实验室用水知识介绍及其经济型解决方案上海和泰仪器有限公司目录水的基本性质水中存在的杂质实验用水所要求的纯度水的纯度的表示方法纯水的分级标准通用的纯水标准纯水的应用水的纯化技术完善的实验室超纯水处理工艺超纯水保持最佳水质的方法上海和泰仪器有限公司水的基本性质•1个水分子(H2O)是由1个氧原子和2个氢原子弯曲键结而成。由于正、负电荷的中心不一致,因此属于极性分子。当2个水分子同时存在时,二者会由静电交互作用与氢键结合,互相吸引并保持一定的距离。而1个水分子可以同时与4个水分子结合,形成晶体般的整齐结构。•水分子聚合体中,由于氢键键结的网状结构会部分断裂,而形成逐次移动变化的状态,因此水在整体上呈现液态,而此结构变化每秒可达1012次。上海和泰仪器有限公司•一般而言,水若含有适量的钠、钾离子及硅酸盐等矿物质,就会觉得好喝,若含有大量残留的盐类,如镁、钙等非酸碱中性盐类,就会觉得难喝。也就是说,所谓的水除了H2O外,还含有许多其它的成分,而这些成分的种类和含量决定了水的味道。•水极易溶解盐类,即使阴阳离子经由静电的交互作用,很强的结合在一起,在水中也很容易电解。这是因为,水分子可以和离子结合产生“水合离子”。离子的半径很小,电荷大的离子会与水分子强力的交互作用,由水分子在离子的周围紧密排列。这时候,阳离子会与带负极矩的氧原子相互作用,而阴离子则形成相反的结构。Back上海和泰仪器有限公司水中存在的杂质•可溶性无机物:无机盐类、溶解气体、重金属、硬度成分(钙、镁等)•可溶性有机物:木质素、单宁、腐植酸、内毒素、RNA分解酶、农药、三氯甲烷、环境荷尔蒙物质、界面活性剂、有机溶剂•微粒子:铁锈、胶体、悬浮物、固体颗粒•微生物:细菌类、藻类Back上海和泰仪器有限公司实验用水所要求的纯度所谓实验,是指对现象所推测的假设加以验证的动作。假设能否被证明为真理,与假设能否具有再现性的结果至关重要。实验的再现性除了要有良好的技巧,还受到所用化学试剂的纯度和分析仪器的精密度的影响。实验中用来配置溶液的化学试剂,及所使用的水的纯度也非常重要。假设水中污染物对实验检测会造成影响,就必须去除这些物质。此外,为了取得良好的再现性结果,使用能保持稳定水质的纯水是必要的。随着实验用的分析系统灵敏度的提高,对水的纯度有了更高的要求。1ppm=1mg/L1ppb=1μg/L1ppt=1ng/L=1μg/mlBack上海和泰仪器有限公司•在水中,将距离1cm的两片表面积为1cm2大小的电极加以通电,来监测两极间的导电率,通过所加电压和测得的电流能够获知两极间的电阻值,这个数值在水质分析中通常被称为电阻率或比电阻,其单位用MΩ.cm(megaohm-centimeter)来表示。电阻率的倒数称为导电率或电导率,用μs/cm(microSiemenspercentimeter)来表示。这两个参数是表示水的纯度的最常用参数。•将自来水中的离子去除,会使得电阻率值升高(导电率降低),单并非无限制的增加,这是因为部分水分子会电离为氢离子和氢氧根离子,其电阻率值极限值18.248MΩ.cm(25℃)。此外,电阻率值会随着水的电离常数而改变,因而会受到水温的影响。例如,25℃的超纯水,其电阻值为18.2MΩ.cm,但在0℃则为84.2MΩ.cm,100℃则为1.3MΩ.cm。在25℃附近,当温度上升1℃,其电阻值将下降0.84MΩ.cm。因此,多使用补偿至25℃的电阻率值来做衡量标准。•此外像总有机碳含量(TOC),热源内毒素含量,细菌含量,颗粒含量,微生物含量,总溶解固体含量(TDS)等也常常被用作补充说明水质的重要参数。因此,水的纯度标准通常由以上这些参数的一项或几项来综合说明、分级。水的纯度的表示方法Back上海和泰仪器有限公司纯水的分级标准•实验室纯水可分为4个常规等级:纯水、去离子水、实验室Ⅱ级纯水和超纯水•纯水:纯化水平最低,通常电导率在1-50μs/cm之间。它可经由单一弱碱性阴离子交换树脂、反渗透或单次蒸馏制成。