热烈欢迎参加实验动物从业人员上岗培训的各位老师!考试形式:上机考试,时间为60分钟(到时间网络自动关机),共100道题,分为是非(40×0.5)题、单选题(40×1)和多选题(20×2),85分为合格。注意:请务必带好个人身份证方可入场考试!模拟考试网址:一.基本概念实验动物:指经人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制、遗传背景明确或来源清楚,应用于科学研究、教学、生产和鉴定以及其它科学实验的动物。亦称狭义的实验动物实验用动物:泛指所有应用于科学实验的动物,包括实验动物、野生动物、经济动物和观赏动物。也称广义的实验动物.实验动物科学诞生于20世纪50年代国际实验动物科学协会的简称为ICLAS,其网址为中国实验动物信息网:我国《实验动物质量管理法》颁布于1997年,由科技部联合技术监督局等单位共同颁布。《实验动物管理条例》是1988年经国务院批准颁布的世界最大的实验大、小鼠商品化生产、销售公司:美国查士利华实验室1961年,ICLA与WHO合作,于1979年改名为ICLAS20世纪40年代,美、日、法等过相继成立了实验动物学会或类似组织我国已建立啮齿类动物的种子中心(上海和北京)国家实验动物质量检测中心挂靠在中国医科院实验动物所GLP(良好实验室操作规范)是用于新药临床前安全性评价的法规《实验动物管理条例》规定,实验动物繁育和动物实验不能在同一区域。实验动物许可证的有效期为5年,生产许可证的申请必须种子来源可靠,有健全的质量管理制度,环境符合国家标准。许可证的发放向科技部门申请,由科技部门组织专家评审,合格后发放许可证。包括生产和使用许可证两种。国家种子中心、实验动物质量检测机构的主要任务(p82)近交系:连续20代或20代以上近亲交配所培育而成的品系。如BALB/C,C57BL/6J,DBA,C3H,A/He等(常以F加数字表示近交代数)。封闭群:以非近亲繁殖方式,不从外部引入新个体的前提下至少连续繁殖4代以上。引种数目不少于25对。如KM,SD,Wistar等杂交群:不同品系或种群间杂交产生的后代近交系小鼠常选用10个染色体上的13个生化位点作为纯度检测的方法,而大鼠一般选用9个位点;皮肤移植一般用同系异体移植同源突变系:两近交系除指明位点外其他基因完全相同重组近交系:两近交系杂交后再连续20代近交而成(以Χ表示)同源导入近交系:通过杂交-互交或回交等方式将一基因导入到近交系中遗传污染:管理疏忽,本品系与其他品系动物交配遗传漂变:饲养过程中可能发生的随机改变,多由于残留杂合基因的分离突变:基因组中某个核苷酸碱基的置换、缺失或插入引起等位基因的改变近交系数:表示近交程度普通动物:不携带规定的人畜共患病原和烈性传染病病原清洁动物:除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科研干扰大的病原无特定病原体动物:除清洁动物应排除的病原外,不携带潜在感染和条件致病、对科学实验干扰大的病原无菌动物:不可检出一切生命体普通级兔应排除兔出血症病毒、普通豚鼠应排除淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、普通猴应排除猴B病毒实验动物按遗传控制可分为:近交系、封闭群、杂交群和突变系实验动物按微生物控制可分为:普通动物、清洁动物、无特定病原体(SPF)和无菌动物3R指的是:减少(Reduction)、替代(Replacement)、优化(Refinement).动物福利除了生理福利外,还包括心理福利、卫生福利、行为福利、环境福利普通级、清洁级和SPF级动物微生物和寄生虫的检测频率均为每三个月检测一次。无菌动物为每年至少检测一次.取样数量:群体〈100,取样〉5只;群体大小为100-500,取样〉10;群体〉500,取样〉20只;无菌动物每个隔离器取样2只2000年6月,人类基因组计划完成。