家兔呼吸运动的调节叶治国浙江大学医学院softlab@zju.edu.cn背景知识呼吸节律的形成背景知识机械感受器反射–肺牵张反射–呼吸肌的本体感受器反射化学感受性呼吸反射–外周化学感受器–中枢化学感受器材料和方法实验动物:家兔材料和方法试剂–氨基甲酸乙酯–乳酸(CH3CH(OH)COOH)仪器设备–RM6240生物信号采集处理系统–呼吸换能器手术器械材料和方法手术准备–称重–麻醉:耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯5ml/kg速度不要太快时刻观察家兔反应从耳尖开始注射材料和方法视频:家兔捉拿材料和方法视频:麻醉材料和方法固定:仰卧,前肢背部向下交叉材料和方法视频:家兔固定材料和方法剪去颈前部兔毛,沿正中线切开皮肤5~7cm纵向分离皮下组织和肌层,暴露颈部气管及其两侧的左、右颈总动脉鞘材料和方法视频:颈部手术材料和方法用玻璃分针分离双侧迷走神经,穿线备用(3条神经中迷走神经最粗;交感神经较细;减压神经最细)材料和方法视频:分离迷住神经材料和方法在气管下穿两根粗棉线备用在甲状软骨下约1cm处,做“⊥”形切口插管后结扎固定材料和方法视频:气管插管材料和方法启动RM6240系统,选择“呼吸运动调节”实验记录家兔正常呼吸曲线观察项目观察并记录以下情况家兔呼吸的变化:–增大无效腔(接乳胶管)–缺氧(接N2皮球,或者烧杯)–吸入CO2(接CO2皮球,或者烧杯)–注射2%乳酸2ml–切断右侧迷走神经–切断双侧迷走神经–刺激右侧迷走神经中枢端连续单刺激:强度5v,频率20hz,波宽2ms实验结果图1家兔呼吸运动曲线实验曲线实验结果通气量(ml/分)呼吸频率(次/分)处理前处理后处理前处理后增大无效腔缺氧吸入CO2注射乳酸切断右侧迷走神经切断双侧迷走神经刺激右侧迷走神经中枢端表1各实验项目对家兔呼吸运动的影响动物处死空气注射–大计量,快速耳缘静脉注射注意事项麻醉一定要慢!记录仪必须按record键记录采取保温措施,防止麻醉后体温下降避免过度牵拉神经每项实验后,应等呼吸基本恢复并稳定后再进行下一项及时打实验标记