典型的应用包括玻璃器皿的清洗、高压灭菌器、恒温恒湿实验箱和清洗机用水。上海和泰仪器有限公司•去离子水:电导率通常在1.0-0.1μs/cm之间。通过采用含强阴离子交换树脂的混床离子交换制成,但它有相对较高的有机物和细菌污染水平,能满足多种需求,如清洗、制备分析标准样、制备试剂和稀释样品等。•实验室Ⅱ级纯水:电导率1.0μs/cm,总有机碳(TOC)含量小于50ppb以及细菌含量低于1CFU/ml。其水质可适用于多种需求,从试剂制备和溶液稀释,到为细胞培养配备营养液和微生物研究。这种纯水可双蒸而成,或整合RO和离子交换/EDI多种技术制成,也可以再结合吸附介质和UV灯。上海和泰仪器有限公司•超纯水:这种级别的纯水在电阻率、有机物含量、颗粒和细菌含量方面接近理论上的纯度极限,通过离子交换、RO膜或蒸馏手段预纯化,再经过核子级离子交换精纯化得到超纯水。通常超纯水的电阻率可达18.2MΩ-cm,TOC10ppb,滤除0.1μm甚至更小的颗粒,细菌含量低于1CFU/ml。超纯水适合多种精密分析实验的需求,如高效液相色谱(HPLC),离子色谱(IC)和离子捕获-质谱(ICP-MS)。少热源超纯水适用于像真核细胞培养等生物应用,超滤技术通常用于去除大分子生物活性物质,如热源(结果为0.005IU/ml)以及无法检测到的核酸酶和蛋白酶。Back上海和泰仪器有限公司目前世界上比较通用的纯水标准主要有以下几个:国际标准化组织(ISO),美国临床病理学会(CAP)试药级用水标准,美国测试和材料实验社团组织(ASTM),临床试验标准国际委员会(NCCLS),美国药学会(USP)等。同时,我国也有相应的纯水标准:中国国家电子级超纯水规格GB/T11446-1997和中国国家实验室用水规格GB6682-92等。因此市面上绝大多数的纯水系统,无论是进口的还是国产的,都是依据这些标准来设计流程的。通用的纯水标准Back上海和泰仪器有限公司电阻率25℃MΩ*cm硅≤μg/L铜≤μg/L锌≤μg/L镍≤μg/L钠≤μg/L钾≤μg/LEW-I≥18*20.20.20.10.50.5EW-II≥15**1011122氯≤μg/L1μm颗粒≤个/ml细菌≤个/ml硝酸根≤g/L磷酸根≤μg/L硫酸根≤μg/LTOC≤μg/LEW-I10.10.0111120EW-II150.1111100注*(95%时间不低于17),**(95%时间不低于13)中国国家电子级超纯水规格GB/T11446.1-1997Back上海和泰仪器有限公司PH25℃电导率25℃μS/cm比电阻25℃MΩ*cm可氧化物质以(O)计mg/L吸光度254nm,1cm蒸发残渣mg/L(105±25℃)可溶性硅以(sio2)计,mg/L一级——≤0.1≥10——≤0.001——<0.01二级——≤1.0≥1<0.08≤0.01≤1.0<0.02三级5.0-7.5≤5.0≥0.2<0.40——≤2.0——中国国家实验室用水规格GB6682-92标准Back上海和泰仪器有限公司比电阻25℃MΩ*cm氧化矽mg/L.max重金属mg/L.maxKMnO4消毒分.min钠mg/L.max氨mg/L.max微生物PH值CAP-Ⅰ≥100.010.01600.10.1微少6.0-7.0CAP-Ⅱ0.50.010.01600.010.01微少6.0-7.0CAP-Ⅲ0.20.010.01600.10.1微少6.0-7.0NCCLS≥100.05————————10——美国临床病理学会CAP试药级用水标准美国临床检查标准化委员会NCCLS用水标准Back上海和泰仪器有限公司纯水的应用目前纯水主要应用在两大领域:一、生命科学应用领域二、分析和常规应用领域•生命科学应用方面,主要有:细菌细胞培养,临床生物化学,电泳,电生理学,酶联免疫吸附分析,内毒素分析,组织学,水栽培,细胞免疫化学,哺乳动物细胞培养,介质制备,微生物分析,分子生物学,单克隆抗体研究,植物组织培养,放射性免疫分析等等。