实验1大肠杆菌的培养和分离实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录配制培养基LB固体培养基市场常见琼脂条实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录包器材包器材实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录条件:121℃、100kPa20-30min灭菌实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录菌种扩增•摇床震荡培养12h(于LB液体培养基中)本图来自十一学校实验用具•LB固体培养基•大肠杆菌菌液(LB液体培养基)•培养皿•接种环•酒精棉•酒精灯•镊子、火柴、记号笔实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录接种前准备•用肥皂洗手并使用酒精消毒。•顺序:点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录倒平板实验流程配制培养基包器材灭菌菌种扩增倒平板接种、划线培养观察记录接种、划线•灼烧接种环→•取菌液→•划线分离→烧至暗红接种、划线•灼烧接种环→•取菌液→•划线分离→菌液膜接种、划线•灼烧接种环→•取菌液→•划线分离→接种、划线①④③②划线分离为什么通过划线分离可得到单菌落?每划完一个区域要不要灼烧接种环?•倒置后做好标记,写在培养皿侧面划线分离我们的实验结果6、培养为什么要倒置培养?恒温37℃培养倒平板接种、划线操作流程实验2分离以尿素为氮源的微生物实验流程配制培养基包器材灭菌配制菌悬液倒平板涂布分离培养观察记录实验流程配制培养基包器材灭菌配制菌悬液倒平板涂布分离培养观察记录实验用具•LB固体培养基•尿素固体培养基•无菌尿素溶液•无菌水100mL/三角瓶1个9mL/试管2个•三角刮刀•微量移液器•枪头、枪头盒•1g土壤•尿素培养基(1L)葡萄糖10gNaCl4.8gK2HPO44.8g琼脂20g酚红0.01g尿素80g倒平板•尿素的灭菌(尿素在高温高压下易分解)配制菌悬液1个99ml无菌水2个9ml无菌水得10-2,10-3,10-4的菌悬液1g土壤稀释菌悬液(10-4)高浓度→低浓度,换枪头接种•取200ul菌悬液(10-4)涂布分离低浓度→高浓度,可不用换枪头涂布分离涂布前后三角刮刀需要灼烧吗?37℃倒置培养按浓度捆成一摞恒温37℃培养10-4、10-3,、10-2培养基的配制、培养皿包裹↓灭菌↙↘混合无菌尿素与培养基制备土壤菌悬液↓↓倒平板梯度稀释1000μL↘↙涂布分离100μL↓培养提醒学生养成实验好习惯!•要回收物品:枪头、牛皮纸、封口膜、橡皮筋•清洗三角瓶、试管•剩余培养基倒入垃圾桶,禁止倒入下水道•填写小组实验记录卡实验流程制备菌悬液涂布分离