第六章 天然药毒物和毒品 法医毒物分析

潘爱华Tel:87330563（o）Email:[e-mail]第六章天然药毒物天然药毒物的特点：1.中毒原因复杂2.毒物来源复杂3.化学成分复杂4.化学结构和理化性质差异大5.（药）毒理作用各异且毒性差异较大6.检材的性状、组成和含量各异天然药毒物分析的特点：1.确定分析目的物难2.筛查毒物难3.提取分离毒物难4.检测毒物难对策：了解常见有毒动植物和中草药的名称和俗称、来源、成分、形态、分布、用途；了解其毒性大小、中毒症状、体内过程等方面的知识；了解案情、分析案情，以寻找检验方向、合理制定分析方案。第一节形态学检验天然药毒物案例，其体外检材往往都保留有原植物的部分形态特征。针对天然药毒物检材的这一特点，可应用形态学方法对天然药毒物进行检验。第一节形态学检验方法1．外观性状鉴别：形状，大小，颜色，表面特征，质地，折断面，气和味。2．显微形态鉴别：通过对组织结构、细胞形态、细胞后含物等某些特征进行鉴别。细胞后含物是细胞中的非生命物质，是新陈代谢的积累物。后含物：营养物、代谢后废物可见形状（淀粉）；溶解状态无形物（生物碱，甙类，鞣质）形态和成分是观察的重点（特征性）。显微形态鉴别用适当液体或试剂处理后加盖玻片封藏1)用水或稀甘油处理2)用水合氯醛处理3)用乙醚-乙醇溶液处理1)粉末制片2)组织切片：横切片表面片较硬或皱缩先水泡软再切片1)间苯三酚试剂：2)氯化锌碘试3)碘试剂：4)Millon试剂：5)苏丹Ⅲ试剂：6)硫酸（1：1）：7）醋酸：制片制备封片（装片）化学显色第二节天然毒品一、阿片类中枢神经抑制剂主要包括:阿片类生物碱海洛因（二乙酰吗啡）二氢可待因酮二氢吗啡酮等。半合成鸦片类生物碱：吗啡(morphine)、可待因(codeine)、那可汀(narcotine)、罂粟碱(papaverine)、蒂巴因(thebaine)吗啡是鸦片的主要成分，具有麻醉镇痛作用；可待因是鸦片中镇咳止痛的有效成分。种植地域：（原产地：小亚细亚）经世界卫生组织批准，只允许印度、土耳其等少数国家种植限量的罂粟。非法种植区：“金三角”：亚洲缅甸、泰国、老挝三国交界和“金新月”：阿富汗、巴基斯坦和伊朗交界HeroinChasingDragonInjection海洛因滥用情况简介阿片类是当今滥用最为广泛、依赖性最强、对社会危害最大的毒品。海洛因的滥用尤为严重。（一）毒品鉴定1.形态学检验（1）罂粟果（壳）的形态和性状1）外观与易混淆植物区别：野罂粟、丽春花（虞美人）2）显微形态（2）鸦片的外观性状生鸦片：棕黑色膏状物熟鸦片：棕色带金黄，光滑，大量掺杂物1-4号海洛因颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色（3）海洛因外观性状（3）海洛因外观性状常见非法贩卖形态：粉末、压成长方块状，一般用塑料薄膜热封，外面通常用黄色不透明的胶带纸缠绕，有250g、350g等不同规格包装。零散毒品交易中的海洛因，一般用方形或长方形白纸包装，每包0.1g到1g不等。2.阿片生物碱的检验（1）结构性质和检材处理吗啡：两性，只能在弱碱性(pH8.5-9.3)从水溶液游离析出,不溶于氯仿,溶于氯仿-醇的混合溶剂；盐酸盐溶于水，不溶于氯仿可待因：不具两性,溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂海洛因：溶于氯仿，盐酸盐易溶于氯仿,碱水解成单乙酰吗啡和吗啡，镇痛作用是吗啡的4-8倍那可汀、蒂巴因、罂粟碱：碱性,盐酸盐易溶于水或氯仿（2）显色反应（预试验）1）甲醛－硫酸（Marquis试剂）反应2）钼酸铵－硫酸（Frohde试剂）反应吗啡、海洛因，紫转灰紫；可待因，蓝绿3）亚硒酸－浓硫酸（Mecke试剂）反应吗啡、海洛因显深绿色可待因显蓝绿色罂粟碱显暗蓝色吗啡、海洛因、可待因，显紫红色或紫堇色（3）薄层色谱法灵敏度较低，仅适用于体外检材改良碘化铋钾显色（4）高效液相色谱法固定相：C18最普遍，氰柱分离效果较好色谱条件：YWG-C18柱(46mm×250mm）;流动相为甲醇:水(3:7),内含0.5%三乙胺,用冰醋酸调pH=6.8；流速1mL/min；检测波长254nm；柱温30℃（5）气相色谱法色谱柱：OV-17（12m×0.53mm）载气：氮气，流速2ml/min；柱温：起始温度150℃（1min）→10℃/min→200℃→20℃/min→270℃(6min)进样口温度260℃检测器温度280℃。