86铜绿假单胞菌

铜绿假单胞菌蒋月婷非发酵菌(NonfermentativeBacilli)定义----一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌发酵型氧化型产碱型概述非发酵菌：G-b葡萄糖O/－需O2或兼性厌O2动力+/－氧化酶+/－分类：假单胞菌属产碱杆菌属不动杆菌属黄杆菌属莫拉杆菌属窄食单胞菌属金氏杆菌属艾肯菌属土壤杆菌属丛毛单胞菌属等嗜麦芽15%其他13%不动杆菌16%铜绿假单胞菌56%非发酵菌分离率假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群rRNAⅠ群/假单胞菌属rRNAⅡ群/伯克菌属rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属rRNAⅤ群/窄食单胞菌属其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等假单胞菌属Pseudomonas种类：铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)荧光假单胞菌(P.fluorescence)恶臭假单胞菌(P.putica)斯氏假单胞菌(P.stutizeri)曼多辛假单胞菌(P.mendocina)产碱假单胞菌(P.alcaligenes)假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)假单胞菌属Pseudomonas共同特点：G-b菌体细长单端鞭毛无芽胞专性需O2营养要求不高35℃生长，少数4℃、42℃生长葡萄糖O/－动力+氧化酶+可产多种色素：绿脓素荧光素脓玉红素各种菌产生的色素菌名色素颜色铜绿假单胞菌绿脓素、红脓素、青脓素、荧光素蓝、红、黑、黄色荧光假单胞菌荧光素黄绿色恶臭假单胞菌荧光素黄绿色斯氏假单胞菌未定名黄色素黄色洋葱伯克霍尔德菌未定名黄色素、紫色素黄色、紫色腐败希瓦讷拉菌未定名色素淡红褐色抵抗力：较强，对多种抗生素耐药临床意义：分布广泛，条件致病菌，主要引起皮肤粘膜受损部位感染和各种医院内感染假单胞菌属Pseudomonas各种标本血平板和Mac平板可疑菌落涂片革兰染色革兰阴性杆菌氧化酶(+)、OF：O非发酵菌鉴定系统鉴定到种微生物检验程序药敏试验假单胞菌属和不动杆菌属可做K-B法药敏试验，嗜麦芽窄食单胞菌只有3种药物的K-B法药敏标准，其余需用稀释法或Etest法抗生素敏感试验：A组：头孢他啶、美洛西林或替卡西林、哌拉西林、庆大霉素B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星C组：头孢噻肟或头孢曲松、氯霉素、奈替米星U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星或氧氟沙星、磺胺甲基异恶唑铜绿假单胞菌P.aeruginosa形态：G-b菌体长短不一球杆状或长丝状单端单鞭毛动力+无芽胞特性：专性需氧营养要求不高35℃+4℃－42℃+可形成多种不同形态的菌落产多种色素(主要为绿脓素、荧光素)铜绿假单胞菌生化反应：氧化酶+OF：O硝还+N2+液化明胶+枸橼酸盐+精双水解+乙酰胺酶+吲哚-革兰染色铜绿假单胞菌电镜图铜绿假单胞菌抗原：O抗原(外膜蛋白-保护性抗原脂多糖-型特异性)H抗原血清学分型抵抗力：抵抗力强耐干燥不耐热多重耐药在室温水中长期生存4℃不生长铜绿假单胞菌致病性广泛存在环境中的条件致病菌，是院内感染主要病原菌可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染、囊性纤维变性等有多种毒力因子：包括菌毛、荚膜多糖、内毒素、外毒素、绿脓菌素、蛋白酶、磷脂酶等铜绿假单胞菌粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的神经氨酸促进细菌侵入荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关内毒素、外毒素绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。在致病中起重要作用弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相应抗体形成复合物，沉积于感染组织中磷脂酶C微生物检验采集标本：各种临床标本医疗器械环境用品检验方法：直接镜检分离培养(血平、MAC平板)鉴定分型：血清学分型、质粒指纹图谱分型、脉冲场凝胶电泳分型等脓液痰尿液等血液环境用品分离培养直接涂片染色肉汤增菌血平板37℃18-24h可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）初步鉴定最后鉴定菌落色素非发酵菌鉴定系统鉴定革兰阴性杆菌氧化酶(+)血清分型检验程序分离培养普平：18-24h圆形大小不一边缘不整扁平湿润常呈融合态琼脂被染成绿或黄绿血平：扁平湿润有金属光泽琼脂被染成蓝绿或灰绿有溶血环MAC平：微小无光泽半透明48h后菌落呈棕色鉴定初步鉴定菌体形态菌落特征产色素气味氧化酶最终鉴定非发酵菌生化鉴定系统API-NE试条细菌耐药机制外膜通透性降低产生灭活酶或钝化酶主动外排系统将抗生素泵出胞外抗菌药物作用靶位改变膜孔蛋白突变生物膜屏障作用各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可能发生耐药。初代敏感菌株在治疗3－4天后可能发生耐药，有必要重复分离菌株本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基糖苷类联合治疗鉴定结果分析从临床标本中分离出来的铜绿假单胞菌，需要排除污染因素铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续三次痰培养阳性才能确立。典型型大肠菌样型粘液型侏儒型粗糙型铜绿的菌落分型粘液型（麦康凯平板）粘液型（血平板）菌落光滑凸起成粘液状侏儒型（麦康凯平板）细小，无光泽半透明菌落典型型（麦康凯平板）菌落呈灰绿色大小不一扁平湿润边缘不规则呈伞状伸展表面常可见金属光泽典型型（普通平板上）产绿脓素琼脂染成黄绿色粗糙型（麦康凯平板）菌落中央凸起边缘扁平表面粗糙大肠型（麦康凯平板）菌落圆形凸起似大肠埃希菌菌落常见非发酵菌初步分群鉴定试验假单胞不动杆产碱杆黄杆莫拉菌属菌属菌属菌属菌属氧化酶+-+++葡萄糖O/FO/-O/--O/F-动力+-+--MAC平板生长++++/--