMAIH相关抗体诊断治疗预后Autoimmunediseaseslaboratorydiagnosis(4-2)红斑狼疮筛查干燥综合症进行性系统性硬化症多发性肌炎皮肌炎等怀疑自身免疫性疾病ANA筛查Anti-dsDNA必要时查ANA谱-14项Autoimmunediseaseslaboratorydiagnosis(4-3)可疑自身免疫性肝病ANA筛查必要时查ANA谱-14项自身免疫性肝病筛查自身免疫性肝病相关抗体确认Autoimmunediseaseslaboratorydiagnosis(4-4)炎症性肠病自身抗体谱血管炎自身抗体谱ANA筛查抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）必要时查ANA谱-14项提高质量，加强交流质量控制人员室内质控室间质评加强临床沟通与交流已开展项目新开展项目