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1中药显微鉴别应用简介23洋葱表皮细胞结构图4洋葱表皮细胞结构5主要内容一、显微鉴别的概述二、常用中药材的显微鉴别特征三、显微镜的结构与使用简介四、中药显微制片操作五、中药材及中成药显微鉴别实例6显微鉴别概述显微鉴别——利用显微镜观察药材的组织构造、细胞形状及其后含物的特征，用以鉴定药材真伪的一种方法。特点经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强历史上世纪50年代，中国科学院院士、中国生药学研究的创始人徐国钧先生开始开展中药材及中成药显微鉴别研究，先后完成石斛夜光丸、六味地黄丸等100多种中成药的显微鉴别，打破了“丸散膏丹，神仙难辨”传统认识，为后人留下了宝贵的显微鉴别经验和资料。应用《中国药典》从1977年版一部开始，在中药材和中药成方制剂[鉴别]项下收录了显微鉴别内容，此后历版《药典》不断充实并予以完善。7891011显微鉴别概述定义：特点：经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强12常用中药材的显微鉴别特征植物细胞细胞后含物13（一）植物细胞细胞：是构成植物体形态结构和生命活动的基本单位。特点：形状多样：随植物种类及在植物体内存在部位和行使机能不同而异。大小悬殊：一般细胞直径在10μm～100μm之间，小的直径只有0.1μm，长的如苘麻的纤维细胞可长达200mm。14常见植物细胞类型薄壁细胞：组成植物体的基本组织，为活细胞，含多种内含物。显微镜下细胞壁薄。15常见植物细胞类型木栓细胞：存在于木本植物的树皮或根皮，细胞壁内渗入了脂肪性的木栓质，隔绝外界的水和空气，排列紧密，对植物内部组织起保护作用，为死细胞。16香加皮草酸钙方晶石细胞长方形或类多角形木栓细胞棕黄色，多角形。乳管含无色油滴状颗粒淀粉粒甚多，单粒类圆形或长圆形17常见植物细胞类型石细胞为细胞壁强烈木质化的厚壁细胞，在植物体内存在广泛，分布：根、茎、叶、果实、种子。果皮、种皮中较多，形成坚硬的保护组织。如椰子、核桃坚硬的内果皮。特点：单个散生或群生；形状多样；壁极厚，木化、栓化、角化细胞腔小；形成分枝纹孔道。18石细胞19枸杞子：种皮石细胞淡黄色，壁厚，波状弯曲。20黄芩石细胞：类圆形、类方形或长方形，壁较厚或甚厚21鸡血藤石细胞：成群，有的含有红棕色物质或方晶22鸡血藤石细胞：成群，有的含有红棕色物质或方晶23常见植物细胞类型花粉粒细胞功能为植物生殖细胞，存在于花类药材的雄蕊上。形态特征外壁多具雕纹和萌发孔，是花类药材的主要鉴别特征。24不同植物的花粉粒25常见植物细胞类型纤维：多存在于植物的木质部和韧皮部，起支撑作用。显微镜下为两端尖斜的长形细胞，具有全面增厚的次生壁，壁上有少数纹孔。有的纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。如鸡血藤、黄柏26鸡血藤—晶纤维27黄柏—晶纤维28黄芩—韧皮纤维微黄色梭形孔沟明显两头尖或斜尖29常见植物细胞类型导管：主要存在于植物的木质部中，起输送水分和无机盐的作用，镜下呈长管状或筒状，细胞壁不全面不均匀增厚，根据增厚情况，分为环纹、螺纹、梯纹、网纹及孔纹导管。30环纹网纹梯纹螺纹孔纹31甘草—具缘纹孔导管32（二）细胞后含物后含物的概念：细胞在代谢过程中产生的营养物质、废物和储藏物质统称为细胞后含物。贮藏的营养物质主要为淀粉、蛋白质、脂肪油，另有多糖团块及菊糖等。代谢废物主要为晶体，有草酸钙结晶和碳酸钙结晶以及砂晶。331）淀粉粒淀粉粒：葡萄糖分子聚合而成的长链碳水化合物，在细胞中以颗粒状态存在，称为淀粉粒。所有的薄壁细胞中几乎都有淀粉粒的存在，尤以根、根茎及种子中为多。多数淀粉粒表面都有层纹和脐点，不同植物淀粉粒大小、层纹、脐点各有特征，可以作为药材的鉴定依据之一。单粒：只有一个脐点和围绕脐点的许多轮纹。如山药、川贝母等。单粒淀粉多见复粒：由若干分粒组成，有两个以上的脐点，每个脐点各有轮纹围绕。34山药的淀粉粒单粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形，脐点点状、人字状等，可见层纹35马铃薯淀粉粒浙贝母淀粉粒362)结晶晶体是植物细胞的代谢废物，常见的有两种类型：草酸钙结晶和碳酸钙结晶（桑叶）。草酸钙结晶：为无色半透明或稍呈暗灰色的晶体，一般一种植物只能见到一种形状，少数有两种或多种（如曼陀罗叶），在同一植物中晶体的分布以及形态特征较稳定，是植物显微鉴别的主要特征之一37草酸钙结晶的类型①簇晶：由许多八面体、三棱形单晶体聚集而成，如：大黄、人参、白芍等。②单晶通常呈正方形、长方形、斜方形等，包括方晶、砂晶、棱晶等。例如：葛根、甘草等。③针晶晶体呈两端尖锐的针状，在细胞中多成束存在，称针晶束，一般存在于单子叶植物的粘液细胞中，在双子叶植物中较少见。