小鼠是继人之后第二个完成基因测序的哺乳动物。小鼠与人类功能基因的同源性高达90%以上,是最为理想的模式动物,并作为基因改造的材料实验动物的环境与设施动物实验可用R=(A+B+C)×D+E公式表示,其中R表示动物实验中实验动物的总反应;A表示动物种间的共同反应;B表示动物的品种品系特有反应;C表示动物的个体反应;D表示环境因素;E表示实验误差。(1959年由Russell和Bruch提出动物的表现型受周围环境的影响而出现不同的演出型)光照对动物的是个强烈的刺激因素,起定时器的作用屏障设施内,粗效空气过滤器设置在取风口;中效过滤器设置在正压处;高效过滤器设置在系统末端生物安全柜为活病原微生物的动物实验设施;动\植物确实存在或潜在危害的,该实验需在感染性动物实验设施内进行普通环境饲养普通级动物;屏障环境饲养清洁级或SPF级动物;隔离环境饲养无菌动物实验动物环境指标中,只有氨气浓度是动态检测指标;屏障环境的空气洁净度指标为10000级国标中,生产型和使用型屏障系统大小鼠温度为20-26℃;相对湿度为40%-70%;换气次数为10-20次/h;气流速度为0.1-0.2m/s;压强梯度为20-50Pa国标中,使用型屏障系统工作照度为150-300lx;动物照度为15-20lx实验动物环境检测标准规定,普通犬\兔繁育生产设施内(生产型)温度为16-28℃;湿度为40-70%;换气次数为8-10次/h;气流速度0.1-0.2m/s;工作照度为150-300lx;动物照度100-200lx;(使用型)温度为16-26℃;湿度为40-70%;换气次数为8-10次/h;气流速度0.1-0.2m/s;工作照度为150-300lx;动物照度100-200lx笼器具产品抽检数量,笼箱及引水瓶为10-15只/次/批;网盖和笼架为3-5只/次/批动物适宜的温度为21-27℃,(相对)湿度为40-70%国标中规定,实验动物室氨浓度应小于14mg/m3;噪音低于60db;实验动物设施的空调系统按空气处理设备的设置不同一般分为集中式、局部式和半集中式。集中式即集中冷源,并将全部空气处理设备集中在同一机房内,处理过空气经风道、风口送至屏障设施内。空气乱流利用稀释作用是室内产生的灰尘均匀扩散而被“冲淡”,一般采用上送下回的形式,使气流自上而下与尘埃重力沉降方向一致。空气乱流是流向单一,并具有一定的、均匀的断面速度的气流组织形式。实验动物饲料与营养豚鼠和猕猴体内不能合成维生素C,须从饲料中获得大小鼠、兔目前常用的是颗粒饲料;贮存的颗粒饲料的含水率应低于11%饲料灭菌的最佳方式是辐照必须氨基酸只能从饲料中提供,而非必须氨基酸体内能合成,无须从饲料中供给。碳水化合物是体内能量的主要来源,其中粗纤维可促进胃肠蠕动;无氮浸出物可提供热能并可转化成脂肪饲料中脂肪有真脂肪(由脂肪酸和甘油组成)和类脂肪(由脂肪酸和甘油及其他含氮物质组成)饲料抽样数量为0.5Kg/次/批维生素A维持上皮的形态与功能;维生素D参与钙磷调节;维生素E与生殖泌乳有关大小鼠饲料水分≤10%;豚鼠维持料蛋白≥17%,繁殖料蛋白≥20%;兔维持饲料粗蛋白≥14%,繁殖料粗蛋白≥17%;犬维持饲料粗蛋白≥20%,繁殖料粗蛋白≥24%实验动物的生物学特性一.小鼠属于啮齿目,初生为红色,12-13天睁眼,妊娠期19-21天,哺乳期为20-22天,雌性有5对乳头,成年体重为18-40克,一般生育期为1年,寿命为1-2年.体温为36.5℃,KM鼠每胎产8-15只,维生素A过量可致繁殖紊乱二.大鼠啮齿目,新生为红色,约5-6克;8-10天长牙;14-17天睁眼;妊娠期哺乳期均为21天;为常年多发情动物;成年体重为250-450克;寿命为2-3年;封闭群平均产仔数为8只;尾是散热器官;无胆囊;体温37.5℃。近交系大鼠:ACI,F344,SHR,BN,AGUS;封闭群:Long-Evans,Brown-Norway(饲养类),SD,Wistar三.