细菌培养标本采集及注意事项

细菌培养标本采集及注意事项检验科细菌培养必须正确采集标本，否则直接影响到培养及鉴定结果。合格的标本，才有可靠的检验结果，可以指导临床诊疗，为临床科学用药和成功的控制感染提供依据，正确、合理使用抗菌药物是患者早日康复。一、血液培养•当微生物（细菌）侵入血液迅速繁殖,超出免疫系统清除这些微生物(细菌)的能力时形成菌血症。1、血培养中常见的分离菌：革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌凝固酶阴性葡萄球菌肺炎克雷伯菌肺炎链球菌阴沟肠杆菌A群B群链球产气肠杆菌肠球菌伤寒沙门菌绿脓杆菌鲍曼不动杆菌2、采血指征：发热（体温≥38°C）或低温(≤36°C)、寒战、白细胞计数＞10.0／L、CRP↑、中性粒细胞比率↑、皮疹、皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、血液病患者出现粒细胞减少、血小板减少、当患者出现上述一种或几种体征时，应及时做血培养。新生儿可疑菌血症，应同时做尿液、脑脊液培养。3、采血时机：尽量在使用抗菌素之前采血、尽量在寒战和发热初起时采血、如患者已经使用抗菌药物进行治疗，应在下次用药之前采血。4、血液标本的采集方法：a、75%酒精清洁局部皮肤30s以上。b、待皮肤干后，再用1%-2.%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，从穿刺点中心部位向外画圈消毒，范围不应小于5㎝（直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。c、皮肤碘酒干后（约1分），用75%酒精脱碘后，再穿刺采集血液。采血量成人每瓶5—10ml，婴幼儿1—5ml。d、培养瓶消毒程序：70%酒精擦拭血培养橡皮塞，作用60s；用无菌棉签清除橡皮塞表面残余酒精。用注射器采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。5、采血的合适套数：细菌和真菌均一过性存在于血液中，所以单次血培养检测的敏感性是有限，为了保证对菌血症的检出率：每次血培养在不同部位同时或短时间（15分钟）采集两套：成人每套血培养采两瓶：需氧瓶+厌氧瓶。儿童每套1瓶：需氧瓶（绝大多数情况）。当儿童体重≥13KG时需采集需氧瓶和厌氧瓶。成人采血量≤20ml，首先注入厌氧瓶.然后再注入需氧瓶。采血量少时要注入需氧瓶。6、厌氧菌血症培养高危人群：腹腔感染、妇产科疾病、外科手术、创伤、烧伤、肿瘤、免疫抑制、吸入性肺炎、糖尿病、心血管病、慢性口或鼻窦感染、腹部症状、咬伤、破伤风、蜂窝组织炎（尤其是肛周及骶周）脓毒性静脉炎、等。(为什么使用厌氧瓶？它不仅培养厌氧菌，还能提高兼性厌氧菌的检出率。临床常见菌血症：厌氧菌平均约占菌血症4%，而检出更多的是兼性厌氧菌。16%链球菌、17%肠杆菌仅厌氧瓶报阳)。全自动细菌测定系统7、送检标本：血液、各种无菌体液（脑脊液、骨髓、胆汁、胸水、腹水、心包穿刺液等等。）注意事项a.怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38.5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。b.对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，也应在下次用药前采血。c.切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。d.血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。e.每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。f.采血，周围静脉为宜。g.严格执行三步消毒后采血。注入血液时不能将注射器内的空气加入血瓶内。绝对不能超出10ml。二、呼吸道标本培养人体的上呼吸道有常居菌群，下呼吸道是无菌，但下呼吸道分泌物经上呼吸道排出时通常受到正常菌群的污染，故要正确采集标本，并结合临床表现是否有该细菌引起的感染。1、呼吸道标本（痰）中常见的分离细菌革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌链球菌（草绿、肺炎、化脓性链球菌）肺炎克雷伯及其它克雷伯菌葡萄球菌（表皮.金黄色等其它葡萄球菌）大肠埃希菌及其它肠杆菌、微球菌、肠球菌沙雷菌、变形杆菌。不动杆菌结核分枝杆菌、酵母样真菌。等等。铜绿假单胞菌及其它假单胞菌2、痰：自然咳痰法:清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出呼吸道深部的脓痰，直接吐入干净、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量要≥1ml。标本要尽快送检。咳嗽无力或昏迷，可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸痰及支气管灌洗液送检。4、痰量极少者可用45℃3%-10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉拭子采集标本。或用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。5、咽拭子、口腔拭子：（无菌拭子）患者清水漱口后，有检查者将其舌外拉，用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复檫拭数次;化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌时直接用棉拭子在病灶部位檫拭。注意事项尽可能在使用抗菌素之前采集标本，痰标本的采集以晨痰为佳，采样后应立即送检以免污染。忌送唾液。采咽拭子时，棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液。