检测器：FID或NPD。检测对象：吗啡、可待因、那可汀、蒂巴因、罂粟碱（6）海洛因中掺杂物的检验用于海洛因中掺杂物分析的常用方法有GC/MS、IR、UV、原子发射光谱、溶解度试验和沉淀反应等。主要掺杂物：有机小分子掺杂物：扑热息痛、咖啡因、茶碱、苯巴比妥分析方法：气质联用分析气质联用分析色谱柱：BPX-5（30m×0.22mm×0.25μm）载气：氦气，流速1.5ml/min；柱温：初温160℃（1min)→10℃/min→280℃(23min)进样口温度280℃传输线温度260℃。质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度200℃，扫描范围40–450amu。（二）体内海洛因及其代谢物的检测1.体内代谢与取材确认滥用海洛因的证据。尿液：海洛因定性分析的最佳检材。检出时限：不超过72hr。组织和其它体液：中毒死亡案例，胆汁含量较高血液：含量很低毛发：一般在尿检阴性时，需了解涉毒史2.筛查尿液：免疫分析3.确证（1）检材处理：适于尿、血液、组织（匀浆）游离吗啡、O6-乙酰吗啡检测调节pH8.7,添加内标（如乙基吗啡）二氯甲烷:异丙醇（9：1）提取可酸反提净化(必要时）挥干有机溶剂衍生化（丙酰化、硅烷化等）总吗啡、O6-乙酰吗啡检测需在提取前水解。若检测吗啡，可酸水解；若检测O6-乙酰吗啡，需酶解，不能采取乙酰化衍生法3.确证（1）检材处理：毛发处理依次用甲醇、水超声清洗2次，晾干，剪成1mm长小段称取20-30mg，添加内标，水解调节pH8.7氯仿:异丙醇（9：1）提取挥干有机溶剂衍生化（丙酰化、硅烷化等）残留物可做衍生化（如TFA法），备检。（2）气/质联用确认色谱柱：DB-5（30m×0.25mm×0.25μm）载气：氦气，流速1.0ml/min；柱温：初温200℃（1min)→10℃/min→280℃(10min)进样口温度280℃传输线温度260℃。质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度250℃，扫描范围40–450amu。检测:6-乙酰吗啡，确证海洛因滥用GC/MS：GC时衍生（甲基硅烷化）二、大麻(marijuana，cannabis)简介致幻药；盛产于亚洲与北美，以印度大麻最为著名。主要活性成分为：四氢大麻酚，THC(tetrahydrocannbinol)大麻酚，CBN（cannabinol）大麻二酚，CBD（cannabidiol）大麻酚酸，cannabinolicacid二、大麻(marijuana，cannabis)简介吸食方式：大麻草手卷烟把大麻草/精放在普通香烟内燃吸把大麻油涂于香烟顶端1．大麻的形态学检验(1)植物形态(2)大麻制品及性状：大麻草：雌花、嫩叶、果实等活性成分量高部位加工而成，绿、黄、或褐色大麻树脂：活性部位分泌的树脂样物质大麻油：大麻草或树脂的有机溶剂萃取浓缩物(3)显微形态：碎片，水合氯醛透化,稀甘油封片非腺毛(刚毛):单细胞长弯曲尖叶状,基部膨大处有碳酸钙钟乳体；腺毛；薄壁组织中有细小草酸钙；花的乳突状毛绒2.大麻酚类化合物的检验（1）化学结构和理化性质不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂；性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化OCH3OHC5H11CH3CH3OOHC5H11CH3CH3CH3CH3OHC5H11CH3CH2OHC21H30O2=C21H26O2=C21H30O2=314.5310.4314.5四氢大麻酚大麻酚大麻二酚（2）化学方法:体外检材，筛选实验荧光反应：紫外光下，石油醚提取物干燥后喷冰醋酸，显绿色荧光快速Duguenois试剂：香夹兰素+乙醛的乙醇液，显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取紫色快