临床检验医学的量值溯源

临床检验医学的量值溯源北京九强公司三级检测方法关系图常规方法参考方法决定性方法加围增范用应加增度确准分级依据：IFCC根据分析方法的准确性与精密度的不同。检测方法的分级决定性方法（definitivemethod)：准确度最高，系统误差最小，用于评价参考方法和一级标准品。参考方法（referencemethod）：准确度与精密度已充分证实的分析方法，干扰，系统误差小，用于鉴定常规方法和二级标准品。常规方法（routinemethod）：性能指标符合临床需要，有适当分析范围，经济实用，用于临床常规标本的检测。决定性方法（definitivemethod)定义：是指准确度最高，系统误差最小，经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法，其测定结果与真值最为接近。主要方法：重量分析法、中子活化法、同位素稀释-质谱分析法（ID-MS）应用：由于技术要求太高，费用昂贵，这类方法不直接用于鉴定常规方法的准确性，只用于评价参考方法与一级标准品。参考方法（referencemethod）定义：是指准确度与精密度已经被充分证实，且经公认的权威机构（国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等）颁布的方法。这类方法干扰因素少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好，重复测定中的随机误差可以忽略不计。主要方法：原子吸收分光光度法、火焰光度法、免疫化学法，离子交换层析法等应用：能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受；用于鉴定二级标准品和为质控血清定值；用于商品试剂盒的质量评价。常规方法（routinemethod）定义：应具有足够的精密度、准确度和特异度，有适当的分析范围，经济实用，其性能指标符合临床或其它目的的需要。主要方法：溴甲酚绿法、双缩脲法、J-G法等。应用：临床常规检验使用，常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法（recommendedmethod）。临床生化部分项目的三级方法决定性方法参考方法常规方法钾ID-MS火焰光度法离子选择电极钠中子活化法火焰光度法离子选择电极总蛋白——凯氏定氮法双缩脲法肌酐ID-MS离子交换层析苦味酸比色法葡萄糖ID-MS己糖激酶法G氧化酶法临床生化部分项目的三级方法项目决定性方法参考方法钙ID-MS原子吸收分光光度法氯电量滴定法、中子活化法电流滴定法镁ID-MS原子吸收分光光度法磷ID-MS钾ID-MS、中子活化法火焰光度法钠重量分析法、中子活化法火焰光度法白蛋白免疫化学法总蛋白凯氏定氮法肌酐ID-MS、离子交换层析法尿素ID-MS离子交换层析法尿素酶法尿酸ID-MS尿酸酶法（紫外法）胆红素——重氮反应法葡萄糖ID-MS己糖激酶法胆固醇ID-MSAbell-Kendall法，胆固醇氧化酶法甘油三酯ID-MS酶法AST（GOT）——MDH-NADH法ALT（GPT）——LDH-NADH法转肽酶（r-GT）——连续监测产物生成法肌酸激酶——NAD+偶联法溯源性概念溯源性(可追溯性）Traceability通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家测量标准或国际测量标准联系起来的特性［ISO17511;VIM：1993，定义6.10］溯源性的要求欧盟指令要求：“校准物和（或）质控物的定值，必须通过现有较高级别的参考测量程序和（或）参考物质保证其溯源性”溯源性的目的对于临床实验室定量检测来说，最基本的要求是要保证试验结果足够准确（正确和精密），以保证临床的正确诊断并且具有时间和空间的可比性。溯源性应用原理利用参考系统（尤其是参考方法和参考物质）提高检验结果的准确性和可比性参考系统是溯源的基础参考系统包括三个方面参考方法参考物质参考实验室其中最主要的是参考物质和参考方法，对于有参考方法的检验项目，关键又是参考方法参考方法分类参考方法分为一级参考方法/决定性方法二级参考方法/参考方法☺在临床检验领域所指的参考方法一般为二级参考方法。参考物质•一级参考物质：高度纯化的分析物•二级参考物质：基质与实际样本相似的参考物质，二级参考物质一般由二级参考方法定值溯源性有关文件•ISO17511（2003），体外诊断医学器具－生物样本中量的测量－校准物质和质控物质定值的计量学溯源•ISO18153（2003），体外诊断医学器具－生物样本中量的测量－酶催化浓度校准物质和质控物质定值的计量学溯源•ISO15193（2002），体外诊断医学器具－生物样本中量的测量－参考测量程序的表述•ISO15194(2002),体外诊断医学器具－生物样本中量的测量－参考物质的描述•ISO15195(2002),体外诊断医学器具－生物样本中量的测量－参考测量实验室的要求溯源性国际机构检验医学溯源性联合委员会（JCTLM）2002年成立，由国际计量委员会（CIMP）、国际临床化学与检验医学联合会（IFCC），国际实验室认可合作组织（ILAC）共同成立JCTLM的两个工作小组•涉及参考测量程序和参考物•涉及参考测量实验室网络ISO17511校准品和质控品定值的量值溯源图制造商工作校准品制作商产品校准品常规样品结果制造商选定测量程序制造商常设测量程序终端用户常规测量程序一级校准品二级校准品一级参考测量程序二级参考测量程序SI单位不确定度溯源性量值溯源量值溯源的理想情况是可溯源至国际单位制SI，要溯源至国际单位，必须有一级参考测量程序目前满足上述条件的检验指标有25-30种定义明确的小分子化合物（如某些电解质，代谢产物和底物类、甾体激素、甲状腺激素）量值溯源检测不能溯源到SI的情况有国际约定参考测量程序（非一级参考测量程序）和一种或多种用此参考测量程序定值的国际约定校准物质，如GHb有一种国际约定参考测量程序,无国际约定校准物质，如高密度脂蛋白胆固醇一种或多种国际约定校准物质及定值方案，无国际约定参考测量程序，如抗体和肿瘤标记物等300多种指标既无参考测量程序也无校准的参考物质临床实验室的溯源欲使医学实验室的测量结果具有溯源性，最直接、简便的途径是进入“不间断的溯源链”RANDOX的校准品是如何溯源的溯源性的验证参考物质＋参考程序检测体系校准品＋仪器＋试剂检测结果的比对结果具有可比性证明溯源性有保证结果不具可比性证明溯源性缺乏保证参考体系第一个试验日立体系奥林巴斯体系贝克曼体系参考物质A例：IRMM/IFCC-454靶值186校准参考物质A人血清B测定结果130120127185186185为什么测定值会产生差异？参考物质A的测定–仪器和试剂的分析差异血清B的测定–仪器和试剂的分析差异–基质效应第二个试验日立体系奥林巴斯体系贝克曼体系校准参考物质A人血清B测定结果130120127185186185人血清B130120127应用人血清B校准的结果•基质问题消除了•检测系统之间差异确定了•可以追溯到赋值的参考物质朗道校准品=人血清B第二个试验日立体系奥林巴斯体系贝克曼体系校准参考物质A朗道校准品测定结果130120127185186185朗道校准品130120127生产厂家如何保证溯源性校准品的生产符合ISO17511、18153和13485规范及欧盟CE认证规范以上所示的图表即是RANDOX校准品赋值和验证的过程RANDOX校准品是完全人源的基质，真正类似病人的样本，最大限度避免基质效应谢谢