采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶。泌尿道标本培养尿路感染通常有患者自身的常居菌上行至膀胱所致。1.尿中常见分离菌革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌金黄色葡萄球菌大肠埃希菌血浆凝固酶阴性葡萄球菌克雷伯菌属肠球菌变形杆菌属A群链球菌淋病奈瑟菌结核分枝杆菌肠杆菌属念珠菌假单胞菌属沙雷菌属动杆菌属3、中段尿（1）采集方法①女性采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴，用手指将阴唇分开排尿，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿2-3ml于无菌管内。②男性用肥皂水清洗尿道口，或0.1%的碘伏溶液消毒尿道口，上翻包皮，灭菌纱布擦干，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿2-3ml于无菌管内。③采集标本以晨起第一次尿液为佳④留置导尿者采集法拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液2-3ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。2、泌尿系统临床诊断为：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热，并具有下列情况之一：a、尿检白细胞男性≥5个/高倍视野，女性≥10个/高倍视野。b、有典型的尿路感染症状c、有肉眼可见脓尿或血尿d、尿分析白细胞和／或亚硝酸盐阳性e、不明原因的发热而无其他局部症状f、留置导尿管的病人出现发热g、膀胱排空功能受损h、泌尿系统疾病手术前注意事项a.若细菌培养结果为两种或两种以上细菌，需考虑污染可能，建议重新留取标本送检。b.尿液中不得加入防腐剂，消毒剂否则影响阳性检出率。脓液及病灶分泌物微生物（细菌）存在于周围环境中，也存在于皮肤、粘膜表面，它们通过破坏的皮肤或粘膜进入通常无菌的组织引起感染，在一个或多个解剖部位形成小脓庖或包裹性脓肿。细菌和真菌（条件致病菌或致病菌）都可导致炎性渗出，渗出物由白细胞、侵入病原体(细菌)、体液及纤维蛋白混合组成，即：脓液。1、伤口：⑴表面伤口拭子采集方法①皮肤与皮下组织，包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液；③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓液分泌物或组织送检；④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物，拭子放在运送培养基中立即送检。注意事项：不要采集创口表面的渗液。2.伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后，用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检。②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本；③当创伤出血时，敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本，此时获得阳性结果机会甚少。3.烧伤创面①烧伤创面需要脓性分泌物，焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色，烧伤边缘水肿。患者发烧38℃或低体温36℃，合并低血压。②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。③由于创面部位不同，细菌种类也不尽相同，要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。胃肠道标本培养正常人的肠道栖居大量的不同种类的微生物（细菌），具有维护健康的重要作用。疾病时致腹泻。1、粪便培养检查的送检指征：a、粪便涂片镜检白细胞＞5／HP.b.重症腹泻.c.体温＞38.5℃.d.血便.e.便中有脓液.f.未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者.g.来自疫区的患者。2、粪便采集:a.选取脓血、黏液粪便2-3g，液体粪便取絮状物1-2ml。盛于干净干燥盒中及时送检。肛拭子在无法获得粪便的情况下，可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4-5cm（幼儿2-3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出，置运送培养基中送检。注意事项①标本要采集新鲜的，陈旧标本影响阳性检出率；②切忌粪尿混合；③标本在病理早期或治疗前采集；④一般认为用抗菌药三天后，标本培养病原菌阴性。⑤采集标本时忌用吸水性物品采集或送检。（如棉签、或尿不湿、卫生纸、等。）脑脊液1、采集方法：无菌方法收集脑脊液3-5ml，置于无菌试管或注射器中立即送检。2、注意事项（1）采集标本后立即送检，因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡；（2）疑为上述细菌感染时，应注意保温。穿刺液标本穿刺液：包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。1、采集方法：胸腹水采集5-10ml,心包液、关节液收集2-5ml，置于无菌试管或注射器中，立即送检。注意事项⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1-2天后进行；⑵疑为淋病性关节炎患者的关节液，采集后立即送检。⑶不能用棉拭子浸蘸标本送检。⑷注明标本名称：如、胸水或腹水、关节液等等。