如：半夏、山药、巴戟天、茜草等。38簇晶大黄簇晶39方晶香加皮的方晶甘草的方晶40针晶半夏的针晶束白及的针晶束41钩藤的砂晶淫羊藿的柱晶423）脂肪和脂肪油是由脂肪酸和甘油结合而成的脂。常温下呈固体或半固体的称为脂，如柯柯豆脂；呈液体的称为油，如芝麻油、大豆油。脂肪油常呈小滴状分散于细胞质中。检验：遇苏丹Ⅲ试液显橘红色或红色。花生子叶细胞43黑芝麻油滴鲜橘皮中的油滴444）菊糖菊糖是由果糖分子聚合而成的，主要存在于菊科、桔梗科等部分植物根的薄壁细胞中（如木香、白术、桔梗、党参）菊糖能溶于水，在细胞中呈溶解状态存在，不溶于乙醇，乙醇处理后，可成球形、半球形或扇状结晶析出，久置不溶化。水合氯醛装片（不加热），可见呈扇形或不规则的菊糖团块，表面现放射状线纹，久置渐溶化。45菊糖桔梗--木香46菊糖—茅苍术475）黏液黏液为杂多糖，是植物正常的生理产物，多存在于种子、果实、根及根茎等的黏液细胞中（如白及、山药）。48山药的粘液细胞白及的粘液细胞（内含草酸钙针晶束）49菌类药材显微特征大多以子实体或菌核的形式入药，无淀粉粒和高等植物的显微特征。观察时应注意菌丝的形状、有无分枝、颜色、孢子的形态；结晶的有无及形态。50茯苓—水合氯醛装片未加热透化加热透化51冬虫夏草菌的菌丝52三、显微镜使用简介显微镜主要是由机械部分与光学部分组成，虽然新型显微镜不断面市，但其原理及各部分的构造均大同小异。机械部分光学部分53显微镜的构造54显微镜使用注意事项制片时盖玻片上不得有试液残留，避免污染物镜及载物台，损伤镜头。变换物镜时，切记先低倍、后高倍，先粗调、后微调。由低到高逐级变换。使用高倍物镜时，只能用细螺旋调节焦距，禁止用粗螺旋调节；也不得装卸载玻片。使用完毕，应将最小物镜与通光孔相对，关闭光源，罩好，收置起来。显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭55偏光的应用显微鉴别中，常利用某些物质具有双折射性的特点，采用偏光检测。淀粉粒在偏光显微镜下呈现黑十字现象；草酸钙结晶类型多样，在偏光显微镜下呈不同的多彩颜色；矿物类多具有偏光特性。其他如石细胞、纤维、导管等也呈现出不同的偏光特性。可作为药材鉴别的补充。56偏光显微镜下淀粉粒形态山药淀粉粒浙贝母淀粉粒马铃薯淀粉粒57偏光显微镜下各种结晶形态58四、中药显微制片1、药材粉末制片主要用于粉末状药材及含药材粉末的成方制剂的观察。药材粉末制备取干燥药材，研磨或锉成细粉（通常应过80目以上药筛）。制备粉末时需注意取样的代表性。例如：根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位，并全部磨粉，过筛，混匀，不得丢弃渣头。需观察淀粉粒时，一般干燥温度不能超过60℃，避免淀粉粒糊化，有碍观察。59制片注意事项1）透化时加热温度不能过高，以防水合氯醛试液沸腾太过，使组织内带入气泡；加热时应将载玻片不断移动，以免受热不匀而炸裂。2）如需观察菊糖等多糖物质，加水合氯醛试液不要加热。602.药材切面制片--徒手切片是日常检验中最为常用、简便的切片方法。切片前的药材预处理：1、质地软硬适中的样品可直接进行切片。2、质地坚硬的药材，需先软化后再切片，最方便常用的方法为水浸泡。3、过于柔软的样品，可将其浸入70%～95%乙醇中，约20分钟后可变硬些，再切片；或用硬物包裹后切片。61五、中药材及成药显微鉴别实例1.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别苦杏仁石细胞特征橙黄色贝壳形壁较厚较宽一边纹孔明显621.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别苦杏仁检验过程中个别厂家样品显微镜下找不到苦杏仁石细胞，怀疑未投料，采用HPLC法进行验证，未检测到苦杏仁苷，证明确实未投料。还有厂家的样品也找不到苦杏仁的石细胞，沟通时厂家坚称确实投料了，经HPLC法验证，能够检出苦杏仁苷后经了解，厂方使用的是沸水燀后脱皮苦杏仁。63紫菀下皮细胞长方形，垂周壁波状弯曲，有的含紫色色素。641.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别紫菀：检验时有个厂家样品中找不到紫菀的显微特征，采用TLC法验证也没有紫菀的特征斑点，之后让厂方提供了投料药材，经鉴定其投料药材不是紫菀正品。652一批造假西红花的鉴别西红花掺伪西红花66体视显微镜下西红花造假西红花67水浸泡后西红花造假西红花68西红花正品显微特征表皮细胞环纹及螺纹导管69造假西红花显微镜下结构无定型物植物纤维普通卷纸显微特征703海金沙合格品不合格品71海金沙—孢子孢子为四面体三角状圆锥形孢子外壁有颗粒状雕纹72海金沙—孢子合格品镜检特征不合格品镜检特征总灰分高达55%734.麦冬与山麦冬的鉴别74麦冬与山麦冬维管束比较韧皮部束16～22个麦冬横切面放大40倍韧皮部束7～15个山麦冬放大100倍75