临床常用免疫学检查一、血清免疫球蛋白(Ig)测定1.Ig减低见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷、联合免疫缺陷的病人及长期使用免疫抑制剂的患者。2.Ig单克隆性增高仅有某一种Ig增高而其他Ig不增高。主要见于免疫增殖性疾病。①浆细胞病;②过敏性疾病。3.Ig多克隆性增高表现为IgG、IgA、IgM均增高。常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以及系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。二、血清补体的检查(一)总补体溶血活性(CH50)测定主要反映补体经典激活途径的活化程度。1.CH50增高见于各种急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤等。2.CH50减低(1)补体成分大量消耗:血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、SLE、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎及同种异体移植排斥反应。(2)补体大量丢失:外伤、手术和大失血。(3)补体合成不足:肝硬化、慢性肝炎和重型肝炎。(二)血清C3测定无论经典途径还是旁路途径C3都参与,可反映出补体的活化情况。1.C3增高各种急性炎症、传染病早期、某些恶性肿瘤(以肝癌最明显)及排异反应等。2.C3降低肾炎的病因鉴别:链球菌感染肾炎血清C3减少,病毒性肾炎血清C3含量正常。免疫性疾病进展期:SLE,膜增殖性肾炎等。三、细胞免疫检查(一)T细胞免疫检测1.T细胞花结形成试验所得的百分率基本上代表了T细胞占淋巴细胞的百分率。数量升高见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等,降低见于免疫缺陷性疾病等。2.T细胞转化试验转化率降低,见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。功能3.T细胞分化抗原测定T细胞膜表面分子具有不同的抗原性,主要有CD2、CD3、CD4、CD8等。(1)CD3分子:表达于所有成熟的T淋巴细胞表面,T细胞特有标志,反映T细胞总数的变化。(2)CD4分子:辅助性T细胞(Th)表达。(3)CD8分子:是抑制、杀伤性T细胞的标志。(4)CD4/CD8比值:降低提示免疫抑制;升高提示亢进,免疫性疾病。(二)B细胞免疫检测1.B细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)测定SmIg是B细胞的特征表面标志。早期的前B细胞表达IgM,成熟的B细胞表面IgD、IgM或IgA、IgE等。主要用于检测外周血B淋巴细胞的百分率。SmIg阳性细胞降低,见于体液免疫缺陷性疾病;SmIg阳性细胞增加,见于淋巴白血病、多毛白血病、巨球蛋白血症等。2.红细胞-抗体-补体花结形成试验反映外周血B淋巴细胞的百分率。3.B细胞分化抗原测定CD19、CD20、CD22。CD19是最重要的B细胞标记分子。升高见于B细胞系统的恶性肿瘤;CD19细胞降低见于体液免疫缺陷病及使用化疗或免疫抑制剂后。四、感染免疫检测(一)链球菌溶血素“O”(ASO)测定抗链球菌溶血素“O”是机体感染溶血性链球菌后产生的相应抗体,升高提示曾有溶血性链球菌感染,不一定是近期感染的指标。正常人ASO<500U。ASO升高常见于A群溶血性链球菌感染及感染后免疫反应所致的疾病,如感染性心内膜炎及扁桃体炎,风湿热、链球菌感染后急性肾小球肾炎等。(二)伤寒与副伤寒的血清学检查1.肥达(Widal)反应检测伤寒抗体。参考值:“O”凝集价<1:80;鞭毛抗原“H”凝集价<1:160;副伤寒杆菌甲、乙、丙的鞭毛抗原“A”、“B”、“C”凝集价<1:80。在病程中逐周复查,若抗体效价依此递增或恢复期较急性期升高4倍或以上,则有诊断意义。“O”、“H”均升高则伤寒感染的可能性大;若“O”升高而“H”不升高,则可能是伤寒类感染的早期;若“H”升高而“O”不升高,则有可能是预防接种或是非特异性的“回忆反应”。2.酶联免疫吸附试验(ELISA)特异性IgM抗体,伤寒早期诊断。vi抗体伤寒带菌者。3.胶乳凝集试验(LAT)检测伤寒沙门菌“Vi”、“H”、“O”抗原,早期诊断。(三)结核杆菌抗体(TB-Ab)和DNA测定结核杆菌抗体阳性,表示有结核分枝菌感染,其灵敏度超过90%、特异性超85%,比传统的痰涂片和细菌培养方法简便、快捷、灵敏。聚合酶链反应(PCR)检测DNA特异性更强、灵敏度更高,但应防止污染引起的假阳性。(四)幽门螺杆菌抗体(HP-Ab)测定HP-Ab阳性见于胃、十二指肠幽门螺杆菌感染,如胃炎、消化性溃疡等,其敏感性大于90%,特异性为85%。HP-Ab阳性也可见于胃癌和胃黏膜相关性淋巴样组织淋巴瘤。(五)汉坦病毒(HTV)抗体IgM测定抗-IgM是感染HTV后早期出现于患者血清中的一种特异性抗体。