豚鼠:啮齿目,草食动物,妊娠期为68天,哺乳期21天,刚出生就有视力,初生体重75-100克,有1对乳头,每胎产3-4只,一般寿命为6年;体内缺少合成维生素C的酶(猴),免疫学研究首选动物,是最早获得无菌动物的实验动物。无尾巴四.地鼠啮齿目,有冬眠和假妊娠现象,妊娠期16天,是哺乳动物中妊娠期最短的动物;哺乳期21天;有颊囊,可贮存食物;为全年多发情动物;寿命2-2.5年。中国地鼠无胆囊,有5对乳腺;金黄地鼠有乳腺6-7对。五.兔兔形目;有圆小囊;是眼科研究首选动物;妊娠期32天,哺乳期42天;为刺激性排卵动物(猫);有季节性换毛现象;有乳腺4对;其胸腔构造与其他动物不同;有食粪癖;也有假妊娠现象;对缺钙耐受力强;寿命8年左右;体温为39.2℃六.犬食肉目,红绿色盲,几乎没汗腺,春秋季单发情动物,妊娠期60天,哺乳期60天,性周期180天,对脂肪耐受强.对呕吐敏感,成年正常体温是38℃,易建立条件反射七.猫除夏季外均可发情,属季节性多发情动物;善攀登和跳跃;妊娠期63天,哺乳期60天;有4对乳头;可根据光线的强弱灵敏的调节瞳孔;喜孤独自由的生活;饲料中重点补充维生素.八.猴有颊囊;有月经周期,与人的生殖生理非常接近;妊娠期165天左右,哺乳期6个月以上;对呕吐反应灵敏;主要组织相容性抗原(RhLA)与人的HLA相似;能用手操纵工具;是脊髓灰质炎疫苗研究鉴定的动物八.小型猪偶蹄目;常年多发情;妊娠期114,哺乳期1个月;是皮肤烧伤实验研究的首选动物;平均体温为38℃九.沙鼠啮齿目,大小介于大、小鼠之间,成年重78克;常年多发情;性成熟10-12月;平均寿命2-4年;有自发性癫痫病;可建立脑缺血模型;应激时肾上腺释放糖皮质激素和黄体酮牛羊属于偶蹄目,草食性多胃动物马属于奇蹄目.鼠兔与家兔体形相似,是草食动物;有换毛现象;实验方法动物标记中染色法最简单、适用于小动物短期实验;常用染色液:苦味酸、硝酸银、品红;染色编号方法:先左后右,先上后下,单一颜色可标记1-10号;烙印常用溶于酒精的黑墨染色;还有耳缘剪孔法局部麻醉常用浸润麻醉大小鼠豚鼠肌肉注射部位:大腿外侧面腹腔注射常选择在腹白线两侧大小鼠尿液采集适宜用代谢笼,采集未污染尿液则应采用导尿法;大小鼠大量采血常采用股动脉采血犬、猫的皮下注射一般在大腿外侧,静脉注射不超过10ml小鼠(20g)一般灌胃不超过0.8ml、腹腔注射不超过1.0ml、静脉注射不超过0.8ml大鼠一般灌胃不超过5ml、腹腔注射不超过4ml、静脉注射不超过4ml静脉注射兔:耳缘静脉,最大容量10ml;猴:皮下浅层静脉(小隐、股、头静脉),最大容量20ml;犬最大容量100ml。肌肉注射最大给药量猴:3ml;犬:4ml。兔少量多次采血一般为耳缘静脉采血动物实验中,去除被毛的方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脱毛法;小动物一般采用剪毛法、大动物采用剃毛法吸入麻醉常用乙醚、氯仿;腹腔和静脉麻醉一般持续时间长,过程平稳,常用巴比妥类、氯氨酮、水合氯醛、氨基甲酸等;全身麻醉时一般禁食不少于8小时化学药物致死最好采用CO2、KCl;家兔处死常用空气栓塞法动物模型按产生原因分为:自发性模型:应用价值高,与人类相应疾病相似程度高,但来源困难,种类有限诱发性模型:来源多,条件易控制、但相似程度稍差;诱发性肿瘤模型分为原位和异位诱发抗疾病模型:特定疾病不在某动物身上发生生物医学模型:某些动物特殊的生理结构如兔的胸腔结构按中医分类:阴虚、阳虚、气虚、血虚、肾虚、厥脱症裸鼠为先天性无胸腺,常用于人体肿瘤移植研究CBA/CIH为先天性B淋巴细胞功能缺陷Beige小鼠为先天性NK细胞功能缺陷SHR为自发性高血压大鼠,适合筛选抗高血压药物实验动物选择与应用一般幼龄动物对实验因素较为敏感,慢性实验因周期长而通常选用幼龄动物。一般实验都选用成年动物清洁动物是国内科研标准动物,而SPF动物是国际公认的标准动物一般来说,淡水中生活的动物尿液是低渗的,海水