蓝B反应：碱性，大麻酚类与快蓝B显红紫色（快蓝B试剂：快蓝B和无水硫酸钠1:100固体混合）（3）薄层色谱：吸附剂：硅胶G展开剂（1）环己烷：丙酮：二乙胺（80：15：5）（2）正己烷：苯：二乙胺（20：70：10）（3）石油醚：丙酮：浓氨气（80：18：2）显色剂：称50mg快蓝B溶解在20ml0.1MNaOH溶液中，注意现用现配TLC分析结果：多个斑点（与已知品对照）恒比洗脱HPLC色谱条件（4）高效液相色谱法梯度洗脱HPLC条件HPLC：反相色谱，紫外检测、电化学检测器areversedphasecolumn(Lichrocart,C18125-4mm,5m,Merck)；Themobilephase,amixtureofacetonitrile—phosphatebuffer(pH5.0)(65:35(v/v));Theflowrate,1.5ml/min（5）气相色谱法色谱柱：OV-17（30m×0.25mm×0.25μm）载气：氮气，流速1mL/min；柱温：起始温度150℃（1min）→10℃/min→260℃(6min)进样口温度300℃检测器温度300℃检测器：FID（二）体内大麻酚类化合物的检测1.THC的体内代谢过程长期吸食可在脂肪中积蓄，体内排除较慢尿中主要为四氢大麻酚酸，尿样常呈酸性。2.检测采集与处理一般采集尿、血或毛发，若可检出四氢大麻酚酸，则可作为吸食大麻的直接证据。提取：先碱水解，己烷-乙酸乙酯混合溶剂提取。溶剂挥干，必要时衍生化。THC的体内代谢途径C5H11OHOCH3CH3CH2OHC5H11OHOCH3CH3CH3C5H11OHOCH3CH3COOHC5H11OHOCH3CH3CH3OHC5H11OHOCH3CH3CH2OHOHTHC11-OH-THC11-COOH-THCconjugation8-OH-THC8,11-di-OH-THC3.GC/MS分析(羧基和酚羟基衍生)：方法1：适于尿、血液三种大麻酚分析和三种代谢物（各有两异构体）取样1mL添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8,酶解2mol/LHCl调节pH7-8，己烷:乙酸乙酯（7：1）提取冰醋酸调节pH4-5，己烷:乙酸乙酯（7：1）提取合并提取液，60℃挥干有机溶剂衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）方法1续：适于尿、血液大麻酚酸的提取取样1mL添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8,酶解调节至pH4-5己烷:乙酸乙酯（7：1）提取60℃挥干有机溶剂衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）方法2：毛发处理（大麻酚酸的提取）依次用二氯甲烷，晾干，剪成1mm长小段称取50-100mg，添加内标加1mL1mol/mLNaOH，80℃水解20min1mL冰醋酸酸化己烷:乙酸乙酯（9：1）提取挥干有机溶剂衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气/质联用确认色谱柱：DB-5（30m×0.25mm×0.25μm）载气：氦气，流速1.0ml/min；柱温：初温150℃（1min)→30℃/min→240℃(0.5min)→3℃/min→280℃(1min)→30℃/min→300℃(0.5min)进样口温度290℃传输线温度280℃。质谱条件：EI电离源，电子能量70eV，离子源温度250℃，扫描范围40–450amu。体内主要代谢物THC-COOH衍生化质谱图三、可卡因(cocaine)盛产于南美（古柯叶）早在5000年前这种植物就出现在厄瓜多尔一带，被安第斯山的土著居民——古印第安人奉为“圣草”，1860年德国化学家尼曼(AlertNiemann)从古柯叶中分离热带山地常绿灌木-古柯树，性喜温暖、潮湿，株高约2-4米，树叶茂密，叶片长3-7厘米，呈长椭圆形，边缘光滑，其形状和味道均类似茶叶。古柯树花小，每朵5瓣，花色黄白。果实呈红色，核内含一枚种籽。古柯树根系发达，生命力强