有助于诊断肾综合征出血热。(六)流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定流行性乙型脑炎病毒抗体IgM测定,有助于乙型脑炎的早期诊断。(七)寄生虫感染免疫检测1.弓形虫抗体和DNA测定IgM型弓形虫抗体升高是近期感染的指标,IgG型弓形虫抗体增高是既往感染的指标。DNA阳性对弓形虫病的诊断意义更大。2.日本血吸虫抗体测定机体感染日本血吸虫后可产生特异性抗体。在血清中检出特异性IgM、IgG和IgE抗体,有利于临床诊断和流行病学的调查。3.囊虫抗体测定囊虫是一种人和猪共患的寄生虫病。感染囊虫后,可在血清和脑脊液中出现特异IgG抗体,其特异性和敏感性较高。4.疟原虫抗体和抗原测定疟原虫抗体阳性提示近期有疟原虫感染,抗原检测或血液涂片找原虫即可确诊。(八)梅毒血清学检查非特异性抗体(反应素)检测为定性试验,梅毒的初筛,非特异性。特异性抗体检测有助于梅毒的确诊。(九)艾滋病病毒抗体及RNA测定感染HIV数周到半年后,患者体内可出现抗-HIV抗体。检测抗-HIV抗体有助于艾滋病的诊断。初筛试验敏感性高但特异性差。确诊试验有利于确诊和早期诊断。五、肿瘤标志物检测肿瘤标志物是指能够区分肿瘤或非肿瘤的化学物质,包括肿瘤抗原、激素、受体、酶与同工酶、癌基因及其产物等百余种。血清甲胎蛋白(AFP)测定癌胚抗原(CEA)测定癌抗原125(CA125)测定癌抗原15-3(CA15-3)测定组织多肽抗原(TPA)测定前列腺特异抗原(PSA)测定(一)血清甲胎蛋白(AFP)测定参考值:血清<25ug/L(25ng/ml)临床意义1.AFP是目前诊断肝细胞癌最特异的标志物,高于300ug/L诊断阈值。2.病毒性肝炎、肝硬化时,随着受损肝细胞的修复再生,幼稚化的肝细胞重新具有产生AFP的能力,但常低于200ug/L。3.妊娠及其他亦可高。(二)癌胚抗原(CEA)测定恶性肿癌患者的血清中可发现CEA含量异常升高。常用于诊断消化器官的癌症(结肠癌、胃癌、胰腺癌、转移性肝癌等)。(三)癌抗原125(CA125)测定CA125为一种糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内,主要用于辅助诊断恶性浆液性卵巢癌等。(四)癌抗原15-3(CA15-3)测定CA15-3是一种乳腺癌相关抗原,对乳腺癌的诊断及术后随访临测有一定的价值。(五)组织多肽抗原(TPA)测定TPA是一种非特异性肿瘤标志物,血清中TPA增高主要用于辅助诊断迅速增殖的恶性肿瘤,且在恶性肿瘤的疗效观察方面敏感性较高。(六)前列腺特异抗原(PSA)测定PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶,在前列腺癌时,前列腺腺管破坏导致血清PSA水平明显升高。六、自身抗体检查类风湿因子(RF)抗核抗体(ANA)抗双链DNA抗体抗RNP抗体抗Sm抗体抗线粒体抗体(AMA)抗甲状腺球蛋白抗体(ATG)抗甲状腺微粒体抗体(ATM)抗平滑肌抗体(ASMA)(一)类风湿因子(RF)检查RF是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体,主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。1.类风湿性关节炎阳性且滴度较高。2.其他:SLE、硬皮病、皮肌炎,感染性疾病,正常老年人。(二)抗核抗体(ANA)的检查抗核抗体(ANA)是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称,无器官及种族特异性。阳性主要见于系统性红斑狼疮(SLE)。抗双链DNA抗体是SLE的活动性标志。可提取性核抗原(ENA)抗体谱,主要包括抗RNP抗体和抗Sm抗体,用以诊断自身免疫性疾病。抗Sm抗体为SLE所特有;抗RNP抗体阳性主要见于混合性结缔组织病。狼疮细胞(LE细胞)检查阳性,主要见于未经治疗的SLE病人。(三)抗组织和抗细胞浆抗体检测1.抗线粒体抗体(AMA)——是一组以线粒体为靶抗原的自身抗体,主要是IgG。阳性主要见于原发性胆汁性肝硬化。2.抗甲状腺球蛋白抗体(ATG)——是诊断甲状腺自身免疫性疾病的一个特异性指标。3.抗甲状腺微粒体抗体(ATM)——阳性主要见于桥本甲状腺炎。4.抗平滑肌抗体(ASMA)——阳性主要见于自身免疫性肝炎(如狼疮性肝炎)、原发性胆汁性肝硬化、急性病毒性肝炎等。七、循环免疫复合物(CIC)测定免疫复合物(IC)是抗原抗体相结合的产物。测定CIC对免疫复合物疾病的诊断、疗效观察、预后判断,均有重要意义。CIC为非特异性诊断指标,阳性可见于自身免疫性疾病、急性链球菌感染手肾炎、乙型病毒性肝炎、感染性心内膜炎、麻风等。八、C反应蛋白(CRP)测定C反应蛋白是肝脏合成的一种能与肺炎链球菌胞壁上的C多糖体起沉淀反应的急性时相蛋白质。1.早期诊断某些疾病:各种急性化脓性炎症、菌血症、组织坏死、恶性肿瘤、结缔组织疾病2.鉴别功能性疾患与器质性疾患3.风湿热等疾病的动态观察4.区分细菌感染与病毒感染5.CRP与血沉