•分析和常规应用方面,主要有:蒸馏水器供水,蒸汽发生器,玻璃器皿清洗,样本稀释和试剂制备,超纯水系统供水,固相萃取,普通化学,电化学,分光光度计,TOC分析,水质分析,离子色谱,火焰法原子吸收(Flame-AAS),石墨炉原子吸收(GF-AAS),高效液相色谱(HPLC),液质联用(HPLC-MS),电耦合等离子光谱仪(ICP-AES),等离子质谱(ICP-MS),痕量金属检测,气质联用(GC-MS)等等.上海和泰仪器有限公司对水的纯度要求极高的几个主要应用:•电泳:电泳用水最重要的要求是生物活性物质诸如内毒素(通常小于0.05EU/ml),核糖核酸酶和蛋白酶(不可测定)的去除。最好用电阻率18.2MΩ-cm,TOC10ppb,0.1μm或更小孔径的微滤以及细菌含量低于1CFU/ml的超纯水作为供水。•内毒素分析:从分离到细胞培养的各种应用领域用水都要求规定内毒素指标,内毒素最大指标范围从0.25IU/ml到0.03IU/ml。对内毒素分析,适用少内毒素的超纯水,通常是0.05IU/ml或更小。超滤是制造少内毒素超纯水的必须手段(国际上通常使用MWCO为5000道尔顿的超滤膜),而且可以结合UV等进行光氧化。上海和泰仪器有限公司•石磨炉原子吸收光谱:GF-AAS与其他原子吸收光谱测定的不同之处是,其火焰炉被电子发热石墨管或棒替代,能在元素分析中达到很高的灵敏度。GF-AAS要求顶级纯水系统,提供ppt级的杂质水平,18.2MΩ-cm的电阻率和低TOC水平。内置监测仪提供纯度保证,最终的水质指标是由良好的预处理系统,加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。•电感耦合等离子光谱仪:在ICP-AES应用中,对不同元素的灵敏度明显不同,但金属、过渡金属、磷和硫检测下限都在ppb范围内。ICP-AES对水的纯度要求相当严格,电阻率大于18MΩ-cm的超纯水是必须的,TOC的要求一般不太重要,前处理要求反渗透或离子交换。上海和泰仪器有限公司•等离子质谱:ICP-MS可被用于测定在ppt水平的元素。对这种灵敏的ICP-MS分析工作,水的纯度要求非常严格,要求水中杂质在ppt水平,电阻率18.2MΩ-cm和较低的TOC。最终的水质指标是由良好的预处理系统,加上连续循环流路和纯水的超纯化而实现。•质谱分析:质谱能对混合物进行痕量分析,由于其高灵敏度,要求最高纯度的用水。所有的样本制备和前处理,例如固相萃取都需要超纯水。要求水中杂质在ppt水平,进行有机物分析时要求电阻率18.2MΩ-cm,非常低的TOC,一般指标小于3ppb。上海和泰仪器有限公司•痕量金属检测:先进的现代分析仪器不断提升分析的灵敏度。痕量元素现在通过使用诸如ICP-MS技术,可测定在ppt和亚ppt水平的物质。痕量分析工作需要不含可测定成分的纯水,并且水质要求适用于最严格最灵敏的ICP-MS工作。因此,空白试剂,标准样稀释和样本制备均需要纯度最高的超纯水,甚至需要在无尘室中操作。•随着科技的发展,越来越多的应用开始要求使用纯度高的超纯水。Back上海和泰仪器有限公司水的纯化技术1、微孔深层过滤2、活性碳吸附3、反渗透4、离子交换5、EDI电渗析6、蒸馏7、微滤8、超滤9、紫外灯10、KDF法Back上海和泰仪器有限公司微孔深层过滤•对颗粒的通过设置了物理屏障,并根据过滤微细颗粒的大小分级,由缠绕纤维或压紧的物质形成多孔矩阵,通过吸附或捕捉方式截留颗粒。深层过滤器(一般为1-50μm)通常作为一种经济的纯化方式用于截留大量的悬浮固体,并保护下游的纯化设备不被污染和堵塞。它们需要定期更换。Back上海和泰仪器有限公司活性碳吸附•活性碳通常用于预处理系统以去除进水中的氯和氯胺,防止它们破坏过滤膜和离子交换树脂。•大部分活性碳是由椰壳或煤在有水蒸气和CO2的条件下,经800-1000℃煅烧而形成具活性的木炭,经过酸洗去掉残余氧化物和其他溶解物质。用于水处理的活性碳通常孔径范围在500-1