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日本神户牛肉（雪花牛肉）日本神户牛，是当今世界公认的品质最优秀的良种肉牛，市场价格2000/公斤天价。如何将这种优质的牛快速、大量繁殖呢？有哪些方法？动物体细胞核移植技术进行克隆体外受精和早期胚胎培养技术进行试管动物繁殖一、胚胎移植1.胚胎移植P74将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。胚胎来源：雌性动物早期胚胎或体外受精及其他方式得到的胚胎。供体：提供胚胎的个体。受体：接受胚胎的个体。胚胎移植成功的标志：移植的胚胎在供体能正常发育并分娩胚胎移植成功的条件：1）供体、受体为同种生物2）供体、受体的生理状态要相同胚胎移植需考虑的问题：1）胚胎移植任何动物子宫都能发育吗？2）为什么能收集到胚胎？3）移植的胚胎与受体会发生免疫排斥吗？4）胚胎移植与受体子宫能建立联系吗？供体胚胎遗传性状会不会改变？3.胚胎移植的生理学基础1)供体和受体需相同的生理环境2)早期胚胎处于游离状态，为胚胎收集提供了可能3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥4)胚胎与受体能建立正常的联系,遗传物质不变思考与讨论:1、胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境一致？如，供、受体的发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供体内的位置相同或相似吗？供体和受体进行同期发情处理，使生理条件一致。胚胎移入子宫的位置与供体相同或相似，受体子宫对应的卵巢须有黄体存在。2、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。你认为这样的概括正确吗？胚胎移植实质：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移3、胚胎移植的基本程序阅读课文P77图19，思考问题：1:选择怎样性状的供体牛和受体牛？2:为什么要对供体牛和受体牛用激素进行同期发情处理？3:用什么激素对供体母牛进行超数排卵处理？4:选择配种的公牛要具备什么性状？5:冲卵是指什么？6:产生的胚胎需要进行质量检查，这时胚胎一般发育到什么阶段？选择及同期发情处理超数排卵处理配种或人工受精胚胎收集胚胎检查胚胎保存胚胎移植妊娠检查分娩3、胚胎移植的基本程序（1）对供体、受体进行选择供体：遗传性能和生产性能优秀的个体受体：健康和具正常繁殖能力的个体处理：同期发情具体做法：注射促性腺激素（2）超数排卵处理具体做法：注射促性腺激素（3）配种或人工授精精子来源：同种优良的雄性动物（4）胚胎的收集配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。冲卵是把母牛的卵子冲出来吗？（5）对胚胎进行质量检查你知道检查的目的吗？此时胚胎处于什么时期？检查胚胎的发育状况，处于桑椹胚或囊胚（6）胚胎的保存或移植胚胎保存的条件是什么？－196℃的液氮中保存或直接向受体移植（7）胚胎的移植方法一：手术法引出子宫，将胚胎注入子宫角，缝合创口。方法二：非手术法将胚胎的移植管送入受体牛子宫，注入胚胎。（8）对受体母牛进行是否妊娠的检查（9）受体母牛产下胚胎移植的犊牛选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数排卵供体公牛配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）总结：【归纳总结】①该过程中两次使用促性腺激素，第一次对受、供体同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵。②该过程中的两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。③产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体牛，性别取决于公牛提供的精子，与受体牛没有关系。④冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子课本P75、图3-17“胚胎移植的现状和意义”，思考讨论，总结出胚胎移植的意义。4、胚胎移植的现状和意义1)加速育种工作和品种改良；2)大量节省购买种畜的费用；3)一胎多产；4)保存品种资源和濒危物种；充分发挥雌性优秀个体的繁殖潜能D二、胚胎分割阅读课本，思考以下问题：（1）胚胎分割的概念（2）胚胎分割特点（3）胚胎分割的理论基础（4）胚胎分割操作过程1.概念采用显微手术（机械方法）方法将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体，以得到同卵双胎或同卵多胎的技术2.特点：后代遗传物质相同胚胎分割是无性繁殖或克隆方法3、理论基础动物胚胎细胞的全能性。胚胎分割的时期：囊胚或桑椹胚。4、选择的胚胎：发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要仪器：实体显微镜和显微操作仪。6、具体操作用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。胚胎分割移植的显微操作7、操作注意事项：①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。8、胚胎分割技术的缺陷（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。9、胚胎分割技术的应用:为转基因技术、性别控制技术提供活胚材料。三.胚胎干细胞阅读课本，思考以下问题：（1）什么是胚胎干细胞？简称是什么？（2）胚胎干细胞的来源。（3）胚胎干细胞的特性。（4）胚胎干细胞的应用。1.概念：简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。2.特点:（1）形态：体积小.细胞核大,核仁明显；（2）功能：具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分化；（3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。干细胞的分类：（1）全能干细胞（2）多能干细胞（3）专能干细胞3.主要用途阅读课本相关内容，说说胚胎干细胞有什么具体用途？（1）治疗人类的某些顽症。人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病，如帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆症等，已成为医学上尚未攻克的顽症。利用ES细胞可以诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。目前，在动物实验方面，用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症。（2）培育出人造组织器官，用于器官移植随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，还可以培育出人造组织器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。（3）ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。诱导因子：诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。4.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的重要原因是（）A.细胞分裂B.细胞特化C.细胞分化D.细胞增殖C体细胞核移植的过程供体体细胞细胞培养体细胞卵巢卵母细胞MII期卵母细胞去核无核卵母细胞注入细胞融合重组细胞重组胚胎胚胎移植代孕母体生出与供体遗传物质相同的个体发育理论基础：动物细胞核的全能性采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛受精卵胚胎移植受体牛良种犊牛“试管牛”工厂化生产的技术流程图良种牛体外受精胚胎4、胚胎移植的基本程序阅读课本，说出胚胎移植的基本程序包括哪几个步骤？供体、受体的选择和同期发情处理配种或进行人工授精胚胎的收集、检查、培养或保存胚胎移植移植后的检查完成课本P81页探究1的流程图，并思考问题。1.应该怎样选择供体公、母牛和受体母牛？在②中，为什么用促性腺激素处理供体母牛？在此之前，需要对供体和受体母牛进行同期处理吗？2.在流程图中，哪一步需要进行冲卵？冲卵是把母牛的卵子冲出来吗？为什么在第7天进行冲卵？3.对胚胎进行质量检查的目的是什么？此时胚胎处于什么时期？供体公、母牛：遗传性能优秀的个体；受体母牛：健康和正常繁殖能力的个体。超数排卵，获得较多胚胎。需要。第④步，冲卵是将供体母畜体内的受精卵冲出来。检查胚胎的发育状况处于桑椹胚或囊胚