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微生物实验室的质量控制杜平华中食药监管信息网专家顾问团特约讲师主办单位：中食药监管信息网网址：日（南京）培养基的配制培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培养基的质量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。培养基的配制培养基可按处方制备也可使用按处方生产的符合规定的商品化成品培养基，脱水培养基除附有处方和使用说明外还应注明有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌株和用途。配制时应按使用说明上的要求操作，受潮结块不能使用，确保培养基的质量符合要求。培养基的配制使用容器配制培养基使用的容器应是玻璃器皿或搪瓷器皿等。禁用金属容器如铁、铜、铝容器。实验室指南含代谢药物或抑制剂的培养基应使用专用的玻璃器皿，使用器皿的洗涤程序进行验证。培养基的配制用蒸馏水或纯化水冲洗，并进行清除污物的确认。非洁净器皿，导致抑菌物质进入培养基中。抑菌物质可能是残留的玻璃器皿清洁用的清洁剂或之前玻璃器皿所盛装的物质。实验室指南溶剂应无菌、无抑制或无干扰物质。培养基的配制对配制培养基的过程作详细的记录记录内容配制日期、名称、成分、数量、质量监控结果等进行全面详细记录。实验室应确保所有的试剂（包括储备溶剂）、培养基、稀释剂和其它悬浮液都要有标签进行充分标记。实验室指南实验室应确保所有的试剂（包括储备溶剂）、培养基、稀释剂和其它悬浮液都要有标签进行充分标记。标记内容名称、浓度、贮存条件、配制日期、验证的有效期或建议的贮存期限。制备者应做好相关记录。培养基的制备方法称量为保证培养基质量的稳定可靠，在配制培养基时，按说明书的规定称量，各称量物的重量应记录。培养基的制备方法配制将准确称量的各组分加入溶剂中，完全溶解，如需要可适当加热。但不要加热过度。添加其它组分时，应充分混匀。实验室指南因加热不均匀，微波设备不能用来溶解培养基。培养基的制备方法分装根据试验需要分装试管、倾注平皿、制备斜面。经灭菌的培养基，应在无菌环境下分装，避免污染。实验室指南在无菌室内进行分装，减少被污染。这培养基的制备方法对热敏感的培养基容器应预先进行灭菌，以保证培养基的无菌性。培养基的制备方法矫正pH配制培养基必须矫正pH，并进行验证。矫正pH后的培养基应加热、过滤，使培养基澄清。培养基的灭菌灭菌方法及条件，应进行无菌性和促生长试验进行验证.验证方法同《中國药典2010年版》附录灭菌法。否则会引起变色、透明度降低、琼脂凝固力或PH的变化。培养基的灭菌培养基的灭菌应按照生产商提供或使用者验证的参数进行。商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料。培养基的贮藏-根据使用说明书的要求进行储存。-培养基标签上应标有批号，生产日期、有效期及培养基的有关特性。-所采用的保藏和运输条件应使培养基最低限度失去水分并提供机械保护。培养基的贮藏 配制好的培养基应在验证的条件下贮藏保存在2～25℃避光的环境。若保存于非密闭容器中，一般在三周内使用。若保存于密闭容器中，一般在一年内使用。培养基的贮藏-琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷冻破坏凝胶特性。-琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一般不超过一周，且应密闭包装，若延长保存需经验证确定。-培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压灭菌器中。培养基的贮藏-固体培养基灭菌后的再融化应在水浴中或流通蒸汽进行，只允许一次，放在45～50℃的水浴中，不得超过8小时。-使用过的培养基按照国家污染废物处理相关规定进行。培养基的质量控制实验室配制的培养基监控项目外观、性状、pH、适用性试验、定期的稳定性检查以及培养基有效期的确定。培养基的质量控制验证时间-由同一批脱水培养基配制培养基时，若采用已验证的配制和灭菌程序，那么可不进行批批适用性试验。否则配制的每一批培养基必须进行适用性试验。试验方法-《中国药典2015版》有关规定进行。培养基的质量控制实验室指南每一批培养基都要进行适用性实验;适用性试验方法和项目和标准同我国药典规定培养基的质量控制实验室指南照射的培养基照射的培养基验证照射和无照射培养基的促生长比对试验。贮存条件保质期的验证应确定配的制培养基在贮存条件下的保质期。培养基的质量控制培养基的有效期是指已通过适用性试验的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基储存的时间将取决于一定存放条件（包括容器和密封性）的培养基组成成分的稳定性。培养基的质量控制试验结果处理-适用性试验不符合，应找造出原因，采取行动，防止重复出现，否则不能使用。培养基的质量控制鉴定微生物的诊断试剂质量控制试验与培养基质量控制试验相似选择正确的质控菌株。培养基的质量控制环境监控的培养基应小心防护。最好是终端灭菌，否则使用前应进行100%的预培养。防止将外来的污染带到环境中及避免出现假阳性结果。培养基的质量控制测定PH值灭菌后测定PH值；冷却至室温（25℃）后，进行测定。培养基的PH的范围不得超过规定的±0.2。培养基的质量控制一般性状-制成平板或分装于试管的培养基应检查；容器和盖子的破裂，装量。-固体培养基因水分流失而造成表面产生裂缝或涟漪。-其他如溶血，可能冷藏温度下形成的结晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化还原指示剂的状况，批数量和有效期的检查和记录，培养基的无菌检查等。培养基的质量控制液体培养基观察培养基的颜色，是否有沉淀，微生物污染，氧化还原指示剂的状况等。培养基的质量控制无菌检查用培养适用性试验适用性试验无菌性检查和灵敏度检查检查方法同现行版药典规定培养基的质量控制无菌检查培养基的灵敏度检查菌种金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]枯草芽胞杆菌[CMCC(B)63501]生孢梭菌[CMCC(B)64941]白色念珠菌[CMCC(F)98001]黑曲霉[CMCC(F)98003]培养基适用性检查范围成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基的适用性检查。检查项目促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。培养基适用性检查标准培养基为品质优良的培养基，由中国食品药品检定研究院提供用来检测培养基的质量以及对培养基使用过程中的质量进行评估。实验室指南使用标准培养基的目的用来检测培养基的性能，方法适用性的验证以及对培养基使用过程中的性能进行评估。当对试剂盒的性能进行确定和进行方法验证时，必须进行溯源。谢谢谢谢